段丽萍1.2.3*、陈晓雪1.2.3、徐松1.2.3、徐红贵1.2.3、杨志1.2.3
1、云南省药物研究所 云南 昆明 650111 ；2、云南白药集团创新研发中心 云南 昆明 650111； 3、云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室，云南昆明 650111
摘 要：目的 分别建立小儿健脾平肝颗粒中白芍、茯苓、陈皮、太子参成份的薄层色谱鉴别法。方法 分别采用薄层色谱法对小儿健脾平肝颗粒中白芍、茯苓、陈皮、太子参成份进行定性鉴别。结果 针对小儿健脾平肝颗粒中白芍、茯苓、陈皮、太子参各成份所建立的薄层色谱法专属性强，能够鉴别出小儿健脾平肝颗粒中白芍、茯苓、陈皮、太子参提取成份。结论 本试验所确定的各薄层色谱鉴别方法专属性强，可用于评价小儿健脾平肝颗粒中白芍、茯苓、陈皮、太子参成份的提取效果。
关键词：小儿健脾平肝颗粒；薄层鉴别；陈皮；白芍；茯苓；太子参。
儿童消化系统疾病作为儿童常见疾病类型排名第二，最常见的疾病种类主要包括消化不良、儿童腹泻、肠胃炎等，这两类构成儿童常见病用药主力。“脾常不足”是小儿时期的生理特点之一，所以饮食失节、挑食、嗜食香甜生冷，更容易致脾胃受损，造成积食化热、消耗胃阴、脾胃不和、纳运及升降失常，故出现纳差厌食、腹胀或痛、尿如米泔；进而则致脾胃虚弱，水谷精微不能敷布肌肤及保证全身发育需要，故出现面黄肌瘦，身体发育迟缓，抗病能力弱；脾胃不和，则夜眠不安。小儿健脾平肝颗粒剂是云南白药集团独家品种，为了有效控制该制剂产品的质量，以保证产品疗效，我们对处方中相关药材提取效果进行了研究，建立包括陈皮、白芍、茯苓、太子参薄层鉴别方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器
ATY-124型分析天平(苏州岛津分析仪器有限公司)；ZFY-4A型旋转蒸发器(上海科学仪器有限公司)；TF-2000型烘箱(重庆创测仪器有限公司)；DF-101T-6型磁力搅拌器(上海科学仪器有限公司 )；SKT20LHC型超声波清洗仪(上海科导超声仪器有限公司 )；展开缸；硅胶G薄层板(青岛海洋化工有限公司制造)。
1.2 试药
本处方中太子参、茯苓、山药、白芍、陈皮等16味药材，均从云南白药集团中药资源事业部领用，经鉴定，以上药材均符合《中国药典》2015年版规定，鉴定机构为云南白药中药资源事业部。芍药苷对照品，橙皮苷对照品，太子参和茯苓对照药材(中国食品药品检定研究院 批号分别为：110736-201741，110721-201617，121004-201408和121117-201509)；小儿健脾平肝颗粒(云南白药研发中心，批号：201801、201802、201803)；其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 陈皮的薄层鉴别
2.1.1 供试品溶液
称取本品6g，置锥形瓶中，加入甲醇适量，超声10min，冷却后，用0.45μm的水系微孔滤膜滤过，滤液置水浴上挥干，残渣经适量水溶解，并加适量乙醚提取3次，分离出水溶液，再用适量HCl溶液调节pH值至2~3，用适量醋酸乙酯提取3次，分离出醋酸乙酯溶液，在水浴上蒸干，残渣用1ml甲醇溶解后作为供试品溶液。
2.1.2 对照品溶液
取橙皮苷对照品10mg，置10ml容量瓶中，加适量甲醇，超声10分钟，冷却后用甲醇定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液。按2.1.1项下方法制备不含陈皮药材的的阴性对照溶液。
2.1.3 陈皮的鉴别
按照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验，展开剂：CHCl3：CH3OH：CH3CH2COCH3：CH3COOH(13:4:1:1)；点样量均为10μl；固定相：硅胶G薄层板；显色剂：1%三氯化铝乙醇溶液；干燥温度：105℃，干燥时间：3分钟，检测设备：紫外灯(365nm)。结果阴性溶液不干扰陈皮的鉴别，供试品色谱图中能找到与对照溶液相同颜色的斑点，详见图1。
2.2 白芍的薄层鉴别
2.2.1 供试品溶液
