摘要：
急性软组织损伤是临床中最为常见的疾病之一，以基础动物实验来观察急性软组织损伤指标变化，是了解疾病发展过程的主要方式，本文对急性软组织损伤动物造模后观察指标进行了整理综述，为临床急性软组织损伤诊断提供有力依据。
1 软组织学观察指标
1、1 软组织损伤证候指数
肉眼观察指标评分是目前文献使用较多的标准?：主要从皮下瘀血（多量块状2分，少量点状1分，无瘀血0分）；肌肉颜色（紫黯色深2分，黯红色浅1分，色泽正常0分）；肌肉肿胀（明显肿胀2分，稍有肿胀1分，无肿胀者0分），活动障碍（明显跛行2分，稍有跛行1分，无跛行者1分）这四个方面进行评分。由于此评分是肉眼进行观察，为保证测量数据的客观准确性，实验时要用同一个人来进行肉眼评分，尽量把实验数据误差降到最低。
1、2 组织病理学检查
先取已造模大鼠局部损伤的软组织，经浸泡固定、脱水、包埋，染色处理后，最终在光镜下进行观察。光镜下观察主要内容有损伤组织内细胞排序有序程度，有无变性、坏死；间质内有无充血、水肿；有无炎细胞浸润；有无成纤维细胞增生等病变[1]。雷蕾等[2]观察中药凝胶对大鼠急性软组织损伤的治疗效果。先取用中药凝胶治疗后大鼠受损部位组织，并在光镜下进行观察，结果表明治疗后损伤组织内肌细胞恢复正常，无充血，间质无炎细胞浸润，无成纤维细胞增生。证明中药凝胶对急性软组织损伤有显著的治疗作用，同时也证明组织病理学检查能够在一定程度上反应损伤组织的愈合情况。
2 血液流学变化
急性软组织损伤后，会致使机体血液处于高浓、粘、聚、凝状态[3]。使得机体循环发生障碍，不利于软组织损伤恢复。张根印等[4]观察大鼠急性软组织损伤后血液流变学的变化情况。通过实验数据对比分析得出，用外用膏治疗后能够明显降低损伤组织中血球压积、纤维蛋白原、血浆粘度比、全血粘度比、血小板粘附率等指标，从而改善血液的高浓、粘、聚、凝状态，最终目的促进损伤组织的愈合。王刚等[5]通过钝性砸伤法对大鼠急性软组织损伤造模，再利用激光多普勒血流灌注成像仪，观察正常组与造模组局部损伤组织微循环血流灌注（PU值）。结果显示造模组PU值比正常组数值明显降低，证明急性软组织损伤后，血液黏度增大并会降低其局部组织的微循环血流速度，从而影响局部损伤组织的愈合。
3高频彩色多普勒超声
高频彩色多普勒超声因其具有良好的组织分辨率、能灵活显示病变部位、大小、内部回声、范围、包膜、结构及周围组织及血流分布等，近年来在肌肉软组织疾病中的应用愈加广泛[6]。蒋宇[7]在观察肌肉软组织病变声像图特征中，发现典型的卵圆形或椭圆形无回声区是由于肌内局灶性出血引起血肿所致。而炎症病变大多数的特点是具有边缘不规则或边界不清楚，蜂窝组织炎表现为侵及皮下脂肪的分界不清晰的病变。庄韬[8]等研究超声在诊断软组织损伤中的应用价值，检查内容主要包括组织损伤病变范围、内部回声、有无血流信号、筋膜是否连续及周围软组织情况等。通过超声检查与疾病最终结果对比比较，在诊断血肿、肌肉挫伤、肌疝及肌肉断裂中最为敏感。并且病程时间越短，超声检查敏感性越高，较为适用于急性软组织损伤早期。随着超声技术不断改善进步，使其具有方便移动灵活的优势，对软组织损伤变化过程有较高的敏感度，可适用于临床推广。
4 炎性反应
4、1 炎性因子
软组织损伤及恢复整个过程有较多炎症因子参与，其中起主要作用的是TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等[9]。在炎症反应过程中，TNF-α（血清肿瘤坏死因子-α）是出现最早的炎性介质，能激活中性粒细胞和淋巴细胞[10]。嗜中性粒细胞是炎症早期出现的一种主要的炎症细胞,该细胞的吞噬功能对于创伤病灶的除去有一定的帮助[11]。程延等[12]观察大鼠急性软组织损伤后TNF-α含量变化。结果显示，中药制剂治疗后TNF-α含量明显降低，并随着时间的延长，损伤组织中TNF-α含量下降越显著。说明中药制剂是通过调节组织内TNF-α含量从而抑制炎性反应，进而加快损伤组织的愈合过程。章建华等[13]观察外用软膏对急性软组织损伤治疗作用中IL-1β含量的变化。通过实验对照，结果显示经过外敷软膏一段时间的治疗后，与正常组组织内IL-1β含量的比较无明显差异，证明外用软膏对急性软组织损伤有明显的治疗效果，并能够抑制局部损伤组织产生的炎性反应，从而达到恢复机体损伤组织的目的。在临床治疗中，可以通过降低这些炎性因子指标，从而达到促进局部损伤组织愈合，治疗急性软组织损伤的目的。
