刘纯丹1 姜波2 邵天波3 黄琛4
（1.红河州石屏县人民医院检验科，云南石屏 662200)
(2 3 4昆明医科大学第一附属医院，云南昆明 650000）
【摘要】目的 分析移植中心患者深部真菌感染常见种类以及药物敏感实验情况。方法 回顾性分析2019年7月至2020年7月移植中心送检深部真菌感染标本143例，并统计常用抗真菌药物敏感情况。结果 143例致病菌株中以白色假丝酵母菌最多占65.7%，光滑假丝酵母菌占22.3%，热带假丝酵母菌占8.5%，克柔假丝酵母菌占3.5%。药敏试验结果显示白色假丝酵母菌对5种抗真菌药物均较为敏感；光滑假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶，两性霉素B敏感性较高；克柔假丝酵母菌对氟康唑以外的4种抗真菌药物较为敏感。结论 移植中心患者深部念珠菌感染以白色假丝酵母菌为主，不同种类念珠菌对抗真菌药物敏感性有差异（P＜0.05），因此根据药敏结果合理使用抗真菌药物至关重要。
【关键词】真菌感染；药敏实验；药物敏感性；药物耐药性
[Abstract] Objective To analyze the common types of deep fungal infection and drug sensitivity test of patients in transplantation center. Methods from July 2019 to July 2020, 143 cases of deep fungal infection specimens were retrospectively analyzed, and the susceptibility of commonly used antifungal drugs was counted. Results Candida albicans accounted for 65.7%, Candida glabrata accounted for 22.3%, Candida tropicalis accounted for 8.5%, and Candida krusei accounted for 3.5%. The results of drug sensitivity test showed that Candida albicans was sensitive to 5 kinds of antifungal drugs; Candida glabrata was more sensitive to 5-fluorocytosine and amphotericin B; Candida krusei was more sensitive to four kinds of antifungal drugs except fluconazole. Conclusion Candida albicans is the main pathogen of deep Candida infection in transplant center. The sensitivity of different kinds of Candida to antifungal drugs is different (P < 0.05). Therefore, it is very important to use antifungal drugs reasonably according to the results of drug sensitivity.
[Key words] fungal infection; drug sensitivity test; drug sensitivity; drug resistance
近年来，随着广谱抗生素、免疫抑制剂的应用以及器官移植侵入性诊疗技术的开展，条件致病性真菌感染日益增多【1】。加强深部真菌感染的控制及耐药性检测，有效防治深部真菌感染及提高治愈率已成为医学领域中的重要问题，为了解移植中心患者深部真菌的分布及及耐药情况，本文对143例深部真菌感染患者标本进行分析，具体情况如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源 收集2019年7月至2020年7月移植中心送检住院患者深部真菌标本2459例，其中检出深部念珠菌感染的病例143株。
1.2 仪器和试剂 采用梅里埃公司的仪器及ATB药敏卡，药敏卡内有5种抗真菌药分别为5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑；分离培养基为沙保弱培养基（郑州安图生物公司），念珠菌显色培养基。
