马玉颖1，刘壮1，邹子兰1，陈玉1，梁印1，王珊1*
陕西国际商贸学院，陕西，咸阳712046
[摘要] 目的：比较分析生姜不同炮制品的抗氧化活性研究。方法：采用DPPH、ABTS、FRAP三种体外抗氧化模型对生姜、干姜、炮姜三种姜的乙醇提物的抗氧化活性进行比较研究。结果：在DPPH、ABTS和FRAP三种模型测定中发现生姜不同炮制品均具有一定的抗氧化活性，但是其抗氧化活性差别较大，其中生姜的抗氧化活性相对较好。结论：该实验所建立的生姜不同炮制品的体外抗氧化方法，简便、快速可应用与生姜不同炮制品的抗氧化活性的评价。
[关键词] 生姜不同炮制品；提取物；抗氧化活性
生姜 (Zingiber officinale Roscoe.) 是姜科多年生草本植物，在亚洲、非洲、拉丁美洲等地均有种植[1]。我国乃是世界上最大的生姜出口国家之一，生姜在我国南方的广东和浙江广泛栽培，其次则是安徽、四川、云南、湖南、湖北等地；在我国的北方则以山东为主要产地，还有河南、陕西等 [2]。生姜含有较高的营养成分与保健价值，是当今世界范围内的一种重要的香辛调味料，更是亚洲传统的药食同源植物。当然生姜作为原料在医药、食品和化妆工业领域也是享有盛誉[3]。
目前经研究发现，生姜中主要成分有挥发油，尚含辣味成分姜辣素，除此之外，还含有树脂、阿拉伯胶、果糖、葡萄糖、脂肪油、微量元素等[4]。现代药理研究发现生姜具有降血糖作用、抗炎作用、抗肿瘤作用、抗病原微生物作用、抗氧化作用等[5]，研究发现生姜的药理活性与生姜中所含的姜辣素类成分具有密切的关系。生姜经过不同的炮制过程可分别加工成干姜、炮 姜、姜皮和姜炭，不同的炮制品又具有各自特殊的药用价值和保健功效[5-8]。生姜具有开胃止呕、发汗解表的功效；炮姜具有温中止泻、温经止血的功效；干姜具有温中散寒、回阳通脉、温肺化痰的功效；姜皮具 有止汗微寒的功效；姜炭具有温经止血、温脾止泻的功效。因此本实验对生姜不同炮制品的抗氧化活性进行比较研究，为扩大生姜的临床应用提供理论依据。
1 材料
T6-新世纪紫外分光光度计（北京普析通用股份有限公司）；十万分之一电子天平（METTLER-XP-205，深圳市盛美仪器有限公司）。
DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，购于：日本东京化成工业株式社会)；ABTS（2,2'氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐购于：日本东京化成工业株式社会）；TPTZ（2，4，6–三吡啶基–1,3,5-三嗪购于：日本东京化成工业株式社会）。
鲜姜为蘘荷科植物姜(Zingiber officinale Rosc.)的新鲜根状茎，购自人人乐超市，由陕西国际商贸学院雷国莲教授鉴定。干姜和炮姜均为实验室自制。
2 方法
2.1 工作液的配制
准确称取DPPH适量，用无水乙醇溶解并配制成200 μmol L-1的工作液，置于4℃备用，即得。
准确称取适量ABTS和过硫酸钾用水溶剂并配置成浓度分别为7 mmol L-1和2.45 mmol L-1的备用溶液，再将两者等体积混匀，于室温下避光放置15 h，即得ABTS储备液。使用前用甲醇稀释至光密度为0.7 ± 0.003得ABTS工作液。
准确称取适量醋酸钠、TPTZ及FeCL3.6H2O，用水溶解并配置成浓度分别为
0.3 mmol L-1、10 mmol L-1及20 mmol L-1，再将三者按照为10: 1: 1体积比混匀，即得TPTZ工作液，该溶液要现配现用。
2.2 供试品的配置
取生姜 (洗净，自然风干，用时切碎)、干姜粉末（过60目筛）和炮姜粉末（过60目筛）各10 g，置于锥形瓶中， 80％的乙醇100 mL，超声提取两次，第一次超声30 min，第二次超声20 min，过滤，合并滤液，回收乙醇，浓缩物水浴蒸干，即得生姜、干姜、炮姜的醇提取物。
称取生姜、干姜、炮姜的醇提取物0.5 g（平行三份），精密称定，加25 mL 80%乙醇，超声处理30 min，所得溶液用80%乙醇稀释至一系列浓度，备用。
2.3 样品的测定
2.3.1 DPPH实验 分别量精密取2ml各供试品溶液与3 ml 200 μmol L-1DPPH工作液于室温反应40 min，并于517 nm处测定吸光度，重复测定3次。根据清除率的计算公式计算DPPH清除率。
清除率 (%) = [1-(Ai-Aj)/A0]×100%（a），公式中，Ai表示2ml DPPH溶液与2mL供试品溶液的吸光度；Aj表示2mL 无水乙醇溶液与 2mL 供试品溶液的吸光度；A0为2 ml DPPH溶液与3mL空白试剂的吸光度。实验结果以清除DPPH自由基的IC50值表示样品的抗氧化活性。
2.3.2 ABTS实验 分别量精密取0.5 mL各供试品溶液与3.5 mL ABTS工作液混匀，于室温下反应40 min，并于734 nm下测定吸光度，重复测定3次。实验结果根据公式（a）计算ABTS清除率，同时实验结果以清除ABTS自由基的IC50值表示样品的抗氧化活性。
2.3.3 FRAP实验 分别量精密取0.5 mL各供试品溶液与3.5mL FRAP工作液混匀，反应60min，在734 nm处测定吸光度，重复测定3次，以FeSO4为标准物质绘制标准曲线，计算回归方程，样品的抗氧化能力用FRAP值表示：1FRAP单位相当于1 mmol L-1FeSO4。
3 结果与讨论
通过对生姜、干姜、炮姜的醇提取物的抗氧化活性研究发现，生姜不同炮制品均具有一定的抗氧化活性，但是其抗氧化活性差别较大。通过三种体外抗氧化模型对生姜不同炮制品的抗氧化活性进行比较研究，实验结果发现其中在三种体外抗氧化模型中，生姜的抗氧化活性均较高。该研究结果为扩大生姜及不同炮制品的应用提供一定的理论依据。
参考文献：
[1] 李欣蔚．生姜不同提取方法的比较及其醇提物稳定性研究[J]．中华中医药杂志, 2015, 08: 24-28.
[2] 谢敏华．小茴香抗菌与抗氧化作用研究进展[J]．中国调味品, 2012, 32: 10-26.
[3] 张成曾, 刘景华．天然香料手册[M]．北京轻工业出版社, 1989: 21-24.
[4] 王颖, 李东伟．生姜的研究进展[J]．中国药业, 2006, 15 (9) : 62-63．
[5] 邹磊. 生姜中生物活性物质及其研究进展[J]. 中国酿造, 2009(12): 6-9.
[6] 张科卫, 马彩霞, 缪六舒. 干姜、炮姜中成分的比较[J]. 中 成药, 2014(6): 1254-1260.
[7] 王维皓, 王智民, 高慧敏, 等. 干姜炮制品的质量研究[J]. 中国中药杂志, 2009(5): 564-566.
[8] 韩燕全, 夏伦祝, 洪燕, 等. 干姜和炮姜的质量比较及提高 研究[J]. 中国民族民间医药, 2011(4): 30-31, 33.