王 丹1，王 斌2
（. 成都医学院 第一附属医院；四川 成都 610500）
（南充中心医院 输血科；四川南充 637900）
摘要:目的 探讨不同消毒剂对肺炎克雷伯菌的杀灭效果，为临床合理使用消毒剂提供依据。方法 收集8株泛耐药和8株全敏感肺炎克雷伯菌，采用最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）试验对16株菌进行杀菌效果检测。结果 全敏感和泛耐药肺炎克雷伯菌对碘伏和84消毒液均产生抗性，对消毒酒精未产生抗性。结论 在选择消毒剂时，应首选未产生抗性的消毒酒精，如选择碘伏和84消毒液应加大使用浓度，以提高消毒剂的杀菌效果。
关键词：肺炎克雷伯菌；消毒剂；泛耐药菌；抗性
前言
近年来，肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）已成为医院获得性感染最常见的病原菌之一[1]，在各类消毒剂或抗菌药物作用条件下形成生物被膜，导致消毒或治疗失败，易引起医院感染的暴发[2]。通过对不同耐药程度肺炎克雷伯菌杀灭效果的研究，评估对常用消毒剂抗性的情况，为指导临床合理使用消毒剂、控制院内感染提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株来源
收集成都医学院第一附属医院临床科室分离的肺炎克雷伯菌16株，其中8株敏感菌编号为（F1、F2……F8），8株泛耐药菌编号为（F9、F10……F16）。质控菌株为肺炎克雷伯菌（ATCC700603）。
1.1.2主要试剂与设备
84消毒液、碘伏和消毒酒精，均购自四川蓉康世圣药业有限责任公司。肉汤培养基购自温州康泰生物科技有限公司。比浊仪购自法国生物-梅里埃有限公司。电热恒温培养箱购自中国上海申贤恒温设备厂。
1.2方法
1.2.1 最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度(MBC）的测定
取37℃培养24h的肺炎克雷伯菌菌落制成0.5MCF菌悬液。用肉汤培养基将消毒剂倍比稀释成不同梯度的受试液，在每管受试液内加入0.02ml菌悬液，混匀，37℃培养24h，观察受试液无细菌生长的最低稀释度，即MIC值。所有实验均重复3次，设消毒剂阴性对照。
最小杀菌浓度MBC测定，是将MIC管受试液取出0.1ml接种至营养琼脂上，37℃培养24h，观察有无细菌生长，以平板计数少于5个菌落的受试液为MBC值。
2 结果
2.1 最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）结果
泛耐药菌与全敏感菌对碘伏与84消毒液的MIC多数大于标准菌株MIC，对消毒酒精的MIC基本等于标准菌株MIC；对消毒酒精和碘伏MBC与标准菌株相同，对84消毒剂MBC值均较标准菌株高，见表2-1。
表2-1 不同消毒剂对肺炎克雷伯菌的MIC和MBC（mg/L）
3 讨论
细菌对消毒剂的MIC超过标准菌株MIC时，即认为该菌对消毒剂产生了抗性[3]。本研究证实泛耐药与全敏感肺炎克雷伯菌对碘伏与84消毒液敏感性降低，产生了抗性，而对酒精未产生抗性。
8株全敏感菌对碘伏产生抗性，泛耐药菌中2株对碘伏未产生抗性，而对84消毒液的MIC和MBC均大于标准菌株，说明该菌对抗菌药物耐药性高并非会对消毒剂抗性增高，可能与细菌对消毒剂和抗菌药物抗性机制不同有关 [4]。消毒剂对细菌有多个作用位点，从细胞膜到呼吸作用相关酶，及细胞内遗传物质[5]，低浓度消毒剂只会抑制微生物的生长，高浓度消毒剂才会杀灭微生物[6]。然而临床科室消毒剂使用方法不当或作用时间、浓度不足，不能有效杀灭微生物，使细菌长期处于亚致死量消毒剂浓度中，逐渐对消毒剂产生抗性[7]。
因此，临床科室应规范使用消毒剂，选择适当的消毒浓度，定期对临床常见耐药菌进行消毒剂抗性检测，指导临床合理选用消毒剂[8]，避免医院感染的发生。
参考文献
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