毛易捷 史伟峰
常州市第一人民医院 江苏省常州市 213000
【摘要】目的：主要了解荧光定量PCR技术应用到临床微生物检测所产生的具体价值。方法：随机选择进入到我院开展治疗的80例患者作为本次实验对象，通过应用荧光定量PCR技术来做好临床微生物检测，了解具体的临床微生物的实际情况。结果：荧光定量PCR技术临床检查效果非常好，数据准确性高，能够作为临床检测技术应用。结论：荧光定量PCR技术可以实现临床微生物检测，实际应用价值比较高。
【关键词】PCR技术；临床微生物；检测；应用
荧光定量PCR技术为当前应用比较普遍的一种核算临床微生物检查技术，并且已经被广泛的使用到临床实践中，成为我国医学检测中极为重要的技术，发挥着重要的作用。随着技术的发展，目前已经延伸出很多的定量PCR技术，能够利用始点定量和荧光检测系统来进行荧光强度检测，其主要的优势就是检测效果比较高、数据精确度高、速度快等等。荧光定量PCR技术不仅可以进行基因的检测，同时还能够及时发现患者所存在的疾病基因问题，当前已经被大量的应用到人类和动物疾病快速检测中，可以实现基因分形、早期诊断、定量分析等方面的效果，具体包含有绝对定量和相对定量两种方式来做好检测，虽然这些技术都有各自的优缺点，但是检测方式方面有着极大的相似之处。从实际情况分析，检测方法的选择应该根据实际情况确定，保证其符合检测的要求，能够达到检测精度的标准，为整个病情的判定提供良好的基础[1]。通过应用该检测技术，能够保证检测效果合格，且应该根据具体的检测指标来从特异性、灵敏度等方面做出多个方面的分析，具体就是进行特异性探针和引物方面的设计确定。从当前的实际情况分析，当前的荧光定量PCR技术应用病菌、真菌、细菌、寄生虫等检测效果是非常好的，临床实践应用价值比较高。本次研究以我院接收的80例患者为研究对象，分析荧光定量PCR技术应用到临床微生物检测的价值，能够发挥出该技术的作用，从而可以提升检测治疗的效果，具体的试验过程和结果如下所示：
1.资料与方法
1.1一般资料
选择进入到我院参与治疗的患者80例，其中男47例，女33例，年龄在19～73岁；泌尿系感染11例，细菌性食物中毒7例，上呼吸道感染30例，流行性感冒26例，慢性阻塞性肺病6例；在本次患者检测的样本中，总计有粪便52份，脓液28份。
1.2一般方法
对于本次实验的全部患者开展荧光定量PCR技术的检测，选取相应的样本1.5ml增菌液滴入1.5ml的灭菌Epp管中，然后对样本进行均匀的震荡处理，并且将其放入到离心机内进行充分搅拌混合2分钟左右。清洗结束之后将剩余残渣直接加入到DNA提取液，然后将其放入到离心机中离心在5分钟左右，并且观察PCR的反应，利用PCR检测仪能够实现扩增方面的检查，并且需要加入一定量的融合液材料。在机器确定相应的技术参数，同时要按照操作说明书来进行操作和判断，微生物细菌来进行分离之后，然后就是能够检测好特异性方面。经过阳性的检测之后，能够致阿姐稀释处理，根据相应的测试程序来确定PCR的敏感性。
2.结果
52份粪便中，沙门氏菌有16例，阳性率为30.8%。肠出血大肠杆菌有2例，阳性率为3.8%，溶血性杆菌9例，阳性率为17.3%；在脓液标本的28份中，金黄色的葡萄杆菌有3例，阳性率为10.7%。对于上述几个细菌试样的5株样本进行分析，然后确定其特异性，发现检测已经达到100%。同时能够确定了该检测样本的PCR敏感度方面，发现该次检测之下的核算样本作为最低核算检测的效果，能够达到检测精度的标准。
3.讨论
3．1PcR原理
