摘要 目的：提高散痰宁糖浆的质量标准。方法：采用高效液相色谱法把散痰宁糖浆中的桔梗药材含有的桔梗皂苷D作为含量测定；采用薄层色谱法对该样品中的远志（制）进行定性检查。结果：供试品薄层色谱中，在与细叶远志皂苷 对照品相应位置上，在日光下显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰；桔梗皂苷D在0.255ug-2.552ug范围内线性关系较好，r2=0.9997;平均回收率99.1%RSD=1.5%。结论：该方法可靠并且有效，可以较好的控制散痰宁糖浆的质量。
关键词：散痰宁糖浆 薄层色谱，桔梗皂苷
散痰宁糖浆具有清肺，止咳，平喘的功效。用于支气管炎，咳嗽痰多。由桔梗、远志（制）、桑白皮、氯化铵、盐酸麻黄碱、薄荷脑组成。散痰宁糖浆现行的执行标准是《卫生部药品标准中药成方制剂第七册WS3-1439-93》。标准中散痰宁糖浆只有基本的性状、相对密度检查，无法准确、可靠的控制其质量。现对其质量标准进行研究修订，因处方中桔梗作为君药,是针对病症起到关键治疗效果的的一味药.其中桔梗药材含有的桔梗皂苷D,现代研究表明,其有明显的镇咳作用,且在药材中的含量较高,易分离,性质较稳定,所以将它增加为本产品的含量测定[1]-[3]。处方中制远志作为臣药,能辅助桔梗发挥更好的药效,因药材中含有的细叶远志皂苷含量较高,比较容易分离,所以将细叶远志皂苷作为本产品的定性检查，提高产品的质量标准，更好的把控产品的质量。
1仪器与试药
高效液相色谱仪
三氯甲烷（分析纯，广东光华科技股份有限公司）、甲醇（分析纯，广东光华科技股份有限公司）、乙腈（色谱纯）、桔梗皂苷D对照品（中国食品药品检定研究所，批号:111851-201708）、细叶远志皂苷（中国食品药品检定研究所，批号：111849-201705）、硅胶G板（青岛海洋化工有限公司，批号:20181101）。散痰宁糖浆（规格：每瓶100ml，广西康晟制药有限责任公司）。
2薄层色谱鉴别[3]-[9]
2.1供试品溶液的制备 取供试品溶液10ml，蒸干，残渣加10%的氢氧化钠溶液70ml，水浴回流1个小时，放冷，用盐酸调节PH至4～5，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水50ml洗涤，弃去水液，正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。
2.2对照品溶液的制备 取细叶远志皂苷对照品，加甲醇溶解配制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。
2.3阴性对照溶液的制备 按照处方称取相应的药材和原料，把处方中的制远志去掉，按散痰宁糖浆的工艺规程，同步处理和提取，制备阴性药液。按照2.1供试品溶液的制备的方法，制备得阴性对照溶液。
2.4薄层色谱法 吸取供试品溶液2ul，对照品溶液4ul，阴性对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（6:3:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，而阴性对照溶液无相应的斑点。表明阴性对照无干扰，见图1。
.png)
图1 细叶远志皂苷薄层色谱图
1：供试品 2：细叶远志皂苷对照品
3：阴性对照
3含量测定[4],[10]-[12]
3.1供试品溶液制备 取供试品溶液50ml，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次30ml，弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，弃去水液，正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，加硅胶0.5g拌匀，置水浴上蒸干，加于硅胶柱[100～120目]，10g，内径为2cm，用三氯甲烷-甲醇（9：1）混合溶液湿法装柱]上，以三氯甲烷-甲醇（9：1）混合溶液50ml洗脱，弃去洗脱液，再用三氯甲烷-甲醇-水（60：20：3）混合溶液100ml洗脱，弃去洗脱液，继用三氯甲烷-甲醇-水（60：29：6）混合溶液100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。
3.2对照品溶液的制备 取桔梗皂苷D对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
3.3阴性对照溶液的制备 按照处方称取相应的药材和原料，把处方中的制远志去掉，按散痰宁糖浆的工艺规程，同步处理和提取，制得相应的阴性药液。按照3.1供试品溶液的制备的方法，制备得阴性对照溶液。
3.4色谱条件 流动相：乙腈-水（25：75）为流动相；检测器：蒸发光散射检测器；流速：每分钟1ml；色谱柱：InertSustain C18(250mm×4.6mm,5um)。分别精密吸取对照品溶液10μl，供试品溶液10μl，阴性对照溶液10ul，注入液相色谱仪，测定，绘制图谱，见图2.
