【摘要】目的：探讨Tumstatin中具有抗血管生成活性的T7肽片段可能的调控靶蛋白，进一步研究T7肽抗肿瘤血管生成的机制。方法：1．建立HepG2肝癌裸鼠移植瘤模型，随机分为对照组，T7肽低剂量(2.2mg/kg/d)组，T7肽高剂量组(4.4mg/kg/d)组，5-FU(20 mg/kg)组，每组10只。连续干预21天,观察T7肽对肿瘤生长的抑制作用。2.采用免疫组织化学法检测各组肿瘤组织COX-2蛋白水平表达。结果：5-FU组，T7肽高、低剂量组与对照组肿瘤重量比较差异有统计学意义（P<0.05）。三个给药组IR分别为63.6%、50.6%、28.6%。T7肽高、低剂量组中COX-2蛋白表达降低（P<0.01）。结论：T7肽可抑制HepG2肝癌组织中COX-2的表达，抑制肝癌的生长，降低肿瘤重量和体积。
【关键词】T7肽；COX-2；血管生成
研究表明，环氧化酶2（cyclooxygenase, COX）是花生四烯酸代谢途径中的关键限速酶。COX-2在大多数细胞中并不存在。但在肿瘤细胞中常常表达[1-2]。前期研究证实，COX-2在肝癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌等多种肿瘤组织中均呈高表达[3-4]。研究提示，COX-2在肝癌的发生和发展中起重要作用。并且，在肝癌中COX-2基因表达明显上调，超过正常肝组织及肝炎组织[5-6]。其致癌机制与降低抗肿瘤免疫反应、诱导肿瘤血管生成、抑制肿瘤细胞的凋亡有关[7]。本研究建立人肝癌细胞HepG2肝癌裸鼠移植瘤模型，探讨肿瘤抑素T7肽抑制肿瘤生长的作用机制。
1方法
1.1细胞培养
HepG2肝癌细胞置于DMEM高糖基础培养液中，并添加10％胎牛血清(FBS)、1％青、链霉素混合液(100U/ml的青霉素、100mg/ml的链霉素)。常氧条件下将细胞于37℃、5％CO2的培养箱内培养。
1.2统计学方法
采用SPSS 17.0软件，所有计量数据均以x±s表示。组间数据比较采用One-way ANOVA两两比较法，P <0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1对肿瘤生长的影响
T7肽高、低剂量组与对照组肿瘤重量比较差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较，三个给药组肿瘤体积缩小（P<0.01），IR分别为63.6%、50.6%、28.6%。
2.2 T7肽对肿瘤组织中COX-2蛋白表达的影响
T7肽高、低剂量组能显著降低肝癌组织中COX-2的表达，抑制肿瘤生长。
3讨论
肿瘤抑素(Tumstatin)在研究肺-肾出血综合征时被发现[8-9]，它对人体正常细胞的损害微乎其微，但对肿瘤细胞具有明显抑制作用。其通过靠位于N端的2l肽和位于C端的19肽发挥双重抗肿瘤效果[10]。本研究利用免疫组织化学法检测肿瘤组织中COX-2的表达，结果表明与对照组比较，T7肽高、低剂量组能显著降低肝癌组织中COX-2的表达，抑制了肿瘤生长。这可能是T7肽抑制肿瘤生长的作用机制。这为临床抗肿瘤药物开发提供了新思路。
【参考文献】
[1] 廖小文，黄碧芬，肖丽华，等．胃癌组织中COX-2、VEGF-C表达及其与淋巴结转移的相关性的Meta分析[J]．中外医学研究，2017，15(26)：8-10
[2] 胡广军，刘建中，时玲玲，等．阻断N0tch信号通路对肝癌细胞迁移 和COX-2蛋白表达的影响[J]．临床和实验医学杂志，2018，17(2)：132-134．
[3]李鸿涛，董朝，罗琳，等．维吾尔族和汉族乳腺癌中环氧合酶-2和血管内皮生长因子-C在mRNA和蛋白水平的表达[J]．中华实验外科杂志，2016，33(4)：891-893．
[4] Sung YK，Hwang SY，Kim JO，et al．The correlation between cyclooxygenase-2 expression and hepatocellular carcinogenesis．Mol Cells．2004，1 7：35-38．
[5] zhong LT，wang H，Iiang HQ，et a1．An elevated pretreatment serum
Globulin level predicts a poor prognosis of nasopharyngeal carcinoma『J]．Nan Fang Yi Ke Da xue xue Bao，2016，36(2)：15l-156．
[6] Hashitani S，Urade M，Nishimura N，et a1．Apoptosis inductionand enhancement of cytotox icity of anticancer drugsby celecoxib，a selective cyclooxy genase-2 inhibitor in humanhead and neck carcinoma cell lines[J]．Int J Oncol，2003，23(3)：665-672．
[7] Cheng AS，Chan HL，Leung WK，et a1．Specific COX-2 inhibitor，NS-398，
Suppresses cellular proliferation andinduces apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells[J]．Int J Oncol，2003，23(1)：113-119．
[8] Maeshima Y，Colorado PC，Torre A，et a1．Distinct antitumor properties of a type IV collagen domain derived from basement membrane[J]．J Biol Chem，2000，275(28)：21340-21348．
[9] Esipov R，Beyrakhova K，Likhvantseva V，et a1．Antiangiogenic and antivascular effects of a recombinant tumstatin-derived peptide in a corneal neovaseularization model[J]．Biochimie，2012，96(6)：1368-1375．
[10] Maeshima Y，Manfredi M，Reimer C，et a1．Identification of the antiangiogenic
site within vascular basement membrane-derived tumstatin[J]．J Biol Chem，2001，276(18)：15240-15248．