摘要：关于果糖二磷酸钠的试验方法，《国家药品标准》[1]和前人都有已有记载。经过多次实验发现果糖二磷酸钠的有关物质实验项目中，果糖二磷酸钠中的6-磷酸葡萄糖容易受到其他条件的干扰而影响它的斑点显色效果。本文主要研究果糖二磷酸有关物质项目中6-磷酸葡萄糖对不同显色剂的斑点显色效果的对比研究。
关键词：6-磷酸葡萄糖 ； 显色剂 ；有关物质。
1.实验部分
1.1实验仪器和材料
1.1.1固定相：
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1.1.2展开剂：正丁醇-冰醋酸-水-丙酮-10%氨溶液（35:20:22.5:15:7.5）.
1.1.3显色剂：a.间苯二酚乙醇盐酸溶液（取间苯二酚0.5g，加80%乙醇溶液100ml使其溶解，再加盐酸5ml），在105℃加热5分钟显色。
b.盐酸间苯二胺乙醇溶液（取盐酸间苯二胺3.6g加70%乙醇溶液100ml使溶解），在105℃加热15分钟显色。
1.1.4分析天平：EX125DZH十万分之一 编号：J0616
1.1.5点样量：5ul
1.1.6点样器：5ul微量点样器
1.1.7供试品和对照品
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1.2实验过程
1.2.1供试品溶液和杂质对照品溶液的制备：
供试品溶液：精密称取本品，置容量瓶加水制成每1ml中含有0.1g（按无水物计）的溶液。
杂质对照品溶液：分别精密称取6-磷酸果糖、果糖、6-磷酸葡萄糖适量，分别置容量瓶中，分别加水溶解并稀释成每1ml中含0.5mg的溶液，作为对照①、对照②、对照③；另取6-磷酸果糖、果糖、6-磷酸葡萄糖及本品适量，置同一量瓶中，加水溶解制成每1ml中含6-磷酸果糖0.25mg、果糖0.25mg、6-磷酸葡萄糖0.25mg与本品2mg的混合对照溶液④。
1.2.2实验结果
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图三 图四
结果分析：1-对照液①、2-对照液②、3-对照液③、4-供试品溶液、5-混合对照④。
图一：法国默克薄层板，显色剂是间苯二酚乙醇盐酸溶液；
图二：法国默克薄层板，显色剂是盐酸间苯二胺乙醇溶液；
图三：青岛海洋化工薄层板，显色剂是间苯二酚乙醇盐酸溶液；
图四：青岛海洋化工薄层板，显色剂是盐酸间苯二胺乙醇溶液。
经过多次实验结果对比，发现用间苯二酚乙醇盐酸溶液显色剂,在105℃加热5分钟后，果糖二磷酸钠中的杂质6-磷酸葡萄糖的斑点不易显色或是显色不清晰（图一和图三），而且其他的点有轻微拖尾的现象，延长加热时间，薄层板会变黑，导致斑点无法看清；而用盐酸间苯二胺溶液显色剂在105℃加热15分钟后，6-磷酸葡萄糖的斑点能清晰的显现出来（图二和图四）。
2.讨论
综上所述，显色剂对于6-磷酸葡萄糖的斑点有一定的影响，喷显色剂应均匀，喷雾不均匀会产生水珠，背景不一会干扰观察[2]。6-磷酸葡萄糖对使用盐酸间苯二胺乙醇溶液显色剂的斑点显色效果比使用间苯二酚乙醇盐酸溶液显色剂时的斑点显色效果较理想。间苯二胺乙醇溶液显色剂不仅对6-磷酸葡萄糖的薄层斑点比间苯二酚盐酸溶液的显色效果好，对6-磷酸果糖灵敏度也较间苯二酚乙醇盐酸溶液[3]的效果好。我们可以大胆推测间苯二胺乙醇溶液对于果糖二磷酸钠有关物质中的薄层显色效果比间苯二酚乙醇盐酸溶液的显色效果要好，这还将需要实验加以论证，所以对于果糖二磷酸钠有关物质的实验研究优化还将有改进的空间。
参考文献
[1]《国家药品标准》，WS1-（X-062）-2001Z-2011.
[2]李平潮等.果糖二磷酸钠中6-磷酸果糖及果糖近检测方法的研究，药物分析杂志，1998,18（5）：318-320.
[3]李琴，张士勇.果糖二磷酸钠片的有关物质研究，《中医药临床杂志》，2006,18(4):406-407.