A
.png)
B
C
图2高效液相色谱图
A．桔梗皂苷D对照品溶液 B.供试品溶液 C.阴性对照溶液
3.5线性关系考察 取桔梗皂苷D对照品适量，精密称定，置100ml容量瓶中，加甲醇稀释配制成0.1276mg/ml的对照品溶液.分别精密吸取2、3、4、8、15、20ul注入液相色谱仪，按3.4项下的条件进行测定，记录桔梗皂苷D的峰面积，以进样量为横坐标X，峰面积为纵坐标Y，绘制标准曲线，计算得回归方程为：y=154.09x-339.02,r2=0.9997。结果表明桔梗皂苷D在0.255ug-2.552ug之间线性关系良好。
3.6稳定性试验 取相同批号的散痰宁糖浆，按3.1项下，配制成供试品溶液，分别在配制完成后的0、1、2、4、6、12小时注入液相色谱仪，记录桔梗皂苷D的峰面积，经过计算，6个进样时间的RSD为1.8%，表明样品在12个小时内峰面积稳定。
3.7精密度试验 取浓度相同的同一份对照品溶液，进样量10ul，重复进样6次，记录桔梗皂苷D峰面积，经计算，6次桔梗皂苷D峰面积RSD为0.8%，结果表明仪器的精密度良好。
3.8重复性试验 取相同批号的散痰宁糖浆，按3.1项下，制备6份供试品溶液。按3.4项下的色谱条件，把样品注入液相色谱仪中，记录桔梗皂苷D峰面积，经计算，6个样品的桔梗皂苷D峰面积RSD为1.2%，结果表明方法重复性良好。
3.9加样回收率试验 精密量取已知含量的散痰宁糖浆50ml，共6份，分别精密加入浓度为0.1276mg/ml的桔梗皂苷D对照品溶液20ml，摇匀，按3.1项下处理，制备得相应的供试品溶液，按3.4项下的色谱条件，注入液相色谱仪，进样量10ul，记录相应的桔梗皂苷D峰面积。经计算得桔梗皂苷D的平均回收率为97.6%，RSD为1.3%，表明方法的回收率良好。
4讨论
远志总皂苷在碱液中水解,转化为细叶远志皂苷[8]-[9],在实验摸索过程中发现,碱液的碱性不够或者回流时间不够的,薄层色谱的斑点清晰度不是很理想.所以制备样品时要注意碱液的浓度,加热时的温度和时间,确保远志总皂苷能够充分的转化为细叶远志皂苷，确保薄层色谱法结果的准确性。
在桔梗皂苷D提取过程中,在装柱洗脱时,洗脱液三氯甲烷-甲醇-水
的比例要控制准确,否则会影响结果的准确性.
本文建立了散痰宁糖浆中桔梗皂苷D的含量测定及细叶远志皂苷的定性鉴别,方法重复性良好,准确可靠,可以更好的把控产品质量。
参考文献
[1]宋杨,齐云. 桔梗的药理研究进展.中国药房.2006,(2):140-142.
[2]郭丽，张村，李丽，肖永庆. 中药桔梗的研究进展.中国中药杂志,2007,03(2):181-186.
[3]付文卫，窦德强，裴月湖. 桔梗的化学成分和生物活性研究进展. 沈阳药科大学学报,2006,03(3):184-188.
[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典一部,2015:156,277
[5]董晓兵,李军,姜 勇,董婷霞,屠鹏飞,詹华强. 测定天王补心丸和归脾丸中细叶远志皂苷的含量.中国中药杂志,2007(8):1647-1649.
[6]陈松,农璐蔚. 高效液相色谱法测定桔远止咳片中细叶远志皂苷含量. 亚太传统医药,2016:30-31
[7]李养学,曾文雪,陈秋谷,林晓燕,毕晓黎,李素梅,胥爱丽. 远民口服液质量标准研究.江西中医药,2016(12):60-63
[8]岳正,刚谢培,刘红波,蔡兴航,唐志书. 细叶远志皂苷碱水解制备工艺研究.临床医学研究与实践,2018:5-6
[9]董晓兵,李军,郑颖,董婷霞,詹华强. 远志皂苷对照品细叶远志皂苷的制备.中药新药与临床药理,2007:53-54
[10]杨超,邓晓鸿,周娟. 复方桔梗止咳片的质量标准研究.中国药房,2009:3074-3078.
[11]李喜凤,杜云锋,谢新年,刘素梅,郝哲. 不同产地桔梗药材HPLC指纹图谱及桔梗皂苷D含量测定研究.中成药,2010,04(4):529-532.
[12]许传蓬,郑毅男,杨腊虎,刘墨祥,徐保军. HPLC法测定不同采收期及不同部位桔梗中桔梗皂苷D含量. 吉林农业大学学报,2001 ,23(1):58- 60,64