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在乙肝诊断中运用酶联免疫法检测乙肝PreS1抗原及抗体的探讨

发表时间：2020/1/6 来源：《医师在线》2019年10月20期作者：杨璇

[导读] 本文将探讨在乙肝诊断中运用酶联免疫法检测乙肝PreS1抗原及抗体情况。

　　
　　　　杨璇
　　（甘肃省定西市人民医院；甘肃定西743000）
　　
　　摘要：本文将探讨在乙肝诊断中运用酶联免疫法检测乙肝PreS1抗原及抗体情况。方法：本文选自2018年1月至2019年8月在本院接受诊断和治疗的乙肝患者中，选择92例资料完整且接受两对半检查和酶联免疫吸附试验血清检查的患者作为研究对象。患者PreS1抗原以及抗体阳性情况分析在本次研究中，发现乙肝大三阳患者的PreS1抗原阳性及抗体阳性的检出率较高，达到80%以上。结论通过对HBVＭ和Pres1抗原及抗体检验的相关性分析得知HBeAg、HBsAg、HBcAb与Pres1抗原具有一定的相关性。
　　关键词：乙肝诊断；酶联免疫法检测；乙肝PreS1抗原；抗体
　　
　　0 引言
　　作为一种生活中常见的传染性疾病，乙肝的治疗技术也日益发展。其中对乙肝进行使用两对半检测是最为常见，它在乙肝病人的诊断及治疗等全过程中有着重要的作用。不过很多临床数据表明，两对半的检测对于诊断乙肝表面的抗原阳性是否有传染性等方面有一定的局限性，也就是一定的不足之处。所以要结合其它的手段来进行协助诊断。其中使用DNA检测是一项解决策略。不过由于HBV的病毒非常容易发生基因方面的变化，DNA检测也会假阳性现象的偶然发生，而且有些医院设备比较落后，技术也不太过关，DNA检测未必能够科学、规范地进行开展。为此，我们根据临床研究，发现乙肝PreSl抗体和抗原检测能够有效地帮助乙肝的确诊概率问题，对于乙肝患者具有较高的指导意义，为此本文将进行乙肝诊断中运用酶联免疫法检测乙肝PreS1抗原及抗体的研究。以下进行详细分析。
　　1 资料和方法
　　1.1 一般资料
　　本文选自2018年1月至2019年8月在本院接受诊断和治疗的乙肝患者中，选择92例资料完整且接受两对半检查和酶联免疫吸附试验血清检查的患者作为研究对象。
　　第一，纳入标准。①患者均行酶联免疫法进行诊断；②患者均行两对半诊断；③患者家属同意本次研究且签署知情同意书。
　　第二，排除标准。①伴有其他肝脏疾病；②患有肝脏其他器质性疾病。
　　第三，患者资料92例患者中男性51例，女性41例；患者年龄28～53岁，平均年龄（35.9±3.3）岁。其中，16例患者属于HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+（大三阳）；22例患者属于HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+（小三阳）；14例患者属于HBsAg+（单纯表面抗原阳性）；18例患者属于HBsAb+（单纯表面抗体阳性）；6例患者属于HBsAg+、HBcAb+（表面抗原及核心抗体阳性）；12例患者属于HBsAb+、HBcAb+（表面抗体及核心抗体阳性）；4例患者属于HBcAb+（核心抗体阳性）。
　　1.2 试剂的选择
　　PreSl抗原和抗体(英科新创厦门科技有限公司）检测专用试剂盒，乙肝“两对半”(英科新创厦门科技有限公司)检测专用试剂盒。
　　1.3 仪器
　　仪器型号为艾德康ELISA600全自动酶免分析仪。
　　1.4 方法
　　严格按照试剂说明书操作。每一个测试微孔板均设置空白、阴性对照、阳性对照。阳性检测结果按照：临界值(CO)=阴性对照孑LOD平均值×2．1(阴性对照OD均值小于0．05时以0．05计算)，样本OD值S／CO≥1者为阳性。反之为阴性。严格按照试剂盒的说明书进行操作，稀释洗涤液备用。在测试微孔板设计空白、阳性和阴性对照组，一孔、二孔和三孔分别作为空白对照、阳性对照和阴性对照，滴入HbsAg酶合物，空白对照不滴加，充分摇匀后，将样本置于板贴，置于保温箱半小时，温度设置为37℃，取下板贴，行洗板处理，运用洗涤液洗涤6次后拍干，加入底物液体，同时加入1滴显色剂，置于37℃中保温10min，最后加入终止液，运用酶标仪测定结果。
　　1.5 统计学处理
　　采用SPSSl9．0统计软件，相关分析应用Spearman相关分析，以P<0．05为差异有统计学意义。
　　2 结果
　　2.1 患者PreS1抗原以及抗体阳性情况分析在本次研究中，发现乙肝大三阳患者的PreS1抗原阳性及抗体阳性的检出率较高，达到80%以上。
　　2.2 患者PreS1抗原阳性、阴性与乙肝病毒标志物的Spearman相关性分析在本次研究中，PreS1抗原阳性组患者与抗原阴性组患者HBsAg、HBeAg、HBcAb数据对比差异具有统计学意义，说明PreS1抗原与HBsAg、HBeAg和HBcAb具有正相关关系。
　　2.3 HBVM与Pres1抗原的相关性分析：乙肝病毒Pres1抗原阴性组与阳性组的差异比较显示，与HBeAb和HBsAb阳性与否比较差异未见统计学意义（Ｐ＞0.05），与HBcAb、HBeAg、HBsAg阳性与否比较差异有统计学意义（Ｐ＜0.05）。提示HBsAg、HBcAb及HBeAg与Pres1抗原呈正相关。见表1。
　　