1.3 方法 采用常规深部真菌培养方法将标本转种至沙保弱培养基于35℃下培养，7天若培养基内未见真菌生长，提示阴性；若生长将得到的真菌涂片、染色、镜检提示为酵母样真菌后，再将该菌落接种于真菌显色培养基进行颜色鉴别，白色假丝酵母菌为绿色、光滑假丝酵母菌为紫色、热带假丝酵母菌为铁蓝色、克柔假丝酵母菌为粉色（模糊有微毛）【2】；不显色菌落采用YST真菌鉴定卡上仪器鉴定。制备菌液为2.0麦氏单位的混悬液，分别做真菌鉴定卡YST和药敏试验板ATB（用微量移液器吸取已制备好的菌液20ul加入至ATB药敏培养液充分混匀后分别吸取135ul至药敏反应孔内），孵育24至48小时观察记录药敏情况。
1.4 统计学处理 采用SPSS17.0统计分析软件对资料数据进行统计处理。计数资料采用百分数表示，组间比较采用x2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 移植中心患者深部真菌感染的种类情况 143例深部真菌感染中主要为白色假丝酵母菌高达65.7%，其次光滑假丝酵母菌，热带假丝酵母菌，克柔假丝酵母菌。见表1。
表1 移植中心患者深部真菌感染的种类情况
真菌种类 菌株数 构成比（%）
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2.2 移植中心患者深部真菌感染常见病原菌的药敏情况 白色假丝酵母菌对5种抗真菌药物均较为敏感，敏感性大于90%，光滑假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、伏立康唑较为敏感；克柔假丝酵母菌对氟康唑以外的4种抗真菌药物较为敏感；各种念珠菌对不同抗真菌药物的敏感性差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。
表2移植中心患者深部真菌感染常见真菌对药物敏感性s（%）
抗真菌药物 判读 白色假丝酵母菌 光滑假丝酵母菌 热带假丝酵母菌 克柔假丝酵母菌
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伏立康唑 ≤0.12 91(96.8) 27(84.4) 10(83.3) 3(60.0)
备注：ND为无敏感性判读标准，S为敏感
3 结论
目前，随着真菌感染率的升高，抗真菌药物应用广泛，导致真菌严重耐药，如何合理正确的选择抗真菌药物是临床治疗的关键【3】。本文显示移植中心患者深部真菌感染常见的4种真菌为白色假丝酵母菌最多占65.7%，光滑假丝酵母菌占22.3%，热带假丝酵母菌占8.5%，克柔假丝酵母菌占3.5%，这与文献报道的主要真菌感染类型大致相同。本文药敏分析显示，5-氟胞嘧啶、伊曲康唑需然无敏感性判读标准但143例患者深部真菌药敏试验中所检测MIC值，5-氟胞嘧啶均为最低药物浓度4ug/ml,可示为对这143株念珠菌均敏感。两性霉素B、氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑均对念珠菌有不同程度的杀灭作用，各种念珠菌对不同抗真菌药物敏感性有差异。白色假丝酵母菌对5种抗真菌药物均较为敏感，敏感性均大于90%，对两性霉素和氟胞嘧啶的敏感性性达100%，但由于安全性不及唑类抗真菌药物，两性霉素毒副作用大常用低剂量治疗，氟胞嘧啶主要用于酵母样菌及真菌所致的系统性真菌感染的治疗是唯 一作用于核酸合成的抗真菌药物，该药的敏感株治疗期间易继发产生耐药【4】。光滑假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、伏立康唑较为敏感。热带假丝酵母菌对氟康唑的敏感性为66.7%，耐药性已达30%以上。克柔假丝酵母菌对氟康唑以外的4种抗真菌药物较为敏感，伏立康唑对克柔假丝酵母菌的敏感性为60%，对其余念珠菌的敏感性均高于83%，其活性强，安全性强于两性霉素B和氟胞嘧啶，可作为抗深部真菌感染的首选用药。
综上所述，对于临床诊断或拟诊为真菌感染的患者可早期经验性治疗，首选对常见真菌敏感性普遍较高的咪唑类抗真菌药物如伏立康唑及氟康唑等，毒性小使用安全的抗真菌药物进行治疗。目前真菌感染的逐年上升，临床分离的致病性真菌随着广谱抗生素的大量应用，免疫抑制剂的治疗内源性真菌繁殖而导致感染等均是真菌感染的高位因素，针对长期应用抗生素、糖皮质激素、免疫抑制及放化疗患者一旦怀疑有深部真菌感染的存在，应及时采集标本送检微生物实验室进行鉴定和药敏试验，因抗真菌药物的疗效不仅取决于该药的抗菌谱同时也取决于患者体内所分离出各种真菌对药物的敏感性及用药剂量差异，因此要根据药敏结果选择合适治疗方案，从而有效控制念珠菌感染。
参考文献
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