摘要 目的 分析XX地区儿童感染7种常见呼吸道病毒情况，从而为临床诊疗儿童呼吸道病毒感染提供参考。方法 收集2018年5月-2019年4月于我院就诊患儿9861例，采用直接免疫荧光法进行A、B型流感病毒（IFA、IFB）、I、II、III型副流感病毒（PIV1、PIV2、PIV3）、呼吸道合疱病毒（RSV）及腺病毒（ADV）等7种常见呼吸道病毒抗原检测，并分析其检测结果。结果2649例检测出呼吸道病毒抗原阳性，总阳性率为26.86%，IFA 240例（9.06%），IFB 29例（1.09%），PIV1共106例（4.0%），PIV2共25例（0.94%），PIV3共275例（10.38%），RSV 1687例（63.68%），ADV 287例（10.85%）。IFA、PIV3、RSV及ADV阳性中≤1岁检出率明显高于1-3岁及＞3岁（P<0.05）；IFB、PIV1及PIV2阳性在≤1岁、1-3岁79例及＞3岁各组差异均无统计学意义（P>0.05）；≤1岁患儿7中常见呼吸道病毒检出阳性率明显高于1-3岁及>3岁组（P<0.05）。男女患儿IFA、IFB、PIV1、PIV2、PIV3、RSV、ADV阳性检出率及7种病毒总阳性检出率差异无统计学意义（P<0.05）。第4季度IFA、IFB阳性检、第3季度患儿PIV1阳性检出率、第1季度患儿PIV3、ADV阳性检出率明显高于其他3个季度（P<0.05）；第2、4季度 RSV阳性检出率及7种病毒阳性检出率均明显高于其他2个季度（P<0.05）；4个季度 PIV2阳性检出率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 RSV病毒是XX地区儿童呼吸道病毒感染的主要病原体，其次是ADV和PIV3；1岁以下儿童呼吸道病毒感染率最高，夏、冬季是呼吸道病毒感染高发期。
关键词：呼吸道病毒感染；儿童；直接免疫荧光；病毒检测
呼吸道感染是儿童常见、多发性疾病，其中约80%-90%的呼吸道感染是由病毒感染所致，且儿童是发生呼吸道病毒感染的易感人群。目前引发儿童呼吸道病毒感染的常见病原体主要有A、B型流感病毒（IFA、IFB）、I、II、III型副流感病毒（PIV1、PIV2、PIV3）、呼吸道合疱病毒（RSV）及腺病毒（ADV）等，疾病早期病原学检测不仅有助于及早确诊病原，对指导临床用药及避免抗生素滥用具有重要价值[1]。为梳理XX地区儿童呼吸道病毒感染情况，本文回顾性分析了2018年5月-2019年4月9861例儿童呼吸道病毒感染检测数据，了解儿童呼吸道病毒感染流行特点，从而为临床预防鹤诊疗提供依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集2018年5月-2019年4月在我院就诊的9861例患儿，男性患儿5719例，女性患儿4142例。年龄最小为1月11d，最大为12岁，其中年龄≤1岁有3734例，年龄1-3岁有3211例，年龄＞3岁有2916例。第1季度（1-3月）共2505例，第2季度（4-6月）共2323例；第3季度（7-9月）共2546例，第4季度（10-12月）共2487例。
1.2 方法
1.2.1 试剂与仪器
采用直接免疫荧光对7种常见呼吸道病毒抗原进行检测，所用试剂盒购自美国Diagnostic Hybrids Inc公司。检测所用荧光显微镜购自日本Olympus Corporation所产BX-51型。
1.2.2 样本采集与检测
患儿入院当天由专业人员采集鼻咽拭子样本：取植绒拭子从患儿鼻孔插入鼻腔并直达鼻咽部，轻轻捻动植绒拭子2-3次后取出拭子，并将其放置含有2ml生理盐水存储管中洗脱，立即将采集的样本送检。在检测实验室中将样本放在漩涡混匀器上轻微混匀约30s，见浑浊后取出植绒拭子。2500r/min离心处理10min后将上清液去除保留100-150ul样本，并将其充分混匀形成浑浊细胞悬浮液。取约20ul样本加至载玻片上，冷风风干至样本干燥，并将载玻片浸没在丙酮溶液10min固定样本，随后取出晾干待用。每个样本加入约20ul呼吸道病毒荧光筛查试剂，并使试剂完全覆盖样本。将载玻片放置在37℃恒温湿盒25min，然后用磷酸盐缓冲液冲洗载玻片样本，并将冲洗后载玻片放置新磷酸盐缓冲液中浸没冲洗2次。随后将载玻片取出，加入1滴封闭液，放置在荧光显微镜下观察。检测操作严格按照试剂盒使用说明进行，样本在荧光显微镜200倍视野中观察2个及以上绿色荧光阳性细胞即为判定样本为阳性。
1.3 统计学处理
采用Excel和SPSS22.0对本研究中相关数据进行处理，其中计数资料以构成比（n,%）表示，组间比较采用卡方检测，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 9861例儿童7种常见呼吸道病毒检出情况
