【摘要】 目的 对新生儿进行脆性X综合征的筛查，发现一全突变患儿，并对患儿的家系进一步进行研究。方法 采集共992名新生儿的脐带血，提取DNA用于脆性X综合征检测。采用CGG重复区域全长PCR扩增及重复引物PCR的方法扩增样本，并通过毛细管电泳平台进行分型检测。结果 992名新生儿的一次成功检出率为99.4%（986/992），共检测到984例野生型、1例中间型、1例全突变患儿。与患儿家属协商同意后对其家系成员进行检测，发现其母亲为全突变携带者，其母亲的舅舅也为脆性X综合征患者，并表现出典型的临床症状。结论 通过全长扩增加重复引物扩增的方法可以有效、准确检测出FMR1基因CGG重复数，有助于新生儿脆性X综合征筛查。由于缺乏认知且缺少检测手段，脆性X综合征可在家系中长期遗传、扩大。应提倡优生优育，并加强对脆性X综合征的筛查工作。
【关键词】 脆性X综合征 家系 重复引物PCR 筛查
脆性X综合征是一种X染色体连锁不完全显性遗传疾病，是遗传性神经发育迟滞的重要原因之一，其发病率仅次于唐氏综合征。其临床症状常表现为不同程度的神经发育迟滞、智力低下、特殊面容、自闭症等[1]。1991年，四组研究者相继发表结果发现脆性X综合征是与FMR1基因的CGG重复序列的急剧延长及其异常甲基化相关的[2-5]。后续研究表明，CGG重复数的增加与FMR1基因异常甲基化并非同时出现[6]，这两种异常现象共同造成了FMR1基因转录的抑制，降低了FMR1蛋白水平[7]。由于FMR1蛋白具有特异性的RNA结合能力[8]，研究者推测在中枢神经系统中，FMR1可以协助mRNA从细胞核到细胞质的转运、定位，并参与调节蛋白质合成[8,10]。低FMR1蛋白水平导致了神经细胞中相关蛋白合成的异常，进而影响树突突触形成及大脑可塑性[11,12]，产生神经发育迟滞的临床表型。
可以根据CGG重复数划分FMR1基因的不同类型：正常型为5~44个重复，以29，30个重复最为常见[7,12]；45-54个重复为中间型，又称灰区。一般来说，此基因型携带者表型正常，但其后代可能发生重复单元数量变异；55-200个重复为前突变，此时CGG重复数变得很不稳定，在母亲和孩子间易于发生变异，且携带者有几率表现出临床症状，如脆性X相关原发性卵巢功能不全及共济失调综合征；若CGG重复数大于200，常伴有FMR1基因异常甲基化，携带者表现为脆性X综合征[12]。
为有效控制脆性X综合征的发病率，进行产前筛查及新生儿筛查是十分关键的措施。本文采用了PCR全长扩增与重复引物PCR扩增相结合的方法，以提高新生儿筛查准确性。共筛查992名新生儿，一次成功检出率达99.4%（986/992）.其中984例野生型，1例中间型，1例全突变男性。在与全突变患儿家属沟通中得知，其家族中有智力障碍患者，头大, 脸长, 大耳廓, 厚唇, 行为异常，通过过临床症状也考虑为脆性X综合征。经同意后，我们对该家系进行了深入研究，探讨脆性X综合征家系的遗传表现。
1.临床资料
此科研项目通过了伦理委员会审查。并经家属知情同意后，我院对2017年6月-2018年2月出生的新生儿随机采集脐带血以进行脆性X综合征筛查，共检测992名新生儿，其中446名女性，546名男性。
其中一男性新生儿检测出脆性X综合征阳性，与其家属知情同意沟通过程中了解到，其家族有智力障碍患者，头大, 脸长, 大耳廓, 厚唇, 行为异常，通过过临床症状考虑为脆性X综合征，建议采集样本。经家属同意后，除此婴儿外共采集其家系8名成员血样，用于分析其家系脆性X综合征发病情况。
2.结果
在筛查中我们发现了一名男性脆性X综合征阳性患儿，经相关家属知情同意后对其家系成员进行检测，其家系结构和检测结果如图所示。其中，II j和IV c个体经检测其FMR1基因的CGG重复数均大于200，为脆性X综合征患者，II j，男67岁，身高178，大头，前额突出，长脸，耳位低，大耳朵，招风耳，余查体未见明显异常；
III d个体的CGG重复数为29 / >200，属于脆性X综合征携带者,外貌未见明显异常，但其智力偏低（可以照顾自己的生活起居，有时答非所问，无法进行复杂的对话），反应慢；此外，家属报告III d个体的母亲，II d个体也表现出了一定的脆性X症状，怀疑为携带者，但该个体已经去世。其余接受检测的家系成员均为正常型。在与家属的详细交流中得知III d个体还有一名患儿（IV a），表现出明显的脆性X综合征临床症状，但该个体已经遗失；该家系中FMR1基因CGG重复数的遗传完全遵从遗传定律，未出现代际间的重复数突变。
讨论
在本研究中，我们观察到了一例脆性X综合征患儿，通过进一步对其家系的调查，我们确认了该患儿来自一个脆性X综合征家系。该家系中的III d个体（患儿母亲）为携带者，其两名男性孩子分别为正常型和脆性X综合征。其早先还育有一子，通过描述怀疑为脆性X综合征患儿，但已经遗失。该家系成员并不了解脆性X综合征，在经本研究确认前，该脆性X综合征全突变等位基因已经在家系中至少传递了三代人。脆性X综合征目前无法治愈，只能针对表型进行支持性治疗，对整个家庭造成严重、长期的影响；且脆性X综合征可以在家系中扩大，如果不加以管，该家系后代中患病人数和患病程度都会增加。对此家系提供遗传咨询。
脆性X 综合征是导致男性智力障碍最常见的原因，占10％ ～20％，其在男性中的发病率为1／7 000 ～1／5 000，女性为1／６ 000 ～1／4 000［13］我们筛查992例新生儿脆性X综合征筛查，发现1例患儿，因样本量少，不能代表当地区发病率，但提示我们该地区有此疾病的存在，加大孕前及产前筛查非常必要。
女性杂合子中30％ ～50％有不同程度的智力低下[14]， II d个体的CGG重复数为29 / >200，属于脆性X综合征携带者,外貌未见明显异常，但其智力偏低（可以照顾自己的生活起居，有时答非所问，无法进行复杂的对话），反应慢。
这进一步说明了加强基层脆性X综合征宣传和加大筛查力度、提供遗传咨询、倡导优生优育的重要性。
参考文献
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