传统的PCR技术在应用中只能是定型分析，在具体的操作环节，产物扩增发现之后能够了解确定凝胶电泳之后的片段。定量PCR在进行试验反应之后能够直接加入荧光集团，然后利用累积荧光信号的反应强度，就能够实现初始模板的定量分析，并且能够实现未知模板的分析和应用。与此同时，在具体的荧光污染标记物和探针记录的过程中应用PCR延伸之下所形成的荧光物质，循环的过程中能够让信号强度得以释放，然后能够利用仪器设备来检测，并且可以做好初始模板的计算与分析。从这个方面分析发现，在荧光定量PCR检测环节，应该进行连续检测，然后就能够确定模板最初量。
3.2荧光定量
PCR技术应用到病毒检测环节，当前应用的比较广泛的方式就是荧光定量PCR技术，能够根据检测的标准确定病毒的种类，同时也能够实现多种复杂性的病毒检测，效果是非常好的。在进行B型肝炎检测环节，是通过多种混合样本中进行检测作为基础，能够实现混合基因的检测与确定，最终的结果是能够将各种好女孩的基因样本全部检测出来，此时就说明通过应用荧光定量PCR技术可以达到检测的精度标准要求。仅有比较少部分的手足口病患者在进行检测的过程中，就能够说明荧光定量PCR技术检测的精度是非常高的。手足口病在检测环节，采用传统的ESISA法和荧光定量PCR技术联合的方式进行检测，提升检验效果[2]。荧光定量PCR技术能够保证检测能够迅速完成，且能够在短时间内可以快速的检测确定，所以能够大幅提升手足口病检测效果，在临床中有着极高的应用价值。
3.2荧光定量
PCR技术应用到细菌检测中有着非常好的效果，并且技术在逐步的成熟，可以充分发挥出荧光定量PCR技术的优势，可以提升医学诊断效果，基于TaqMan荧光定量PCR技术应用之下可以提升细菌检验效果，通过两组技术联合应用的方式能够保证检测精度在90%以上，有时会保证特异性达到100%。与传统基因检测方式对比分析，这种方式的总体效果是很高的，治疗效果也非常好。荧光定量PCR技术的沙门氏菌的ompf基因，可以快速确定不同病因方式机理，能够提升特异性，从而可以提升检测速度，保证检测效果可以应用到临床中[3]。
3.3荧光定量
PCR技术在进行真菌检测有着极好的效果，且荧光定量PCR技术可以做好真菌检测，结合具体的基因序列来进行荧光定量PCR技术的应用检测，总结出具体的特异性方面，发现其特异性能够达到100%，从而可以提升检测的结果精度水平。
3.4荧光定量
PCR技术在进行人类寄生虫病因检测中能够产生比较好的效果，在实践中通过应用荧光定量PCR技术来实现内部的质量管理和控制，然后进行52份粪便内的微孢子进行检测，然后是进行人类治病的鞭毛虫A型和B型实施必要的荧光定量检测与分析，可以在临床中确定具体的流行性病因，使得临床检查更具效果。在进行羊水样板中刚地弓形检测中，通过使用RE的特异性和敏感性使得整体的检测效果更好。
4.结论
荧光定量PCR技术应用到临床检测中有着非常好的效果，并且已经被广泛的使用到各个医学领域内，发挥着重要的作用。在今后的发展中，需要进一步研究先进技术，可以提升荧光定量PCR技术的水平，展现出该技术的优势，提升临床检测的效果，为人类的临床治疗起到一定的促进作用，最终可以促进医学技术的发展和进步。
参考文献：
[1]王宁红,程艳君.流感病毒检测中细胞培养法与实时荧光定量PCR法效果比较[J].家庭医药,2019,(9).89.
[2]牛犇,洪斌,穆丽丽,等.荧光定量PCR在预测微生物学中的应用[J].食品工业科技,2019,(5).275-282.
[3]李玲,杨丽玮.病原微生物检验中分子生物学技术的应用效果分析[J].临床检验杂志（电子版）,2019,(3).173.
[4]江海平.荧光定量PCR技术在临床微生物检测中的应用探讨[J].医药前沿,2017,(15).162-163.
[5]周丽民,雷永良,王小光,等.实时荧光定量PCR技术在致病菌检测中的应用[J].标记免疫分析与临床,2012,(5).296-299.