9861例儿童中共有2649例检测出呼吸道病毒抗原阳性，总阳性率为26.86%，其中IFA 240例（9.06%），IFB 29例（1.09%），PIV1共106例（4.0%），PIV2共25例（0.94%），PIV3共275例（10.38%），RSV 1687例（63.68%），ADV 287例（10.85%）。
2.2 儿童呼吸道病毒检测阳性率与年龄关系
IFA、PIV3、RSV及ADV阳性中≤1岁检出率明显高于1-3岁及＞3岁，各组差异均具有统计学意义（P<0.05）；IFB、PIV1及PIV2阳性在≤1岁、1-3岁79例及＞3岁各组差异均无统计学意义（P>0.05）；≤1岁患儿7中常见呼吸道病毒检出阳性率明显高于1-3岁及>3岁组，差异具有统计学意义（P<0.05）。详见表1。
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2.3儿童呼吸道病毒检测阳性率与性别关系
男性与女性患儿的IFA、IFB、PIV1、PIV2、PIV3、RSV、ADV阳性检出率及7种常见呼吸道病毒总阳性检出率差异无统计学意义（P<0.05），详见表2。
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2.4儿童呼吸道病毒检测阳性率与季度关系
第4季度IFA、IFB阳性检出率、第3季度PIV1阳性检出率及第1季度患儿PIV3、ADV阳性检出率显著高于其他3个季度（P<0.05）；第2、4季度RSV阳性检出率及7种呼吸道病毒阳性检出率均明显高于其他2个季度（P<0.05）；4个季度患儿PIV2阳性检出率差异无统计学意义（P>0.05），详见表3。
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3 讨论
根据WHO数据统计显示，在发展中国家呼吸道病毒感染性疾病已是儿童患病、住院及死亡的常见病因，因此儿童呼吸道病毒感染成为全球公共卫生的重大挑战[2]。病原学检测是疾病早期诊断病原体的主要手段，通过早期快速病原学检测能够减少抗菌药物滥用，并能及时为患儿制定针对性治疗方案提供依据。故而，近年来临床上越来越重视对儿童呼吸道病毒感染的病原学检测。
由于存在地区、季节、医院等差异性，儿童呼吸道病毒感染的检测结果也不尽相同。有研究报道儿童呼吸道病毒感染中以RSV为主要病原体，且约50%的新生儿出生后1年内会感染RSV[3]。也有学者报道在我国儿童感染ADV病毒风险较大，往往会诱发儿童重症肺炎[4]。此外，研究显示PIV病毒是5岁以下儿童上呼吸道感染的常见病因[5]。本研究对2018年5月-2019年4月期间9861例患儿进行了呼吸道病毒抗原检测，结果表明有2649例检测出呼吸道病毒抗原阳性，总阳性率为26.86%，其中RSV阳性率最高 （63.68%），其次为ADV（10.85%）和PIV3（10.38%），IFB阳性率最低（1.09%），这与朱耿超[6]等报道结果一致。上述结果提示RSV病毒是XX地区儿童呼吸道病毒感染的主要病原体，其次是ADV和PIV3。年龄小于1岁患儿IFA、PIV3、RSV、ADV阳性检出率以及7种常见呼吸道病毒总检出阳性率明显高于大于1岁者，说明 1岁以下儿童呼吸道病毒感染率最高，这与范雪[7]等研究报道一致。分析认为，随着儿童年龄增长，自身免疫功能不断增强，抵抗呼吸道病毒感染能力不断提升，因而年龄越大则呼吸道病毒阳性检出率越低。本研究发现， IFA、IFB、PIV1、PIV2、PIV3、RSV、ADV阳性检出率及7种常见呼吸道病毒总阳性检出率与患儿性别无关，提示呼吸道病毒感染与性别无密切关联。呼吸道病毒感染具有一定季节性，文献[8]报道了7种常见儿童呼吸道病毒检出率呈现显著季节性差异。本研究通过分析不同季度7种常见呼吸道病毒阳性检出率，第2、4季度RSV阳性检出率及7种呼吸道病毒阳性检出率均明显高于其他2个季度，而2、4季度分别为夏、冬季，表明XX地区夏、冬季是呼吸道病毒感染的高发期。
综上所述，RSV病毒是XX地区儿童呼吸道病毒感染的主要病原体，其次是ADV和PIV3；1岁以下儿童呼吸道病毒感染率最高，夏、冬季是呼吸道病毒感染高发期。通过本研究可为预防和监测XX地区儿童呼吸道病毒感染提供科学依据。
参考文献
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基金：深圳市宝安区科技创新局基金；项目编号：2015094
广东省医学科学技术研究基金项目；项目编号：A2019268