称取本品4g，置锥形瓶中，加适量甲醇超声10分钟，冷却后过滤，然后在水浴上挥发干，再加适量水溶解，用适量正丁醇提取3次，合并上述提取液，水浴上加热浓缩至约1ml，然后添加适量中性氧化铝，搅拌混合，蒸干，研磨过100目筛，取约3g填入直径为15mm的玻璃柱中，用适量甲醇洗脱，收集流出液，水浴上挥干后，加乙醇0.5ml使溶解后作为供试品溶液。
2.2.2 对照品溶液
精密称取芍药苷对照品10mg，置10ml容量瓶中，加适量无水乙醇、超声10分钟，冷却后加无水乙醇定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液。按2.2.1项下方法制备不含白芍药材的的阴性对照溶液。
2.2.3 白芍的鉴别
按照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验，展开剂：CHCl3：CH3CH2COCH3：CH3OH：CHOOH(8:1:2:0.04)；点样量：10μl；固定相：硅胶G薄层板；显色剂：5%香草醛硫酸溶液。结果阴性溶液不干扰芍药苷的鉴别，结果阴性溶液不干扰陈皮的鉴别，供试品色谱图中能找到与对照溶液相同颜色的斑点，详见图2。
2.3 茯苓的薄层鉴别
2.3.1 供试品溶液的制备
称取本品4g，置锥形瓶中，加入适量正己烷，超声溶解20min，冷却后过滤，然后在水浴上蒸发干后加入1ml甲醇溶解后作为供试品溶液。
2.3.2 对照品溶液的制备
称取茯苓对照药材2g，至30ml容量瓶中，加适量正己烷，超声溶解20min，冷却后定容至刻度，用0.45μm的有机系微孔滤膜过滤，然后在水浴上蒸干，加甲醇1ml溶解后制成对照药材溶液。按2.3.1项下方法制备不含茯苓药材的的阴性对照溶液。
2.3.3 茯苓的鉴别
按照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验，展开剂：甲苯-冰醋酸(19:1)；点样量：10μl；固定相：硅胶G薄层板，检测设备：紫外灯(365nm)，结果阴性溶液不干扰茯苓的鉴别，供试品色谱图中能找到与对照溶液相同颜色的斑点，详见图3。
2.4 太子参的鉴别
2.4.1 供试品溶液的制备
称取本品1g，至置回流烧瓶中，加适量甲醇，回流30分钟，过滤，滤液在水浴上挥干，加5ml水溶解后，过内径为2cm，长度为15cm的强酸性阳离子交换树脂柱（型号：732)；洗脱液：水，用量100ml；洗脱后，再用氨溶液(5→100)100ml洗脱，收集流出液，水浴上蒸干，加3ml无水乙醇溶解后作为供试品溶液。
2.4.2 太子参的鉴别
按照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验，展开剂：正丁醇-冰醋酸-水(4:1:1)；点样量：3μl，固定相：硅胶G薄层板；显色剂：0.2%茚三酮乙醇溶液。结果阴性溶液不干扰太子参的鉴别，供试品色谱图中能找到与对照溶液相同颜色的斑点。
2.5 自制3批样品薄层鉴别
分别取自制3批样品(批号分别为：201801、201802、201803)，对茯苓、白芍、陈皮和太子参4种药材，按照上述方法进行薄层鉴别试验，结果白芍、陈皮、茯苓、太子参分别在同一薄层板上，3批自制样品及对照品在相应的位置上，出现显相同颜色的斑点，表明所开发的TLC法能有效鉴别相应的药材成分，也说明了提取方法正确，能将药材的关键成分转移到成品中。
3 讨论
通过该试验，对小儿健脾平肝颗粒中陈皮、白芍、茯苓、太子参四味药材制定了薄层鉴别方法，操作方法简便、专属性强、重复性也好，对小儿健脾平肝颗粒的质量控制和质量标准的进一步研究具有及其重要的指导意义，也为类似制剂或成分的鉴别和含量测定提供参考。
参考文献
[1] 贺婕, 张爱荣, 姜建芬. 复方黄葵颗粒的薄层鉴别研究[J].山西医科大学学报, 2017,48(03):260-262.
[2] 邓哲, 荆文光, 刘安. 薄层色谱法在当前中药质量标准中的应用探讨[J].中国实验方剂学杂志, 2019, 25(07):201-206.
作者简介：段丽萍(1982-)，女，云南丽江人，本科，研究方向：药物制剂。Tel: 18987263937, E-mail: duanliping2000@126.com