王伟宏
（黑龙江省大庆市疾病预防控制中心微生物实验室；黑龙江大庆163311）
【摘要】目的：研讨流感病毒检测中细胞培养法与实时荧光定量PCR法效果比较。方法：选取2018-1至2020-1某医院518份流感季节符合流感病例定义的流感标本，采用数字随机表将其分为2个小组。对照组：应用细胞培养法：实验组：应用实时荧光定量PCR法。结果：实验组A/B型阳性率50.97%，B型阳性率3.86%，A型H3亚型阳性率17.76%，A型H1亚型阳性率34.75%高于对照组A/B型阳性率23.94%，B型阳性率1.16%，A型H3亚型阳性率6.18%，A型H1亚型阳性率12.74%，互比，存在差异性，（P＜0.05）。结论：实时荧光定量PCR法与细胞培养流感病毒检测有一定价值，前者检测方法优势性更强，若有需要，还可将以上方法联合应用，更可提高检测价值。
【关键词】细胞培养法；流感病毒；检测；实时荧光定量PCR法;效果比较;
流感病毒易诱发机体出现呼吸道感染等疾病，流感病毒不断演变，易增加流行性感冒，这对人们群众的机体健康非常不利。近年来，医学研究者加强对流感病毒的研究，进一步分析与观察流感病毒流行株构成、抗原性以及基因特异性等，从而做好相关预防流感措施，确保我国人们群众身心健康[1]。因此，本文针对流感病毒应用细胞培养法与实时荧光定量PCR法实施检测，观察检测效果。
1资料与方法
1.1 一般资料
选取2018-1至2020-1我某医院518份流感季节符合流感病例定义的流感标本，采用数字随机表将其分为2个小组。对照组259例：女性119份，男140份，平均年龄（29.83±1.48）岁；实验组259例：女性122份，男137份，平均年龄（29.90±1.49）岁；两组在资料方面互比，差距小，（P＞0.05）。将所有标本放置在-70°C环境中存放，在24h检测完毕。
1.2方法
核酸提取：根据全自动核酸提取仪相关说明书与配套试剂进行相关操作。
对照组：应用细胞培养法：以《流行性感冒诊断方案》对流感病毒进行分离、鉴定操作。将双抗10000U/ml放置于标本中，观察细胞病理变化，根据红细胞凝集试验对病毒培养液实施操作，针对红细胞凝集试验滴度比例为1:16，通过红细胞凝集抑制试验对亚型标准血清实施检查以及鉴定。
实验组：应用实时荧光定量PCR法；选择甲型/乙型流感病毒核算RNA检测试剂盒，反应体系的配套情况根据试剂盒说明书进行相关操作；反应条件：在50°C下进行30min，再在95°C环境中操作5min，在55°C下进行40s，根据这个操作进行45个循环，从而在55°C的环境中实施荧光检测。
1.3观察指标
记录不同检测方法对A/B型、A型H1亚型、A型H3亚型以及B型阳性率。
1.4统计学方法
采用SPSS24.0统计软件进行数据分析，计量资料以 ±s 表示，组间比较采用 t 检验计数资料以率表示，采用X2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
实验组A/B型阳性率50.97%，B型阳性率3.86%，A型H3亚型阳性率17.76%，A型H1亚型阳性率34.75%高于对照组A/B型阳性率23.94%，B型阳性率1.16%，A型H3亚型阳性率6.18%，A型H1亚型阳性率12.74%，互比，存在差异性，（P＜0.05）。具体见表1
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3 讨论
流感病毒的检测主要方法为细胞培养法与实时荧光定量PCR法，其中细胞培养法为检测金标准，虽有一定应用价值，但其无法达到快速检测效果，耗费时间较长[2]。实时荧光定量PCR法是近年来新研发的检测方案，具有操作快速、精确优势性，而且可行性强，检测灵敏度高，无论标本高低均可进行检测[3]。
通过本次研究结果中的“表1”可发现实时荧光定量PCR法检测优势性更强，细胞培养法对标本的要求较高，比如采集时间、标本的运输、标本活病毒含量以及标本存放环境等。而实时荧光定量PCR法无论标本是病毒还是病毒降解物，均可检查出病毒的RNA，这也是实时荧光定量PCR法所得阳性率高于细胞培养法的原因之一。若在实际检验期间，针对存在疑虑或者有难度的标本，可将实时荧光定量PCR法与细胞培养法联合应用，进一步确保检测结果准确度。有相关研究称：实时荧光定量PCR法的检测灵感度高度90%-92%，特异性高达83%-85%，这充分肯定了实时荧光定量PCR法的检测价值与优势性[4]。也有研究表明：细胞培养法可检测出病毒毒株，利于对基因抗原性、特性以及耐药性进行进一步分析与研究[5]。
综上所述：实时荧光定量PCR法与细胞培养流感病毒检测有一定价值，前者检测方法优势性更强，若有需要，还可将以上方法联合应用，更可提高检测价值。
参考文献
[1]高静,阎建侠,刘博雅,李正,罗天侠,纪颖.肺炎支原体检测试剂盒快速培养法与LAMP法用于肺炎支原体检测研究[J].中国医疗器械信息,2019,25(20):3-5.
[2]修敏,任妍妍.实时荧光定量PCR与细胞培养法在流感病毒检测中的比较[J].传染病信息,2019,32(04):336-337+340.
[3]荣志坚.探讨胶体金法与实时荧光定量PCR法在临床小儿巨细胞病毒(HCMV)感染中的诊断效果[J].国际感染病学(电子版),2019,8(02):185.
[4]李芬.实时荧光定量PCR法与常规细菌鉴定法检测肠道致病菌的对比研究[J].现代诊断与治疗,2018,29(11):1808-1809.
[5]刘送超,王路阳,杜惠清.化学发光法和实时荧光定量PCR法检验EB病毒的临床效果对比[J].临床医药文献电子杂志,2018,5(89):161.