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HPV不同基因型感染在宫颈病变过程中的研究

发表时间：2020/1/2 来源：《医师在线》2019年10月19期作者：魏剑林

[导读] 基于人乳头瘤病毒（HPV）的基因分型，研究宫颈炎，宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌患者中HPV感染与宫颈病变之间的关联。

　　　　魏剑林
　　（南充市中心医院检验科；四川南充637000）
　　
　　［摘要］目的：基于人乳头瘤病毒（HPV）的基因分型，研究宫颈炎，宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌患者中HPV感染与宫颈病变之间的关联。方法：选择409名在我院接受宫颈活检的患者。其中的宫颈炎患者有200名和CIN患者为209名。将CIN患者分成三组，第一组76名，第二组患者71名，第三名患者53名，另外还有9名宫颈癌的患者。使用杂交芯片技术用于检测患者的宫颈分泌物，并参照组织病理学活检分型了21个HPV的DNA。结果：在409名的宫颈病变的患者中有350名患者感染了HPV，占感染总数的87.5%，其中有235名患者仅仅感染HPV，占61.7%。115名患者为多重感染。CIN组中第一组的感染率为86.8%，第二组的感染率为88.7%，第三组的感染率为90.5%。患有宫颈癌的患者必定感染HPV。CIN的患者的HPV的感染率明前高于宫颈炎组的感染率。结论：持续感染高危的HPV会增加CIN和宫颈癌的风险。HPV与 DNA分型对于宫颈癌的筛查和预防具有重要的临床意义。
　　［关键词］人乳头瘤病毒; 基因分型; 宫颈炎; CIN; 宫颈癌
　　引言：宫颈癌( cervical carcinoma) 是女性发病率第二高的恶性肿瘤的疾病，不仅发病率极高而且治疗困难。目前国内外对于宫颈癌的治疗与发病的原理研究很多，对HPV与宫颈癌的研究较为透彻，目前已经确定HPV的感染是宫颈癌的主要发病原因。人乳头瘤病毒可根据其致病的能力HR-HPV）和LR-HPV）两个主要类别。其中，LR-HPV仅可引起良性增生性的病症，但是HR-HPV会对机体持续感染能够引起宫颈癌。
　　 HPV感染是一种通过性行为进行传播的疾病，一般情况下机体不会感受到明显的一样，也没有病症。大多数人患有短暂性感染，但大多数人都会自动更新。可以消除HR-HPV的持续感染如果不及时治疗会导致宫颈鳞癌发生，最后它可能发展成宫颈癌。但是从HPV感染的到CIN再到宫颈癌的变化大约需要10年的时间。并且CIN是可以转变为正常。因此，进行HPV基因分型，在宫颈癌的排查和预防中发挥着重要的作用。
　　本文对在我院接受检查的409名患者，对其进行HPV与DNA的分型检测，对HPV的感染与宫颈疾病的病变关系进行探讨与分析，并明确患者基因的分型。
　　1.临床资料与方法
　　选择在我院接受检查的409名女性患者作为研究对象，患者的年龄在20岁到79岁之间，平均年龄为39.5岁，所有的患者均为已婚，临床资料齐全。对其进行DNA与HPV的分型检测，其中有15种为HＲ-HPV，其他6种为LＲ-HPV。
　　1.2检测方法
　　1.2.1 DNA样品的制备将样品原液在0.5 ml中于1000 ml离心1分钟，弃去上清液，并提取DNA。通过聚合酶链反应（PCR）扩增，余下的 DNA样品在-20°C下保存。
　　1.2.2 PCR扩增将PCR反应溶液和DNA聚合酶混合，扩增系统DNA模板是25μL反应。
　　1.2.3 PCR产物杂交（1）立即在冰浴中于95°C加热20μlPCR产物5分钟，立即加热至少2分钟，（2）在45°C条件下进行杂交实验（3）预热高向杂交孔中加入5 ml，孵育至少2分钟。
　　1.2.4 比较HPV子类型分布图，可以确定HPV子类型。一点是一次HPV感染，而两个或更多是多次感染。每个芯片都有一个PCR投影控制点（内部点），生物素检查点（杂交颜色检查点）。
　　1.结果
　　1.1宫颈病变患者的构成
　　患有宫颈炎的患者有200名，占总数的48.8%，CIN患者200名，三组的人数分别为76名、71名与53名，还有9名患者患有宫颈癌。

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　　2.2各个患者的感染情况
　　在409名的宫颈病变的患者中有350名患者感染了HPV，占感染总数87.5%，其中有235名患者仅仅感染HPV，占61.7%。115名患者为多重感染。CIN组中第一组的感染率为86.8%，第二组的感染率为88.7%，第三组的感染率为90.5%。
　　在宫颈炎组中，占HPV-16感染的22％。第一组HPV-16感染的概率为21. 2％。在第二组中，有40.5％的人感染了HPV 16，第三组中的感染的患者71.7％是HPV 16，子宫颈癌组则感染了100％的HPV16。
　　2.讨论
　　 HPV仅由双链环状DNA和病毒衣壳组，只对人类的皮肤和黏膜的上皮细胞具有感染能力。LR-HPV只能导致组织良性增生性疾病，但HR-HPV持续性染色会导致宫颈癌。但是，由于HPV感染CIN变成宫颈癌需要时间，HPV的致病性和及其基因有关，所以HPV与DNA分型检测方式在临床上起到重要的作用。
　　HR-HPV对机体的长期感染是宫颈鳞状细胞瘤的主要发生原因，根据文献显示，生殖器感染率越高，HPV感染的风险越高。孕妇中HPV感染的患病率为30％，由于宫颈样本对怀孕的影响，尚未对该研究进行评估。研究还发现，21-46岁女性中HPV感染的发生率超过60％。这可能是由于该年龄段的女性雌激素水平高和性行为过度频繁。
　　国内外的癌症协会对宫颈病变的原因进行排查的结果显示，特别突出了HR-HPV-16型，HPV16（HPV）是指16型人乳头瘤病毒。 HPV的类型很多，包括低风险的HPV感染主要导致生殖器感染，而高风险的HPV感染则导致生殖器癌症和宫颈上皮细胞疾病。 HPV16是高危型，HPV病毒会引起生殖器疣，长期感染可能与女性宫颈癌的发生有关。在宫颈炎组中，占HPV-16感染的22％。第一组HPV-16感染的概率为21. 2％。在第二组中，有40.5％的人感染了HPV 16，第三组中的感染的患者71.7％是HPV 16，子宫颈癌组则感染了100％的HPV16。如今女性宫颈病变的主要威胁仍然是16型HPV，由于疾病的严重性，第三组的感染率也有所增加，宫颈癌也已达到70％。另外，在感染HPV的患者中，阴道菌群的调节存在显着差异，主要是细菌乳酸菌的检出率和阴道念珠菌感染的清洁度，这很可能导致宫颈病变中发生HPV感染。
　　综上所述，HPV对宫颈癌与CIN的发生具有重要影响，采取分型的检测方式有利于宫颈疾病的检查、预防与治疗。
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