徐士达 胡玉红通讯作者 张丹凤 王珊珊
（佳木斯大学附属第一医院；黑龙江佳木斯154000）
摘要：目的：通过研究磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α(PIK3CA)及β(PIK3CB)蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达，及其与宫颈癌相关参数的比较，探讨两种蛋白与宫颈癌的出现、浸润和转移的相关性，为临床治疗提供依据。方法：选取2017年10月至2020年01月期间在佳木斯大学附属第一医院手术切除后留取宫颈鳞癌组织标本60例、宫颈上皮内瘤变组织标本20例、正常宫颈组织标本20例，采用免疫组化SP法分别测定PIK3CA、PIK3CB的表达情况，进行统计学分析。结果：1.PIK3CA、PIK3CB在宫鳞癌组织中阳性率明显高于宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。2.PIK3CA与PIK3CB在宫颈鳞癌组织中表达呈正相关，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1.PIK3CA、PIK3CB的表达与宫颈鳞癌有相关性。2.PIK3CA、PIK3CB在宫颈鳞癌的演变发展中存在协同性，可能参与宫颈鳞癌的发生与发展。
关键字： PIK3CA;PIK3CB;免疫组化
宫颈癌（Cervical cancer）是现今常见的女性恶性肿瘤，其发病率和死亡率始终居高不下，且近些年来发病年龄逐步趋向“年轻化”[1]，近些年国内对于宫颈癌筛查、宫颈癌疫苗、微创技术器械更新提升及辅助治疗方案的不断提出，对其预防、早中期的治疗效果比较可观，但对于晚期及复发型患者五年生存率及生命质量并没有可观进展。在基因分子机制研究进展中可以发现多数肿瘤的产生、发展往往伴随着信号通路的异常表达，进一步研究宫颈癌信号通路中异常基因的表达，能够为其分子靶向治疗提供新思路。
PI3K/AKT信号转导调控通路是人体多种重要信号通路之一，参与细胞激活、葡萄糖转运、蛋白质合成等调控，与人类多种肿瘤演变及进展存在相关性[2]。PI3K的催化亚基PIK3CA（ PI3Kp110α）、PIK3CB （PI3Kp110β）的异常突变可导致通路异常。本课题通过研究PIK3CA、PIK3CB在宫颈鳞癌组织中的表达情况，经过实验进行统计学分析，探讨二者在宫颈鳞癌演变进展中的关系，旨在为宫颈癌的治疗提供新方向。
1.资料和方法
1.1一般资料
选取时间范围为2017年10月-2020年01月在佳木斯大学附属第一医院宫颈癌手术治疗且病理诊断为宫颈鳞癌的患者60例，因宫颈上皮内瘤变行锥切手术治疗患者20例（包括LSIL和HSIL），因子宫肌瘤而行子宫切除术患者20例的标本。标本术前均未行任何辅助治疗，临床病历资料及手术组织蜡块保存完整；FIGO（2018）临床分期IIA期及以下；宫颈癌患者术前未行放化疗；宫肌瘤行全切术患者术前检查宫颈肉眼正常，宫颈癌筛查（TCT、HPV）均阴性。资料年龄范围在28-72岁，所有患者临床病理资料由病理科主任医师确诊，并提供完整。
1.2判定与统计方法
PIK3CA蛋白与PIK3CB蛋白均表达于肿瘤细胞的细胞质中，均成棕黄色颗粒。观察肿瘤细胞免疫组化化学的染色情况，分别对着色细胞数和细胞的着色强度进行计数。阳性判断标准：参照 Shimizu综合记分法并略加修改行半定量分析，高倍镜（×400）下综合着色细胞的染色强度和阳性细胞数量进行半定量分析。染色强度判定标准: 胞质内无着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为 3分; 阳性细胞百分率判定: 阳性细胞百分率 ＜5%为0分，5%～ 25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，＞75 %为4分。两项结果相加0～1分为阴性(－) ，2～3分为阳性(+)，4～5分为中度阳性(++)，6～7分为强阳性(+++) 。统计分析时：记（-）为阴性，（+）至（+++）为阳性。实验数据均采用SPSS23.0软件进行统计学分析，按ɑ=0.05作为检验水准，P<0.05 时差异具有统计学意义。
2.结果
随着正常宫颈、宫颈上皮内瘤变到宫颈鳞癌组织的转变，PIK3CA、PIK3CB阳性表达率随之升高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。
PIK3CA蛋白与PIK3CB蛋白在同一宫颈鳞癌标本中表达情况经统计学分析两者之间的差异具有统计学意义，PIK3CA与PIK3CB表达呈正相关（2=15.708，r=0.512，P<0.05）,见表2。
3.讨论
研究证实PIK3CA是一种原癌基因，其表达的异常与乳腺癌、结直肠癌、肺癌、卵巢癌、食管癌等多种肿瘤的发生、浸润、转移存在关联[3]。研究发现癌症的进展诱因存在PIK3CA所导致的体细胞突变，而在其突变集中在螺旋结构域和催化结构域的占比明显，该基因的扩增在多种恶性肿瘤中存在。PIK3CB的表达与多种肿瘤存在关联性，如前列腺癌、胃癌、子宫内膜癌等[4]，敲除催化亚基PIK3CB可导致细胞增殖调节蛋白E及BCL-2表达的下调。抑制 PIK3CB 的表达可以有效的下调 P-AKT的表达，抑制 PC3细胞及U87MG细胞进一步增生繁殖，并促进肿瘤细胞进一步凋亡，有效阻碍了肿瘤细胞的演变进展。PIK3CB的高表达也存在着潜在的诱导致癌性转化作用。有研究表明PIK3CA及PIK3CB腺瘤癌发生发展呈正相关。PI3KCA、PI3KCB在近期研究发现，二者在食管鳞癌标本中呈现高表达，且在关于食管鳞癌的演变进展中，二者扮演相互协同促进作用。
本研究表明PIK3CA与PIK3CB在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变、宫颈鳞癌组织中表达呈上升趋势，且PIK3CA与PIK3CB在宫颈鳞癌组织中的表达呈正相关性，考虑二者在宫颈鳞癌的演变中存在协同作用，可能参与宫颈癌的发生与发展，进一步研究可为宫颈癌靶向治疗提供方向。
参考文献：
[1]Zhou Ping;Chen Danni;Shi Lizheng.Cervical Cancer Mortality in Younger Women［J］.Journal of general internal medicine,2020.
[2]De Laurentiis A，Pardo OE，Palamidessi A，et al．The catalytic class I( A) PI3K isoforms play divergent roles in breast cancer cell migration［J］．Cell Signal，2011，23( 3) : 529-541．
[3]HURVITZ S A,DALEN F,CAMPONE M,et al.A phase 2 study of everolimus combined with trastuzumab and and taxane therapy[J].Breast Cancer Res Treat,2013,141(3):437-446.
[4]何宜宸,孙浩,焦志敏,周洋,王诚悦,张金虎,陈兵海.前列腺癌相关基因及功能的生物信息学分析.[J].江苏大学学报(医学版).2019.