郭武辉 谢中斌 魏歆林 张玲 徐虎 席艳
陕西省榆林市第二医院 检验科， 陕西 榆林 719000
摘要：据联合国艾滋病规划署调查显示：从2013年末到2018年末艾滋病人数由3430万人增加到3790万人，携带者的数量呈现逐年上升的趋势，而我国的艾滋病例从2013年的80.9万人增至2018年末的125万人，截止到2019年末，全国报告存活的感染者有95.89万人。针对目前艾滋病的传播进行研究，主要表现为性传播，其他传播的途径已经基本阻断或是得到了有效的控制。如何早期诊断并发现人类免疫缺陷病毒的感染成为了当前亟待解决的问题。
关键词：化学发光法；免疫印迹；人类免疫缺陷病毒
引言 当前实验室检查表明HIV抗体检测应用化学发光法实现初步筛查，具有灵敏度和特异度高的特点[1]，且安全快速，临床诊断益处较大，本文就针对检查的1例肾肿瘤患者进行探讨，其初步筛查结果为阳性，而其他的检测结果显示为阴性，具体报告如下。
1.病例资料
患者为男性，57岁，2020年1月在榆林市第一医院绥德院区就诊，就诊原因为左下腹疼痛。B超显示：左肾占位性病变，CT显示：左肾肿瘤。于2020年1月19日前来我院就诊，HIV抗体显示为11.05ndex（阳性），梅毒抗体显示为1.59Index（弱阳性）余HCV和乙肝两对半均呈现为阴性，而ELISA法检测HIV为阴性，样本送榆林市疾控中心进行HIV确证，结果为阴性。于2020年3月8日来我院入院治疗，无不良嗜好，既往史健康，且无遗传病史，无手术、输血等情况发生，入院检查无明显异常，进行传染病8项筛查，结果显示：梅毒抗体1.48Index（弱阳性），快速血浆反应试验阴性，艾滋病抗体9.87Index（阳性），两对半与丙肝抗体均呈阴性。2020年3月12号进行了腹腔镜下肿瘤根治手术，手术后病理报告显示：患者左肾中级透明细胞癌，ISUN分级为2级。手术后患者状态呈现良好。
2.试剂、仪器与样本
初步筛查试剂：ELISA法选择潍坊三维试剂、北京万泰试剂，化学发光法选择西门子诊断有限公司进口试剂，胶体金法选择天津中新科炬HIV1+2抗体检测试剂，而其他化学发光法则选择罗氏电化学发光试剂和希森美康化学发光试剂。确诊试剂选择新加坡MP生物医学亚太私人有限公司所生产的MP试剂（HIV1+2型抗体诊断试剂盒），所用试剂均经我国食品药品监督管理注册批准，批检合格，且在有效期内。
仪器：选择西门子化学发光仪，型号为CentaurXP；罗氏e601电化学发光仪；希森美康化学发光仪，型号为HISCL5000；帝肯全自动酶免分析仪；通用的离心机选择湘仪牌（型号：TDZ5-WS）；高速离心机选择飞鸽牌（型号：TGL-16C）；HIV核酸检测外送迪安诊断检测（型号：Cobas Ampliprep/ Cobas Taqman全自动病毒载量分析系统）。
样本：选择江苏康健橙色促凝管，采集5ml样本，血凝固后用3000r/分相对离心力离心15min，用于HIV抗体检测。用江苏康健紫色管采集样本2ml血液，分离血浆后送到第三方实验室检测HIV-RNA。
所有化学发光均应用厂家配套的质控品。
3.结果
3.1 HIV抗体初筛检测
西门子化学发光法两对半和丙肝抗体均为阴性，梅毒抗体弱阳性，HIV抗体为阳性。应用其他化学发光或ELISA法复检，发现结果均呈阴性。将原血清置于另一台同型号西门子化学发光仪检测，HIV抗体阳性。
3.2 HIV抗体验证检测
重取标本用西门子同一批次化学发光试剂盒复测，结果为阳性，与初测结果表现一致。应用潍坊3V、北京万泰酶免和希森美康与罗氏发光法复测，检测结果均为阴性。确证试验：本院艾滋病确证实验室用免疫印迹试验结果为阴性，杭州迪安第三方实验室HIV-RNA检测为阴性。
3.3 特殊蛋白、自身抗体、肿瘤标记物、高速离心后、56℃30分钟水浴灭活后检测。
