徐秋语
西安交通大学医学部 陕西 西安 710061
摘要：心肌梗死（MI）是指冠状动脉阻塞，供血不足导致的心肌缺血性坏死，，目前在45岁以下人群发病率呈逐年上涨的趋势，由于心肌梗死的发病急、危害性大等特点，心梗逐渐成为威胁人类生命健康的一大疾病，因此，研究心肌梗死的实验便十分重要，本文章主要为广大研究人员提供一个切实有效可行的快速造模方法。本方法采用电凝法，是一种不需要呼吸机麻醉机，且成功率较高的方法。经大量重复实验证明，成活率可达百分之七十及以上。该种方法便捷，快速，性价比高，成功率高。因此是一种比较好的方法。
关键词：心肌梗死；电凝法；快速造模；心梗小鼠
随着世界人口老龄化的加剧，以及人们生活水平的提高，改善，冠心病在人群中的发病率普遍提高，目前有不少实验对此课题进行研究，而建模又是实验必备的重要环节。因此，心肌梗死动物实验模型建立的成功与否将直接决定了对心肌梗死研究的成败。本文致力于介绍一种快速简便成功率高的心梗小鼠建模方法。
1.材料和方法
1.1动物
SPF级BALB/C雄性小鼠105只，11周龄，体重39＋—2g，购自于西安交通大学动物实验中心，手术在西安交通大学实验室进行，严格按照实验动物使用的3R原则。、
1.2手术器械，试剂。
5-0缝线，外科手术器械，自制固定板，便携式无影灯，5％水合氯醛，75％酒精，台式电凝止血笔。
1.3术前准备
将小鼠腹腔注射麻醉后，固定于固定板上，将无影灯打开，提前预热电凝止血笔，整个过程无需呼吸机。
1.4手术方法
（1）将用水合氯醛麻醉过的小鼠固定于固定板上。（2）用酒精消毒术区皮毛。（3）在小鼠第4肋间隙附近斜向上內做一1.5厘米左右的切口。（4）用5-0手术风险打一荷包松结备用。（5）止血钳钝性分离胸大肌和胸小肌及其筋膜。夹断胸小肌，以方便后续挤出心脏（6）用止血钳刺破肋间隙（7）左手无名指和小指托着小鼠脊柱，中指食指与大拇指配合挤出心脏，同时控制开口不可使过多空气进入小鼠胸腔。（8）在小鼠心冠状动脉左前降支用电凝笔凝住血管，注意不可将电凝笔扎入太深，防止穿破血管。（9）凝住血管后可见左心室前壁迅速由鲜红变为苍白，将心脏放回胸腔。（10）挤出胸腔内气体。打紧荷包关胸。
整个过程在1分钟之内完成，小鼠将在5小时内苏醒。
1.5形态及病理分析
术后28天分析完心功能后，用麻药麻醉所有小鼠，开胸肉眼观察其形态，摘取心脏做石蜡包埋，制成切片可看到瘢痕。
2.结果
2.1小鼠术后存活情况
手术组小鼠冠状动脉结扎术后早期死亡率为19.04％，死亡原因为：（1）止血钳伸入肋间隙后捅破心脏导致大出血死亡。（2）未能及时迅速挤出心脏导致大量空气进入气胸死亡。（3）用电凝笔是用力太深导致血管破裂出血死亡。至术后四周时间依然存活小鼠为85只，实验组存活率为71，96％，对照组为100％.
2.2心肌组织病理学形态学检测结果
术后28天处死的小鼠，开胸后肉眼可见整体心脏体积变大，左心室壁变薄，染色观察切片发现缺血坏死区域显著。
3.讨论
冠心病是威胁人类生命健康的严重疾病之一，目前，针对此疾病的研究主要是建立在心肌梗死的动物的基础上进行，因此，效率高易操作的造模方法显得格外重要。目前研究心肌梗死造模的方法有许多种，有冠脉结扎法，栓塞法，冷冻法等，其余技术对于实验室要求较高，对于实验室人员的要求也较高，由于对气管插管、冠脉结扎的熟练度不高导致死亡率较高。
与普通传统的心肌梗死模型建造方法相比，本方法最大的特点是简洁快速，无需气管插管，无需呼吸机、麻醉机即可上手操作，大大缩短了造模所需的时间、人力、物力、财力，此外，本方法较其他方法对于心脏的损害较小，不仅提高了小鼠的存活率，而且提高了小鼠的利用率，同时更方便长期实验的进展。
对于实验人员而言，熟练的操作和长期的训练是保证存活率的关键。对刺破第四肋间隙的力度、挤出心脏的手法以及电凝笔的力度都需要长期的训练。在手术中的技巧有以下几点：第一，保证手术开口尽量小，防止有更多空气进入胸腔。第二，在分离胸大肌，胸小肌后将胸小肌剪断，将胸小肌剪断不会影响到小鼠的存活，但是由于能将肋间隙暴露的更加完整，会大大提高挤心脏的成功率。第三，在心脏跳动最剧烈的地方伸入止血钳，有助于心脏的挤出。第四，挤出心脏时食指和大拇指尽量封闭胸腔，防止空气进入导致气胸。
在模型的建造过程中，气胸是导致小鼠死亡的主要因素，因此要尽量避免伤口过大，胸腔不封闭的情况，同时也要求实验人员的操作尽量轻柔。
本模型制作方法上手快，效率高，实验结果明显且死亡率低。无需使用呼吸机，麻醉机，在节约成本的同时又降低了实验的难度，可广泛用于心肌梗死方面的实验研究，在保证结果不受影响的情况下，加速实验进程。