　　3 讨论
　　乙型肝炎主要借助“两对半”检测方法进行乙肝的诊断。但在传染性方面，“两对半”难以对其进行准确的评价。乙型肝炎病毒在侵入肝细胞后才能进行细胞内繁殖，研究显示HBV入侵肝细胞时Pres1蛋白发挥着重要作用。在乙肝病毒颗粒中一般含有HBsAg抗原物质，其中Dnae颗粒表面含有Pres1抗原，乙肝感染后可早期发现HBVDNA及HBsAg、HBeAg、DNA等与乙肝Pres1抗原密切相关，可用作对乙肝治疗效果进行评价的有效指标。乙肝诊断的检测主要依靠“两对半”，在预防、诊断和治疗以及乙肝患者预后的测试方法起着处理的作用，这不容忽视。但与此同时仍有大量的临床资料，根据“两对半”并检测是否感染患者治疗乙肝表面抗原阳性的效果有很大的局限性，因此需要协助实验的另一判断。DNA检测属于一个解决方案，但易产生假阳性结果，在同一时间，PCR技术的高灵敏度也容易产生高的假阳性，所以HBVDNA检测或不能更好地解决问题。在“两对半”试验中，小三阳患者主要有两种结果：①HBV的复制逐渐减少，传染性消失后病情趋于稳定，可以不进行治疗；②HBV发生基因突变，容易引起重症肝炎，预后较差。本研究结果显示，病毒标志物携带者16例查出Pres1抗原阳性２例，占12.3％；大三阳患者乙肝病毒复制活跃，感染性较高。但在实际生活中，多数患者为慢性乙肝病毒携带者，因此无传染性。小三阳患者53例查出Pres1抗原阳性３例，占56％。如果Pres1抗体存在，表明患者不具有传染性。另外，通过对HBVＭ和Pres1抗原及抗体检验的相关性分析得知HBsAg、HBeAg、HBcAb与Pres1抗原具有一定的相关性，对此，乙肝病毒Pres1抗原及抗体的检查有利于对乙肝感染的早期筛查。
　　
　　参考文献：
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　　[2]高丽,胡焉凡.酶联免疫法检测乙肝PreS1抗原及抗体在乙肝诊断中的应用价值[J].中国生化药物杂志,2017,37(6):30-32.
　　[3]唐莲,唐艳,朱咏贵等.酶联免疫法检测小儿乙肝PreS1抗原及抗体在乙肝诊断中的应用价值[J].实用检验医师杂志,2017,9(3):146-149.
　　[4]周素芹.酶联免疫法检测乙肝PreS1抗原及抗体在乙肝诊断中的应用研究[J].黑龙江医学,2014,38(10):1162-1163.
　　
　　