4、2 氧自由基
正常机体内，可产生微量的氧自由基，但会被机体内抗氧化酶超快速清除，以达到保护机体，避免造成损伤的作用。丙二醛(MDA)的产生量与自由基的量相平衡，通过测定MDA的量可以间接的反映氧自由基的水平。超氧化物歧化酶（SOD）是机体重要的抗氧化酶，也是机体氧自由基的清除剂，能够促进炎症组织修复[14]。丁海波等[15]观察冷热交替治疗方式对急性软组织损伤组织中SOD和MDA含量变化，通过实验数据得出，此治疗方式能够提高组织内SOD含量，并降低MDA含量，其机制可能是促进SOD的表达，抑制MDA的产生，从而加快组织纤维修复，起到治疗的效果。
在急性软组织损伤中，炎症损伤作用等病理状态下，由于IL-α等炎症趋化因子的共同作用下，可使损伤局部组织的一氧化氮（NO）浓度剧升[16]。NO 过量可产生较多细胞毒素，并通过酶的作用促进PGE2产生，PGE2对机体的致痛作用与软组织损伤程度密切相关。高渐联等[17]研究中药提取物对损伤组织中NO和PGE2水平的影响。结果表明在经过中药提取物治疗后，能够降低NO和PGE2水平，证明中药提取物能够通过降低细胞毒素对损伤软组织产生的影响，可能通过抑制机体内炎症作用，进而加快损伤组织恢复的进程。
5 生长因子
生长因子能通过促进细胞分化分裂，加快组织愈合，在软组织损伤恢复过程中起到不可代替的作用。机体内血管内皮细胞异常兴奋，其分泌的血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（b-FGF），是明确促血管生长因子[18]。潘云松[19]研究血清VEGF水平变化对创伤组织修复的影响。应用酶联夹心法检测血清VEGF水平，实验数据测定表明，血清VEGF水平与组织损伤的愈合程度成正比关系。说明血清VEGF活性因子可能是通过与特异性受体的结合，促使b-FGF的合成与释放，从而促进损伤组织修复愈合。b-FGF是一种多种生物学活性的创伤愈合因子[20]。赵道洲等[21]研究外用散剂促进软组织损伤修复过程中b-FGF的表达。实验采用切割法形成动物软组织损伤模型，采用 SABC 免疫组化试剂染色，对实验各组各切片进行 b-FGF含量检测。结果表明，伤后 6 d外用散剂组b-FGF明显升高，证明此药物能够通过促进了b-FGF的表达，从而加快了组织损伤创面的愈合。
6 基因表达
目前利用基因治疗的方法尚未完善，利用基因表达的方式试图对软组织损伤修复过程进行调控,从而加快软组织损伤的愈合。杨加峰[22]成功构建PcDNA3.1-VEGF165质粒,并将其VEGF165基因直接转染注射于动物的损伤部位，实验结果显示损伤部位皮肤缺损处肉芽组织向心生长速度快，新生血管数量密度明显增多，提高了胶原基因mRNA的表达,证明PcDNA3.1-VEGF165质粒能够通过血管内皮细胞的增多，促进损伤部位微血管的形成。通过胶原基因mRNA的表达增强,促进损伤部位的恢复，并能加快损伤组织愈合的时间。
罗毅文等[23]研究急性软组织损伤组织中b-FGF mRNA基因的表达，通过实验，结果发现外用膏药早期能提高损伤组织中b-FGF mRNA基因表达水平，且下降速度较慢。此膏药促进损伤组织修复的作用机制可能是通过调节基因表达水平，刺激成刺激成纤维细胞合成和诱导内皮细胞的迁移，促使胶原纤维形成和毛细血管的增生，加快软组织损伤的愈合。
4 小结
