黄委上游水文水资源局 甘肃兰州 730030
摘要：按照《检验检测机构资质认定能力评价检验检测机构通用要求》（RB/T214-2017）相关要求，黄河上游水环境监测中心通过方法查新确认《水质石油类的测定紫外分光光度法》（HJ 970-2018）代替HJ637-2012，新方法要求在2019年1月1日起实施，同时旧方法废止。通过本次实验室内数据分析，验证新方法能够满足方法检出限、精密度试验、准确度试验、和回收率试验方法性能指标等参数要求。本次方法验证试验对提高试验室分析的准确性有着重要意义。
关键词：水质；石油类；方法验证
一、方法适用范围
本标准规定了测定水中石油类的紫外分光光度法。
本标准适用于地表水、地下水和海水中石油类的测定。
当取样体积为 500 ml，萃取液体积为 25 ml，使用 2 cm 石英比色皿时，方法检出限为0.01 mg/L，测定下限为 0.04 mg/L。
二、方法原理
在 pH≤2 的条件下，样品中的油类物质被正己烷萃取，萃取液经无水硫酸钠脱水，再经硅酸镁吸附除去动植物油类等极性物质后，于 225 nm 波长处测定吸光度，石油类含量与吸光度值符合朗伯-比尔定律。
三、仪器和试剂
3.1 仪器
3.1.1紫外可见分光光度计TU-1810型，已检定。
3.1.2陶瓷纤维马弗炉SX-4-10型，已检定。
3.2 试剂
3.2.1正己烷：国药集团化学试剂有限公司，2.5L/瓶。
3.2.2三硅酸镁：国药集团化学试剂有限公司，100g/瓶。
3.2.3无水硫酸钠：国药集团化学试剂有限公司，100g/瓶。
四、采样要求和样品预处理
4.1 样品的采集
参照GB HJ/T 91、HJ/T 164 的相关规定进行样品的采集。用采样瓶采集 500 ml 样品。样品采集后，加入盐酸（5.1）酸化至 pH≤2。
4.2 样品的保存
参照 GB HJ/T 91 和 HJ 493 的相关规定进行样品保存，如样品不能在 24 h 内测定，应在0℃~4℃冷藏保存，3 d 内测定。
4.3 试样的制备
4.3.1 萃取
将样品全部转移至 1 000 ml 分液漏斗中，量取 25.0 ml 正己烷洗涤采样瓶后，全部转移至分液漏斗中。充分振摇 2 min，期间经常开启旋塞排气，静置分层后，将下层水相全部转移至 1 000 ml 量筒中，测量样品体积并记录。
注 1：乳化程度较重时，可向除去水相后的萃取液中加入 1 滴~4 滴无水乙醇破乳，若效果仍不理想，可将其转移至玻璃离心管中，2 000 r/min 离心 3 min。
注 2：可采用自动萃取装置代替手动萃取。
4.3.2 脱水
将上层萃取液转移至已加入 3 g 无水硫酸钠的锥形瓶中，盖紧
瓶塞，振摇数次，静置。若无水硫酸钠全部结块，需补加无水硫酸钠直至不再结块。
注：也可将萃取液通过已放置约 10 mm 厚度无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水。
4.3.3 吸附
继续向萃取液中加入 3 g 硅酸镁，置于振荡器上，以 180 r/min~220
r/min 的速度振荡 20 min，静置沉淀。在玻璃漏斗底部垫上少量玻璃棉，过滤，待测。
注：也可采用硅酸镁吸附柱进行吸附。将萃取液通过硅酸镁吸附柱，弃去前2 ml~3 ml 滤液，待测。
4.3.4 空白试样的制备
以实验用水代替样品，加入盐酸酸化至 pH≤2，按照试样的制备步骤制备空白试样。
五、分析步骤
5.1 标准曲线的建立
准确移取 0.00 ml、0.25 ml、0.50 ml、1.00 ml、2.00 ml 和 4.00 ml 石油类标准使用液于 6 个 25 ml 容量瓶中，用正己烷稀释至标线，摇匀。标准系列浓度分别为 0.00 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L、4.00 mg/L、8.00 mg/L 和 16.0 mg/L。在波长 225 nm 处，使用 2 cm石英比色皿，以正己烷作参比，测定吸光度。以石油类浓度（mg/L）为横坐标，以相应的吸光度值为纵坐标，建立标准曲线。
5.2 试样的测定
按照标准曲线的建立相同步骤进行试样的测定。
注：当试样吸光度值大于曲线最高点时，用正己烷稀释试样后测定。
5.3 空白试样的测定
按照试样的测定相同步骤进行空白试样的测定。
六、结果计算与表示
6.1 水中石油类的质量浓度ρ（mg/L）按照公式（1）计算：
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式中：ρ——水中石油类的质量浓度，mg/L；
A ——试样的吸光度值；
A0——空白试样的吸光度值；
a ——标准曲线的截距；
V1——萃取液体积，ml；
b ——标准曲线的斜率；
V ——水样体积，ml。
6.2 结果表示
结果保留小数位数与检出限一致，最多保留三位有效数字。
6.3 结果与评价
6.3.1 标准曲线：截距a=0.0031，斜率b=0.0478，相关系数r=1，符合r≧0.999的要求。具体见附表1。
6.3.2 检出限：用试样连续测定10次，获得10次吸光度，在自由度为n-1，置信度为99%时查得t值为2.821。根据公式MDL=t（n-1）×S计算得到仪器检出限为0.001mg/L，小于方法检出限0.01mg/L。
6.3.3 精密度：对样品进行6次平行试验，测得RSD=0.253%，符合RSD在±10%内的要求。具体见附表3。
6.3.4.1准确度：对3种不同浓度的有证标准物质进行测定，测得的结果均在有证标准物质所给的范围内。具体见附表4。
6.3.4.2回收率：以试样测定值为0.01mg，0.01mg的两个样品分别加标量为0.2mg，测得回收率分别为103%，104%达到在90%~110%之间的要求。具体见附表5。
七、验证结论
黄河上游水环境监测中心通过实验室内数据分析，所用仪器为TU-1810紫外可见分光光度计。本实验室所申请的方法《水质 石油类的测定 紫外分光光度法》（HJ 970-2018），能够满足标准方法中方法检出限、精密度试验、准确度试验、和回收率试验等方法性能指标等参数要求。
附表1
作者简介：
赵俊麟（1981-），男，甘肃兰州人，工程师，本科，主要从事水质监测工作。
贾可行（1984-），男，甘肃兰州人，工程师，本科，主要从事水质监测工作。