摘要: 目的 探讨比较罗布麻叶与罗布麻茶对小鼠的免疫调节作用。方法 将 ICＲ小鼠随机分为对照组和罗布麻叶组、罗布麻茶组(333mg/(kg·BW)，连续灌胃30后，测定胸腺、脾的脏器/体重比值、迟发性变态反应水平、小鼠脾淋巴细胞增殖转化能力、脾脏抗体生成细胞数和血清溶血素水平、碳廓清功能、小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、NK细胞活性。结果 罗布麻叶组、罗布麻茶组可增强 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化能力(P＜0.05)和DNFB诱导的小鼠迟发型变态反应(P＜0.05)，可提高小鼠抗体生成能力(P＜0.05)；罗布麻茶组可明显增强小鼠血清半数溶血值(P＜0.05)。结论 罗布麻叶、罗布麻茶对小鼠的免疫功能均具有增强作用，基本不存在差异。
关键词: 罗布麻叶；罗布麻茶；免疫；小鼠
罗布麻叶为夹竹桃科植物罗布麻venetum L.的干燥叶。罗布麻茶为罗布麻叶，除去杂质，杀青、揉捻、炒干装袋制成。罗布麻中主要含黄酮类、有机酸类、鞣质、脂肪酸醇酯、醇类、甾体类、糖类、烷类、氨基酸类和矿物质元素以及其他化学成分[1-2]。罗布麻叶性甘、苦、凉，平肝安神，清热利水。用于肝阳眩晕，心悸失眠，浮肿尿少；对高血压病，神经衰弱，肾炎浮肿有一定功效[3]。文献表明，罗布麻作为纯天然植物，具有降压、降脂、利尿、抗氧化、抗抑郁、保护心血管、保护肾脏和保肝等作用。近年来，随着人们对具有保健功能的天然药品和食品的研究不断增多，罗布麻的增强免疫力保健作用也越来越受到人们的关注[4-5]，因此本实验对罗布麻叶和罗布麻茶对小鼠免疫力的影响进行对比研究。
1材料
1.1 受试物 罗布麻叶：购自北京同仁堂大药房；罗布麻茶：新由疆绿康罗布麻公司提供。均按照1:10的比例，用80℃热水浸泡，并超声30 min，如此浸泡2次，将2次浸泡液浓缩16.7mg/ml灌胃给小鼠，灌胃体积为2mL/100g。
1.2 实验动物SPF级ICR雄性小鼠，体重（20±2）g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，生产许可证号SCXK（京）2016-0011。
1.3实验仪器 二氧化碳培养箱（日本Sanyo）、ME203E型电子分析天平（美国Mettler Toledo）、显微镜（日本olympus）、台式离心机（北京三洋）、分光光度计（南京菲勒）、酶标仪（美国Molecular Devices）、、细胞计数板、24孔和96孔细胞培养板、96孔U型细胞培养板等。
1.4实验分组与剂量 本研究共分为四组，每组共40只健康雄性小鼠，再分为4个小组，每小组10只。一组进行迟发型变态反应、脏器/体重比值测定、半数溶血值（HC50）的测定和抗体生成细胞检测；二组进行碳廓清实验；三组进行巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验；四组进行实验ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定。成人推荐罗布麻叶、罗布麻茶摄入量均为2g/60kg·BW，以日摄入量的10倍设置灌胃剂量，以16.7mg/ml（相当于中药材）的浓缩液作为受试物。以去离子水灌胃阴性对照组，各组小鼠灌胃量为2ml/100g，每日一次，连续灌胃30天后，检测各组免疫指标。
2 方法
2.1实验方法 参考《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）中增强免疫力功能检验方法，分别进行迟发型变态反应（DTH）、ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化、抗体生成细胞检测实验、血清溶血素测定实验、小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、NK细胞活性测定等项实验，并依照该检验方法的判定标准，判定实验结果
2.2数据统计 采用SigmaStat3.5统计软件处理数据，实验结果以均数±标准差（）表示。多组比较采用单因素方差分析，方差齐时，各组间两两比较用LSD法；方差不齐时，各组间两两比较采用Tamhane法。P＜0.05 表示差异有统计学意义。
3结果
3.1 对小鼠体重的影响 灌胃给予罗布麻叶、罗布麻茶30天，四组实验小鼠体重与阴性对照组比较，无显著性差异（P＞0.05）。
3.2 对小鼠脏器/体重比值的影响 小鼠灌胃给予罗布麻叶、罗布麻茶30天，各组胸腺/体重比值和脾脏/体重比值与阴性对照组比较，无显著性差异（表1，P＞0.05）。
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3.3 对小鼠细胞免疫功能的影响
灌胃给予罗布麻叶、罗布麻茶30天，罗布麻叶组、罗布麻茶组小鼠足趾肿胀度与阴性对照组比较，差异有显著性（表2，P＜0.05）；罗布麻叶组、罗布麻茶组淋巴细胞的增殖能力与阴性对照组比较，差异有显著性（表2，P＜0.05）
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3.4 对小鼠体液免疫功能的影响
灌胃给予罗布麻叶、罗布麻茶30天，罗布麻叶组、罗布麻茶组小鼠抗体生成细胞数与阴性对照组比较，差异有显著性（表3，P＜0.05）；罗布麻茶组小鼠半数溶血值与阴性对照组比较，差异有显著性（表3，P＜0.05）；罗布麻叶组小鼠半数溶血值与阴性对照组比较，无显著性差异（表3，P＞0.05）
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3.5对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
灌胃给予罗布麻叶、罗布麻茶30天，各组碳廓清吞噬指数、巨噬细胞吞噬鸡红吞噬率与阴性对照组比较，均无显著性差异（表4，P＞0.05）；
3.6 对小鼠NK细胞活性的影响
灌胃给予小鼠罗布麻叶、罗布麻茶30天，罗布麻叶组、罗布麻茶组小鼠NK细胞活性与阴性对照组比较，差异均为显著性（表5，P＞0.05）。
4 讨论
本实验使用以小鼠为研究对象，对比了罗布麻叶和罗布麻茶对免疫影响作用。实验结果显示，罗布麻叶组、罗布麻茶组可增强 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化能力(P＜0.05)和DNFB诱导的小鼠迟发型变态反应(P＜0.05)，可提高小鼠抗体生成能力(P＜0.05)；罗布麻茶可明显增强小鼠血清半数溶血值(P＜0.05)。表明罗布麻叶和罗布麻茶对小鼠均有增强免疫力的作用，基本不存在差异。
引用文献
1.曾海松.罗布麻叶化学学成分研究[M].西安:西北大学:中药学,2009
2.刘美兰.罗布麻有效成分的研究[J].中药通报1987,12(7):58
3.国家药典委员会.中华人民共和国药典(2015年版一部) [M].北京:人民卫生出版社.
4.马永兴，竺越，仇志军，等.罗布麻叶浸膏片对中老年人NK细胞活性和红细胞SOD含量及微循环作用的初步观察.老年学杂志.1990年第4期：215-217
5.陈秀锦，陈润，陈爱华，等.富硒罗布麻茶对小鼠免疫调节作用的研究.海峡药学.2016年,28（12）：22-23