要：目的 探讨茶多酚(TP)对反式脂肪酸致大鼠肾功能损害保护作用。方法 将四十只SD大鼠（雌雄各半）随机分为5组，用TFA处理大鼠形成肾损伤模型，然后使用茶多酚对大鼠进行保护，实验时长为八周，隔天灌胃一次，最后一次灌胃后，动物禁食12 h，测定各组动物的体重麻醉处死后取肾脏称重，并测量各项指标活性。结论 经TFA染毒组的小鼠实验后脏器系数增加，肾损伤严重，氧化应激指标相应升高或降低，与对照组相比有统计学意义（P＜0.05）。受TP保护的各组相较于TFA组，各项血清指标均有一定程度上的恢复，有统计学意义（P＜0.05）。茶多酚对反式脂肪酸致肾脏损伤具有抗氧化作用，可修复损伤肾脏。
关键词：茶多酚；反式脂肪酸；修复作用；肾损伤
反式脂肪酸( trans fatty acids，TFA) 是一类含有反式非共轭双键的不饱和脂肪酸的总称，日常生活中主要来于氢化油和各种高温加工的食品，摄入过多身体无法消化从而导致体内堆积过多而对肝肾、心血管、生殖、免疫产生毒作用损害。张嘉峻等人研究发现TFA对动脉粥样硬化、老年痴呆症、糖尿病、肥胖等慢性疾病均有影响[1]。由于反式脂肪酸对人体会造成不良影响，各国均对反式脂肪酸有限量标准甚至禁止在餐厅中使用含TFA的食用油[2]。
茶多酚(Tea polyphenols,TP)是茶叶中多酚类物质的总称，占茶叶可溶性干物质总量的20%~40%，研究证实，茶多酚类物质具有很强的抗氧化能力[3]，多种保健功能和生物活性及药理效应，如抗菌、抗癌、抗病毒、保护肝脏、降血脂、降血压、降血糖、防止动脉硬化等活性。目前还没有采用茶多酚修复反式脂肪酸致肾损伤作用的报道，本研究拟以茶多酚作为保护剂，探讨其对TFA致SD大鼠的影响，为阐明TP修复TFA的肾功能损伤提供科学依据。
1材料与方法
1.1实验动物 健康SPF级的实验大鼠40只（雌雄各半），体重在180~220g。由长沙医学院提供，许可证号：SYXK（湘）2017-0003。动物在实验专用饲养房标准条件下饲养。
1.2主要仪器与试剂 主要仪器：全自动分析仪器、电子分析天平、台式低温
离心机、光学显微镜、包埋机、石蜡切片机、加样器。
主要试剂：反式脂肪酸、茶多酚、无水乙醚、无水乙醇、水合氯醛、生理盐水、
伊红、甲醛。
1.3动物分组与处理 40只SD大鼠(雌雄各半)随机分成五组：正常对照组、
TFA染毒组和TFA染毒+低、中、高TP保护组。正常对照组正常喂食不进行灌胃；每天上午定时将染毒对照组和TFA染毒低、中、高剂量TP保护组均灌胃TFA，按50mg/kg.bw进行灌胃。下午对低、中、高组，按25mg/kg.bw、50mg/kg.bw、100mg/kg.bw剂量灌胃TP溶液进行保护，一天一次。实验时间为连续八周。末次染毒后，称取各组大鼠体重，麻醉处死大鼠，取出其肾脏计算其脏器系数，心脏取血，离心取出血清测量BUN、CRE、UA。
1.4 检测指标及方法
1.4.1 脏器系数的测定 麻醉处死大鼠后快速取出肾脏，准确称重，计算其脏器系数。
1.4.2病理形态变化 称重后将肾脏固定于10%的甲醛溶液中，乙醇梯度脱水，
常规石蜡包埋，切片，HE(苏木精-伊红)染色，光镜下观察病理形态学变化。
1.4.3生化指标测定 取出已保存的血清(-80℃)，静置室温。在7170A全自动分析仪的帮助下检测各组大鼠肾功能指标：尿素(UA)、尿素氮（BUN)、肌酐（CRE)。
1.4.4统计学方法 本次实验数据均采用SPSS19.0统计软件分析处理，实验数据以均数标准差（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析进行显著性检验（LSD-t法）。显著性检验水准α取值0.05，以P<0.05为差异间具有统计学意义。
2结果
2.1 茶多酚对反式脂肪酸染毒SD大鼠肾功能的影响
2.1.1茶多酚TFA 染毒大鼠肾脏器系数的影响
如下表所示，低中高剂量TP保护组均随着TP剂量的增加脏器系数呈下降趋势，其中TFA+中、高剂量TP保护组与TFA染毒组相比较，差异具有统计学意义(P<0.05)。
表1 TP对染毒大鼠肾脏器系数的影响(n=8, ±s )
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2.1.2茶多酚对染毒大鼠肾病理形态
