摘要:目的 探究茶多酚对慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠的治疗作用及其对COPD小鼠肺部氧化应激调节的作用机制。方法:将30只SD小鼠按随机抽签法平均分为五组:空白组、模型组、低剂量茶多酚组、中剂量茶多酚组、高剂量茶多酚组，采取烟雾诱导法构建COPD小鼠模型。各组建模成功后给予相应药物干预，用XOD法检测SOD活性，用ELISA法检测MDA含量，TNF-α和IL-1β含量。结果:茶多酚能改善COPD小鼠模型氧化水平，超氧化物歧化酶SOD水平增加（P <0.05），脂质过氧化产物丙二醛MDA水平显著降低（P <0.05），茶多酚还能显著降低肺匀浆炎症因子IL-1β浓度，TNFα浓度(P<0.05)。结论 茶多酚可能通过抑制炎症因子的表达，提高抗氧化酶的活性来达到治疗COPD疾病的效果。
关键词：COPD 茶多酚 氧化应激 炎症
慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmoriary disease, COPD）简称慢阻肺，是以进行性气流受限为特征的一组不完全可逆的慢性氧化炎症性疾病，常出现慢性咳嗽，呼吸阻力增加等气流受限的临床表现，进行到后期可诱发慢性呼吸衰竭，自发性气胸或肺源性心脏病，导致患者致残甚至致死。[1]COPD是人类最常见的慢性疾病和多发病之一,严重危害人类健康，降低人们生活质量，发病率和病死率呈现出明显的上升趋势，但该病发病机理和病因尚未清楚，缺乏理想的治疗方案。大量研究表明, 氧化应激是COPD的重要发病机制之一,故靶向抑制氧化应激可能是一种治疗COPD的有效方案，因此，探寻新的药物抑制COPD的氧化应激对缓解及治疗COPD具有关键性意义。[2]茶多酚是一类含多酚羟基的化学物质，是茶叶中的主要活性成分，研究表明茶多酚具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗辐射等诸多作用。[3]其中，茶多酚的抗氧化功能体现在提高抗氧化酶活性、抑制脂质的过氧化反应，清除自由基,抑制氧化酶活性。[4]本研究将通过复制COPD小鼠模型, 探讨茶多酚对肺部氧化应激的作用及其机制。
1材料与方法
1.1 实验动物
30只昆明小鼠，雌雄各半，6~8周龄，体重（25±3)g。
1.2药物试剂与仪器
茶多酚，生理盐水，戊巴比妥钠，甲醛固定液，ELISA试剂盒，离心机等。
1.3动物分组
将30只SD小鼠按照随机抽签法分为5组：空白组，模型组，茶多酚高剂量组(500mg/kg)， 中剂量组(300mg/kg)，低剂量组(100mg/kg)。每组6只，先用生理盐水，普通饲料喂养3天。
1.4模型构建
采用烟雾诱导法构建COPD小鼠模型，将小鼠放入自制的正方形烟熏箱（各个通风孔距离相等）内，将香烟点燃后放入烟熏箱中，保证每只老鼠所吸的烟雾含量相等，在每天上午8点和每天下午5点烟熏，每次放入15只烟，每次熏半小时，连续4周，建立COPD小鼠模型，第五周开始灌药，茶多酚组，按照剂量给药，空白组与模型组则灌胃生理盐水，第8周解剖小鼠，取肺组织检验炎症因子。
指标检测
1.5肺组织匀浆：称取每只小鼠肺组织，加入0.9％冰生理盐水1ml,放入离心机中，转速为3000r／min，时间为10分钟，取上清液－80℃冰箱冻存待测。
1.6EILSA检测
根据ELISA试剂盒说明书，依次包被，加样，加酶标抗体，加底物液显色在ELISA检测仪上，于450nm处，以空白对照孔调零后测各孔OD值。
1.7XOD法检测
按照试剂盒步骤加入试剂，根据公式计算SOD活性。
1.7数据统计分析
使用SPSS19.0软件，统计分析所得数据。以均数±标准差表示实验所得, 多组间比较采用单因素方差分析, 组间差异采用T检验，如果利用软件得出P<0.05，则说明数据有统计学意义。
2 结果
表 1 茶多酚对各组小鼠肺组织氧化应激指标的影响( x± s)
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与空白对照组相比，*P＜0．05；与模型组比较，△P＜0．05
对肺组织匀浆中 MDA、IL-1β, TNF-α含量，SOD活性的影响 与空白组相比,其余各组小鼠肺组织中SOD活性明显降低,MDA, IL-1β, TNF-α,含量增加，差异有统计学意义（P<0.05） 。与模型组相比，茶多酚低、中、高浓度组小鼠肺组织中SOD活性显著增加 ，MDA,IL-1β, TNF-α,含量减少，降低，差异有统计学意义（P<0.05），见表 1。
3 讨论
COPD以气流受限呈进行性发展为特征，病理改变有气道肺泡结构破坏 ，炎性细胞聚集，气道重塑。[5]COPD发病机制尚不明确，有研究提示氧化应激促进其发生发展，外源性氧化物质进入机体后，激活机体中的抗氧化酶，保护机体，到后期由于抗氧化与氧化系统的失衡，引起炎症细胞释放炎症介质，破坏肺部组织的结构，到后期还会导致气道重塑，加重气道阻塞，严重影响肺功能。
茶多酚具有抗氧化与抗炎的作用，可以保护很多器官不受损伤。茶多酚可以阻断NF-κB信号传导通路，从而抑制氧化应激。在其他的文献中，我们发现茶多酚可以降低MDA浓度，IL-1β，TNF-α，提高SOD活性，从而实现抗氧化的作用。[6]当外源性氧化物质进入人体，激活NF-κB通路释放炎性介质如IL-1β，TNF-α，破坏肺组织，参与气道重塑，加快COPD的发生发展[7]，而茶多酚很有可能通过此途径抑制氧化应激，降低氧化物质与炎症因子的浓度，保护肺组织。
本研究从氧化应激方面入手，首先烟雾诱导法建立COPD小鼠模型，采用茶多酚灌胃干预，结果显示，茶多酚能够降低IL-1β，TNF-α，MDA浓度，提高SOD活性，说明茶多酚可以减少炎症因子和氧化物质的产生，并且高剂量组的茶多酚对减少炎症因子与氧化物质的产生的效果优于低中剂量组。此次实验结果显示茶多酚能够修复由于烟雾造成肺组织损伤，改善小鼠病情。但是，茶多酚能否用于临床治疗COPD患者，以及它与其他药联合如沙丁胺醇，糖皮质激素，又会有什么效果，另，需要进一步研究。
参考文献:
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