细菌检验中PCR检验法的应用意义及方法

发表时间:2020/3/17   来源:《健康世界》2020年2期   作者:刘吉
[导读] 阴道炎对于女性来说是需要严加注意并比较常见的一种疾病
         阴道炎对于女性来说是需要严加注意并比较常见的一种疾病,而主要诱发阴道炎的原因之一即阴道细菌感染。女性患有阴道炎之后,整个病期阶段是会呈现出进行性发展趋势的,甚至有可能会随着感染范围的扩大导致盆腔以及腹部的感染。较为严重的情况下,若是女性处于妊娠期,很有可能会由于此种原因而导致出现异位妊娠,或彻底失去生育能力。临床对于阴道炎患者的治疗过程当中,秉持着先了解女性患者阴道内细菌感染的具体情况以及感染的病情程度,然后采取针对有效的治疗措施。
         一、细菌培养过程当中比较常用的二种检验方法
         医院在对于患有阴道炎的女性进行阴道细菌检验时,比较常采取的两种手段即为PCR检验法和细菌培养法。细菌培养法是曾一度受到医院重视的检测细菌常用手法,但近些年来医疗技术不断进步,PCR检验法由于其独到的优势而逐渐受到重视并广泛使用。
         无论是进行PCR检验法还是细菌培养法,首先都要采取患者阴道分泌物,然后进行细菌检测。
         细菌培养法的操作步骤看似简单,实则较为繁琐。首先直接将采集到的患者阴道分泌物样本接种于琼脂培养基上,然后将其处于恒温箱当中保存48小时,培养完成之后选择生长状态为灰色并且表面光滑的菌落进行进一步的生化鉴定。
         PCR检验的过程当中需要使用到先进的荧光PCR仪。首先应该指导患者采取平卧的姿势,然后将双腿张开,方便医护人员采集阴道分泌物。医护人员应该要使用无菌的棉签在患者阴道后穹窿处缓慢旋转,以蘸取的方式取得阴道分泌物,将采集后的样本均分成两份,在等待检验的过程当中,两份均分的样本都应该使其处于三毫升的无菌盐水环境当中进行保存。进行PCR检验时,选择其中的一份阴道分泌物样本进行离心处理,以每分钟12000转的速度离心,离心15分钟之后去除离心所得的上清液。将碱性裂解液加入在下层沉淀当中进行加热处理,加热条件为60摄氏度的水浴锅当中持续15分钟。待碱性裂解液完全作用使其充分裂解之后,再次进行离心操作。离心处理10分钟左右,选择上层清液作为制造DNA模板的原材料,以PC R扩增作为空白对照,取检测过程当中所需原材料,包括缓冲液、双蒸馏水、引物、模板等等,依次加入对照品。

最后放入荧光PCR仪器当中进行循环处理。
         二、PCR检验方法在细菌检验当中的优势和意义
         女性阴道内的分泌物可以很好的帮助其在患有阴道炎时进行细菌检查。通过分泌物的分析可以直接观察到患者阴道炎症的具体感染程度,还可以同时确定阴道内细菌的大体分布情况。根据目前的临床检验结果来看,细菌检验的准确性是较高的,能够帮助医生判断患者的具体病情。女性阴道内部的细菌环境较为复杂,包括大量的上皮细胞、阴道杆菌、革兰氏阳性球菌等等多种复杂菌群,但若是阴道内由于菌群失调而造成防御功能下降就会无法阻挡外界细菌的侵入,使大量的益生菌死亡,从而影响到细菌内上皮细胞的代谢功能,阴道内的酸碱水平发生紊乱时就会致使患者出现阴道炎症状。所以,帮助阴道炎患者进行细菌检验能够很好的协助其病情治疗。
         过去经常使用到的细菌培养法,虽然对于病原菌的检验能够提供较高的细菌检出率,但整个操作过程非常的复杂且繁琐,而且需要满足一定环境要求的实验室条件,这对于某些医院来说是无法满足的。整个治疗也需要花费大量的时间,这会给病人的病情造成拖延。
         目前广泛应用的PCI检测方法,10则属于分子生物学的检测范畴,其操作过程非常的简单便捷,而且利用高级的先进分析设备也可以取得较高的诊断灵敏度,根据数据来看其检测灵敏度高达90%。在使用荧光PCR检测仪进行检测的整个过程中,由于结合了PCR的高灵敏性以及DNA的杂交特点,所以无需耗费过长的检测时间,并且对于实验室环境的要求相较于细菌培养法大大降低,更适合将此检测方法在基层的医院普及开来。从我们在临床检验过程当中将PCR检验法与细菌培养法的结果对比来看,PCR检验法无论是在检出的阳性率方面还是不同致病菌的检出率方面,均高于细菌培养法。
         但是在临床实际检验过程当中,进行PCR检验法一定要注意采集患者的阴道分泌物时避免采集物被尿液或者是其他的体液干扰,否则很有可能会影响到检验结果的准确性。在整个PCR检验法的操作过程当中,医生的采集水平和检验水平是对于检验结果有较为明显影响的。此后在PCR检验法逐渐普及的过程当中,应该要对于其标本的采集过程严加控制,并确保标本采集后的规范保存和整个检验过程的规范性,这样才能够得出准确的检验结果。
        
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