指标的评价在动物实验中也起到极为重要的作用，本文从软组织学指标观察、血液流学变化、超声检查、炎性反应、生长因子、基因表达这六个方面分别进行了阐述，从不同的角度阐述了观察指标对软组织损伤的影响。但目前在基因表达机制方面还较为缺乏，采用基因疗法以促进软组织损伤的愈合方法, 探讨基因治疗的机制，可能会成为软组织损伤研究热点。
[1]王珏、郑氏当归散对SD大鼠急性软组织损伤后组织内NO含量和组织形态学的影响[D]、成都体育学院,2018、
参考文献：
[1]周国林,姚全胜,潘卫英.一种动物软组织损伤的实验方法[J]、中国药理学通报,1991,7(5);396-399
[2]雷蕾,邓鑫,郑尧,等、黄芩冷疗凝胶对急性软组织损伤大鼠治疗作用及不同理疗方法的对比[J]、中成药,2019、
[3]姜春华、活血化瘀新编[M]、上海:上海医科大学出版社,1990:50、
[4]张根印,牛淑亮,杨宁、苏栀消肿膏对急性软组织损伤模型大鼠血液流变学的影响[J]、陕西中医学院学报,2008,31(3):49-50、
[5]王刚,高谦,杨志丽,等、大鼠软组织损伤模型的评价[J]、现代预防医学,2011,38(12):2371-2373、
[6]李丽,惠中义、高频彩色多普勒超声在肌肉损伤中的应用价值[J]、甘肃医药,2015,34(6):448-450、
[7] 蒋宇、高频超声对肢体软组织病变的诊断[J]、医学新知杂志，2003，13（3）：175-176、
[8]庄韬,施彦华、高频彩色多普勒超声在诊断肌肉软组织损伤中的应用价值[J]、影像研究与医学应用,2017,1(5):119-120、
[9]江炜,梁嘉欣,陈艳芬、广东药科大学学报[J]、软组织损伤动物模型及其评价方法研究进展,2019、
[10]江炜,梁嘉欣,陈艳芬、软组织损伤动物模型及其评价方法研究进展[J]、 广东药科大学学报,2019,2096-3653、
[11]岑泽波、中医伤科学[M]、上海:上海科学出版社,1985、
[12]程延，赵晓芸，王敏娟,等、 玄黄膏药对急性软组织损伤大鼠损伤组织中IL-1β、TNF-α含量的影响[J]、陕西中医，2019，40(1)：9-11、
[13]章建华,丁伟国、三黄软膏外敷治疗大鼠急性软组织损伤的实验研究[J]、中医正骨,2010,22(3):6-8、
[14]吴峻,喻海忠,沈蓉蓉,等、火针治疗慢性软组织损伤实验研究生化检测报告［J］、江苏中医药，2003，24：38-39、
[15]丁海波,季爱玉,沈若武,等、急性软组织损伤亚急性期处理的实验研究［J］、青岛大学医学院学报，2012,48(2):140-142、
[16]胡野,凌志强,单小云、细胞凋亡的分子医学[M]、北京:军事医学科学出版社,2002、
[17]高渐联,李汉伟,邓智建,等、泽兰甲醇提取物对慢性软组织损伤模型大鼠的影响及其机制[J]、中成药,2018,40(3);537-543、
[18]谢辉,龙志江,朱久宜,等、活血、破血药对急性脑缺血大鼠基底动脉内皮细胞 VEGF 和 b FGF 表达的影响[J]、中国实验方剂学杂志,2012,18(23);183-186、
[19]潘云松、血清VEGF水平对创伤组织修复的影响［N］、山东医学高等专科学校学报,2015,4(36);273-275、
[20]巫国辉,李小林、重组人表皮细胞生长因子与碱性成纤维细胞生长因子联合应用促进创面愈合[J]、整形再造外科杂志,2005,4(2);233、
[21]赵道洲，史文宇,张鹏贵、十宝散促进软组织损伤修复过程中 b-FGF 及TGF-β1表达的实验研究[J]、中国骨伤,2008,21(9);667-668、
[22]杨加峰、VEGF基因转染对骨及软组织损伤影响的实验研究[D]、山东大学，2006、
[23]罗毅文,孙之镐,谭新华,等、复方西红花膏对损伤组织bFGF mRNA表达的影响[J]、中国中医骨伤科杂志,2003,11(6);1-4、