类风湿因子（RF）检测，结果为阴性。免疫球蛋白IgG、IgA、IgM、IgE、补体C3和C4、免疫球蛋白κ和λ轻链结果均无异常。抗核抗体谱全阴性，肿瘤标记物全部正常。高速离心后直接检测，高速离心后室温分别静置4小时、8小时、12小时、24小时后检测结果均为阳性。56℃30分钟水浴灭活后检测均为阳性。
4.讨论
HIV抗体检测包括初筛试验和确认试验，初步筛查后呈现阳性反应，再次经过高异性的确认试验。本次研究中初步筛查选择化学发光法，应用2次冲洗的抗原夹心免疫分析法，试剂中的抗原将与患者标本中的抗体桥连。应用固相试剂用来捕获标本中的抗HIV-1/2 抗体辅助标记试剂与标记试剂主要检测标本中结合在固相上的抗HIV-1/2抗体[2]。临床中应用化学发光法出现假阳性的病例有相关报道，但是在经过集中筛查后都会呈现为阳性，确诊试验的结果显示阴性，而本次试验化学发光检验的结果呈现为阳性[3]，且反应性极强，检查的值较高，而其余检测结果均呈现为阴性，结果有分歧后又应用其他检测试剂检验，结果均呈现为阴性，而后应用免疫印迹试验作和HIV核酸检测确认实验的结果也是阴性。导致血清免疫学检测假阳性的常见原因有以下几点：标本的溶血、标本微生物污染、脂血、血清分离效果不佳、仪器的误差、黄疸、标本离心时间短，工作人员操作误差等[4]，干扰物：嗜异性抗体、交叉反应物质、补体、各种自身抗体的影响[5]。
此患者在入院之前没有用过鼠单克隆抗体制剂，因而产生人抗鼠抗体的可能性很小，基本上排除了人抗鼠抗体对试剂中鼠源性抗体的干扰。经数次临床交流确认该患者近一年来未服用补充营养和增强抵抗力的保健品和药物，基本排除生物素干扰。有报道称病毒、寄生虫、分枝杆菌感染可以导致假阳性，有感染HIV性伴侣、重度吸烟等不良嗜好、接种流感疫苗等可以提高假阳性概率[6]。经排查其妻子HIV抗体阴性，且无第二性伴侣，排除微生物干扰。样本状态和人员操作均无异常。
值得注意的是，该患者曾有数年饲养猫和狗等宠物的经历，且经常与之进行亲密接触，可能让导致体内产生嗜异性抗体。此例患者经现有可执行的检测方法排除后，最大可能性是患者体内的嗜异性抗体与HIV试剂包被用抗原及标记用抗原制备过程中纯度（杂蛋白）及片段选取的特异性有同源性（如选取片段的同源性，在保证可检出各基因型及亚型的前提下，选择同源性较好的片段），由于抗体和异质抗原间的交叉反应可能发生多种非特异性吸附作用，导致假阳性出现［6］。
临床中有很多其他肿瘤患者，也有类似情况发生，所以需要试剂生产厂家不断提高试剂的质量，减少假阳性结果的出现。医学检验从业人员还需要严格按照实验室标准操作规程操作，严格执行传染病复查流程，保证结果准确性，避免医疗纠纷。
参考文献：
[1]黄义强.石蒜碱对肾癌细胞786-O、ACHN的作用及机制初探[D].广东:南方医科大学,2016.
[2]郭嘉伟.髓过氧化物酶响应性纳米粒的构建及在炎症成像和治疗中的应用研究[D].中国人民解放军陆军军医大学;第三军医大学,2016.
[3]徐励,阎红琳,袁静萍, 等.EGFR在假腺样黏液型肾上腺皮质腺肿瘤中的免疫组织化学表达及其病理诊断意义[J].中国组织化学与细胞化学杂志,2019,28(4):364-368.
[4]赵一诺,王小桐,夏秋媛, 等.X染色体内易位/TFE3融合基因相关性肾细胞癌的临床病理分析[J].中华病理学杂志,2018,47(8):574-579.
[5]赵丽娜,袁静萍,曾智, 等.2例伴有假腺样结构的黏液样肾上腺皮质腺瘤临床病理观察[J].临床与病理杂志,2019,39(11):2554-2559.
[6]任祖宁，彭劼.人类免疫缺陷病毒筛查试验假阳性的原因分析[J].中华传染病杂志.2019:37（2）125.
通讯作者：谢中斌 1972年8月，男，汉族，籍贯：榆林市，榆林市第二医院检验科主任，主任技师，研究生学历，主要研究方向：免疫、细菌、生化；