摘 要: 本文研究了三个不同产地的绿茶对小鼠体液免疫和细胞免疫功能影响。将雄性ICR小鼠随机分为 I、II两个大组,每大组随机分为阴性对照组、安徽绿茶组、福建绿茶组和河南绿茶组。实验组给予21mg/ml的绿茶浸膏,每组10只。灌胃体积20ml/kg,每天灌胃一次,连续30d。分别进行淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应实验、并测定抗体生成细胞及血清溶血素。结果表明,与阴性对照组相比,绿茶对ConA诱导小鼠的体重,脾脏/体重比值,胸腺/体重比值无显著性影响(P>0.05)。与阴性对照组比较,三个产地绿茶组小鼠足跖肿胀度、小鼠溶血空斑数均有显著性差异(P<0.05,P<0.01);福建绿茶组小鼠半数溶血值明显增加,差异具有显著性(P<0.05),安徽绿茶、河南绿茶与阴性对照比较,半数溶血值无明显影响(P>0.05)。三个产地绿茶对小鼠脾淋巴细胞增殖无明显影响,加ConA孔与不加ConA的光密度差值无显著性差异(P>0.05)。说明绿茶具有增强免疫力的作用,不同的产地对其作用基本无。
关键词: 绿茶,体液免疫,细胞免疫;小鼠
绿茶含黄酮类、三萜酸类、绿原酸、鞣酸等成分。具有清热解火,平肝潜阳等作用。作为降压、降脂的常用中成药,具有疗效确切、毒副作用小等优点。 研究表明山绿茶中的冬青素A、乌索酸等三萜类化合物对多种肿瘤细胞株的生长有抑制作用,说明山绿茶除了可用于高压、高脂外,还可以用于癌症、肿瘤的预防和治疗,具有改善机体免疫的作用[1-2]。绿茶对免疫抑制小鼠ConA诱导的脾淋巴细胞转化显著增加,显著增加免疫抑制小鼠绵阳红细胞溶血素抗体水平[3]。本实验从细胞免疫和体液免疫方面,选取中国安徽、福建及河南三个具有代表性的绿茶绿茶作为研究对象,研究对比安徽、福建、河南三个不同产地的绿茶对小鼠免疫的影响作用,也为绿茶对小鼠免疫调节机制研究奠定基础。
1材料与方法
1.1受试物 三份绿茶均购自北京吴裕泰茶业股份有限公司,产地分别为安徽、福建和河南。三份绿茶分别加10倍热水(85℃左右)浸泡30min,过滤,共浸泡2次。低温浓缩成浸膏,每1ml浸膏含21mg绿茶。
1.2试剂与仪器 RPM1640细胞培养液,小牛血清,MTT、刀豆蛋白A( ConA),Hank’s液、绵羊红细胞、补体C豚鼠血清、SA缓冲液、酚蓝染色液、异丙醇等。
二氧化碳培养箱、 酶标仪、721分光光度计、离心机、手持式细胞计数器等
1.3 实验动物 清洁级雄性ICR小鼠160只,体重为18~22 g,由吉林大学实验动物中心提供。
1.4分组及给药方式 将动物分为 I、II两个大组,每大组40只动物。免疫I组进行ConA 诱导的小鼠淋巴细胞转化实验;免疫II组进行迟发型变态反应实验、半数溶血值(HC50)的测定、抗体生成细胞数测定。每大组又随机分为阴性对照组、安徽绿茶组、福建绿茶组和河南绿茶组,每组10只小鼠。实验组给予21mg/ml(相当于原药)的浸膏,灌胃体积为20ml/kg,每天一次,连续给药30d,阴性对照组灌胃同体积的蒸馏水。
1.5实验方法 按《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)相关评价方法,进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应实验、半数溶血值(HC50)和抗体生成细胞数测定。
1.6 数据处理 实验数据采用 SPSS 17.0 统计软件进行分析。采用方差分析组间比较,以平均值±标准差(x±s)表示。
2 结果
2.1受试物对小鼠体重的影响 小鼠初始体重各剂量组与阴性对照组比较,无显著性差异(P>0.05)。经口给予小鼠不同的受试物30,各组小鼠的体重、体重增长值与阴性对照组比较,均无显著性差异(P>0.05)。
2.2受试物对小鼠脏器体重比值的影响 给予小鼠不同产地的受试物30d,各剂量组脏器体重比值与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
表1. 对小鼠脏器/体重比值的影响()
2.3受试物对小鼠细胞免疫功能的影响 表2实验结果可见,三个产地绿茶组小鼠足跖肿胀度与阴性对照组相比,均有显著性差异(P<0.05,P<0.01),其中福建绿茶差异具有极显著性(P<0.01)。与阴性对照组比较,三个产地绿茶对小鼠脾淋巴细胞增殖无明显影响,加ConA孔与不加ConA的光密度差值无显著性差异(P>0.05)。
表2. 对小鼠细胞免疫的影响
注:*与阴性对照组比较,P<0.05,**与阴性对照组比较,P<0.01
2.4受试物对小鼠体液免疫的影响 表3实验结果可见,三个产地绿茶组小鼠溶血空斑数与阴性对照组相比,均有显著性差异(P<0.05)。与阴性对照组比较,福建绿茶半数溶血值明显增加,差异具有显著性(P<0.05),安徽绿茶、河南绿茶与阴性对照比较,半数溶血值无明显影响(P>0.05)。
表3.对小鼠体液免疫细胞的影响()
注:*与阴性对照组比较,P<0.05。
3 讨论
本实验结果显示,与阴性对照组相比,三个产地绿茶对ConA诱导小鼠的体重,脾脏/体重比值,胸腺/体重比值无显著性影响(P>0.05);三个产地绿茶组小鼠足跖肿胀度、小鼠溶血空斑数均有显著性差异(P<0.05,P<0.01);福建绿茶组小鼠半数溶血值明显增加,差异具有显著性(P<0.05),安徽绿茶、河南绿茶与阴性对照比较,半数溶血值无明显影响(P>0.05)。三个产地绿茶对小鼠脾淋巴细胞增殖无明显影响,加ConA孔与不加ConA的光密度差值无显著性差异(P>0.05)。表明绿茶可通过增加细胞免疫和体液免疫来提高小鼠的免疫力。 从实验结果来看,福建绿茶组小鼠迟发型变态反应具有极显著差异(P<0.01),同时半数溶血值明显增加,差异具有显著性(P<0.05),较其他两个产地绿茶,具有更明显的效果。
引用文献
1.李艺,冷静,杨杰,等.山绿茶化学成分及药理作用研究〔J〕.中国野生植物资源,2014,33(6): 33-35,46.
2.黄静怡,金倩,林莉,等.山绿茶的化学成分与药理作用研究新进展.海峡药学 2018年,30(11):46-49
3.林心舜,陈玉春.绿茶对免疫抑制小鼠免疫功能的影响.福建医药杂志.1989年,11(2):29-30转35