正常对照组：肾组织机构正常，肾小管和肾小球结构完整，无明显的性变，无坏死及炎性浸润等病理变化；TFA染毒组：肾小球出现萎缩，小球内细胞增多，部分肾小管上皮细胞坏死脱落形成核聚集，间质中有灶性炎症浸润；TFA+低TP保护组：肾小球出现萎缩或扩张，静脉扩张，出现炎症反应；TFA+中TP保护组：部分肾小球扩张，血管壁增厚，管腔变窄，肾小管出现轻微扩张；TFA+高TP保护组：肾小球内细胞有些增多，肾小球大小逐渐恢复正常。
1-正常对照组 2-TFA染毒组
3-TFA+低TP保护组 4-TFA+中TP保护组
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5-TFA+高TP保护组
图1-5 TP对TFA染毒大鼠肾脏病理形态的影响(200倍，HE染色)
2.1.3 TP对TFA染毒大鼠血清肾功能指标变化的影响
可见表2，低中高TP保护组与的BUN、CRE含量均有下降。与对照组相比，TFA+低、中TP组BUN和UA含量下降，CRE含量升高(P<0.05);经高TP保护后肾脏BUN、UA含量有升高，但仍未恢复至正常水平；经中、高TP保护组CRE含量要低于TFA染毒组，差异具有统计学意义(P<0.05)。
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2.1.4 TP对TFA染毒大鼠肾氧化应激相关指标的影响
可见表3，与对照组相比，TFA+中、高TP组的肾脏SOD、GSH-Px活性下降，NOs活性上升(P<0.05)。经TP保护的组别与染毒组相比SOD、GSH-Px活性均有上升，NOs活性下降，差异显著。
表3 TP对TFA染毒大鼠SOD、GSH-Px 、NOS活性的影响
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注：a与对照组相比，P<0.05；b与TFA组相比，P<0.05
3讨论
肾脏是人体重要的排泄器官，是体内代谢产物和有害物质的主要途径之一，维持体内水平衡，电解质和酸碱平衡。摄入有害物质过多时，在肾小管内易蓄积，从而造成肾损伤。可通过血清尿素氮（BUN）、血清肌酐（CRE）和尿酸(UA)等）等肾脏血清指标对肾脏是否受到毒性损伤进行佐证。血清中BUN、CRE的含量升高时，表明生产过剩或者排泄障碍；血清中UA含量升高时，表示肾脏尿酸排泄机制退化。
据病理切片观察到切片有不同程度上的肾小球扩张或萎缩，肾小管扩张，肾小管形成管型，血管扩张，炎性细胞浸润，形成核聚集。当血清中的BUN、CRE含量上升，UA含量下降时，说明TFA大鼠的肾功能受到了损伤，大量TFA在肾脏中蓄积中毒发生了氧化应急损害。经TP保护后的低中高剂量组，BUN、CRE含量均有下降，UA含量上升，说明TP可改善TFA染毒大鼠的肾功能，有抗氧化作用，可保护肾脏功能。
经研究表明茶多酚对不同自由基的清除能力也不同，还可通过其他一些物质来增强抗氧化作用。通过系列反应会产生氧自由基，而引发脂质过氧化物，引起细胞代谢障碍及功能障碍。生物体内存在抗氧化酶(SOD、GSH-Px)可有效清除各种活性氧及氧自由基。NOs是NO气体自由基的关键酶，NO可清除自由基，又可生成毒性的自由基，故NOS活性异常时，说明NO含量异常改变。TFA大鼠受自由基损伤的程度增加，机体抗氧化能力受到损伤，体内自由基平衡被打破。经TP保护后肝肾抗氧化酶SOD、GSH-Px活性均有升高，NOs活性下降，TP对机体抗氧化能力起到了保护作用，减少了自由基的生成或者清除多余的自由基，降低TFA对机体的氧化损伤。
综上所述，摄入过量反式脂肪酸对肾脏具有损害作用，而茶多酚对反式脂肪酸所造成的损伤有一定修复作用，TP的强抗氧化性和清除自由基能力都有一定保护和修复作用。
参考文献
[1]张嘉峻,单淑晴,许莎莎,等.反式脂肪酸(TFA)与代谢性疾病关系的研究进展[J].2017,31(2):31-34.
[2]王邱.国内外对膳食反式脂肪酸的研究概况[J].2017.38(9):217-221.
[3]杨皓彬,杨娜,柏雪,等.白茶中提取工艺及抗氧化活性的研究[J].2014.14(12):24-31.