于宁
航天中心医院 北京 100039
【摘要】目的 研究细胞块石蜡包埋及免疫细胞化学染色技术在胸腹水细胞病理学诊断中的应用价值。方法 选取2018年4月至2020年4月在我院接受治疗的40例胸腹水患者作为主要研究对象，获取40例患者的细胞标本，离心涂片、细胞块切片HE染色，并进行免疫细胞化学染色，行选择性标记，对比常规涂片、细胞块石蜡包埋、免疫细胞化学染色技术的诊断结果。结果 经比较发现，常规细胞涂片的厚度较大，背景清晰度差；离心沉渣包埋切片细胞相对较多，且较为集中，背景颇为清晰，染色鲜艳；免疫细胞化学染色技术的染色效果好，定位准确，阳性率高。结论 运用细胞块石蜡包埋及免疫细胞化学染色技术可提高胸腹水细胞病理诊断的准确率，临床上可为肿瘤的鉴别诊断、确定细胞来源提供重要的参考价值，值得推广和应用。
【关键词】细胞块石蜡包埋；免疫细胞化学染色技术；胸腹水；细胞病理学诊断；诊断价值
随着人们生活方式、饮食方式和行为习惯的改变，恶性肿瘤的临床发病率不断提高，且恶性肿瘤的患病人群呈现出年轻化趋势。由于对于不同肿瘤类型的具体病因和发病机制尚未明确，一些肿瘤患者早期缺乏典型的临床症状，因此，及早发现、及早诊断、及早治疗成为延长恶性肿瘤患者生存时间、改善生存质量的关键。胸腹水是肿瘤性疾病的常见体征，多数患者是因为出现了胸腹水症状才到医院就诊，而胸腹水细胞学检查也是临床上最为常用的一种诊断方法[1-3]。本研究共选取2018年4月至2020年4月在我院接受治疗的40例胸腹水患者，旨在深入研究细胞块石蜡包埋及免疫细胞化学染色技术在胸腹水细胞病理学诊断中的应用价值，详述如下。
1资料与方法
1.1一般资料
本次研究开展的时间段是2018年4月至2020年4月，选取在该时间段内于我院就诊的40例胸腹水患者。40例胸腹水患者中，男性22例，女性18例；年龄最大者82岁，最小者34岁，平均年龄（59.62±2.38）岁；胸水24例，腹水16例。40例患者中，有11例患者临床明确有器官占位，29例患者的胸腹水原因有待进一步检查。
1.2研究方法
收集样本后，选择免疫组化试剂，使用福州迈新生物技术开发有限公司的即用型快捷免疫组化?MaxVision?tm?HRP试剂盒及DAB显色剂，根据说明书上的要求进行实验步骤的操作。
收集患者的胸腹水，取50~300ml，离心，每分钟2000r，离心10分钟。离心后去除上清液，并取少量沉淀做细胞涂片。沉淀中加入消化液体，加至30ml，震荡2分钟，而后离心，每分钟2000r，离心10分钟。离心后取上层清液，加入10%福尔马林，共加入50ml，震荡10分钟，离心，每分钟2000r，离心10分钟。离心后放置2h，将福尔马林液体去除，使用纸包裹沉淀后脱水。常规石蜡包埋、切片，用苏木精—伊红染色，用树胶封固。使用抗体行免疫细胞化学染色，选择的抗体包括CK、CK7、CK20、CDX-2、MC，胸水患者增加TTF-1，腹水患者增加CA125，DAB显色。
2结果
经比较胸腹水常规涂片和细胞块石蜡包埋切片的诊断结果，结果显示，胸腹水涂片诊断鳞癌3例，所占比例为7.50%；腺癌22例，所占比例为55.0%，可疑癌7例，所占比例为17.50%；增生的间皮8例，所占比例为20.0%。细胞块切片，鳞癌3例，所占比例为7.50%；腺癌24例，所占比例为60.0%，可疑癌0例，所占比例为0%；增生的间皮8例，所占比例为32.50%。
常规涂片的厚度更大，背景清晰度不佳；而苏木精—伊红染色的色彩更鲜艳，背景清晰度更高，收集的细胞较常规涂片更多，且具备一定的组织结构。不同抗体表达的阳性部位和组织学部位是相同的。且阳性颗粒为棕黄色。
3讨论
胸腹水是临床上常见的肿瘤体征，临床上需要在胸腹水中确定脱落的癌细胞，并确定是否有肿瘤性病变，以明确肿瘤病灶的性质进行明确。胸腹水细胞学检查具有操作简单、创伤性小等特征，通过对细胞大小、形态和结构变化的观察，对肿瘤性质进行鉴别和诊断[4-5]。对于临床上送检的胸腹水标本，常用直接离心涂片进行诊断，但实际应用中，直接涂片存在细胞重叠、结构不清、细胞量少等问题，对于肿瘤细胞和增生间皮细胞的鉴别有较大难度，并不能准确的判断肿瘤细胞的起源。胸腹水细胞块是一种无创的标本收集方式，切片背景清晰度高，且细胞结构较为完整，细胞块能够长久保存并反复切片，还可以行免疫组化染色，并进一步明确细胞的类型和来源，从而为临床诊断和治疗提供更加客观和真实的依据。
本研究结果显示，常规细胞涂片的厚度较大，背景清晰度差。诊断鳞癌占比7.50%，腺癌占比55.0%，可疑癌占比17.50%，增生的间皮占比20.0%。细胞块切片诊断鳞癌占比7.50%，腺癌占比60.0%，可疑癌占比为0，增生的间皮占比是32.50%。离心沉渣包埋切片细胞相对较多，且较为集中，背景颇为清晰，染色鲜艳；免疫细胞化学染色技术的染色效果好，定位准确，阳性率高。细胞涂片诊断恶性胸腹水，涂片相对较厚，且存在大量的红细胞和炎性渗出、黏液，细胞结构是重叠的，且背景清晰度相对较差，诊断敏感度最高只能达到78%，影响诊断结果的准确性，增加了诊断工作的难度。而细胞块石蜡包埋切片法所收集的有核细胞相对较多，细胞结构更加清晰，将细胞块石蜡包埋切片与常规涂片相结合，能够大大提高细胞学的阳性检出率。并且，使用细胞块进行免疫细胞化学不染色，是可以做连续切片的，多种抗体组织在一起，或者是比较某一种特定的细胞，这可以满足临床诊断的需求，还可以对组织的来源进行准确鉴别。不同抗体表达不同部位的恶性肿瘤，CK7和TTF-1阳性，主要提示肿瘤细胞是来源于肺部，CK7和CA125阳性提示肿瘤细胞是来源于卵巢，CK20和CDX-2提示肿瘤细胞是来源于胃肠道[6-7]。但抗体组织的特异性并不是完全绝对的，而将多种抗体相结合进行免疫细胞化学染色，同时再设立对照，这样可以弥补一些抗体表达不明确的缺陷，从而提高诊断的科学性和准确性。
综上所述，胸腹水细胞病理诊断中运用细胞块石蜡包埋及免疫细胞化学染色技术可提高诊断的准确率，以此为肿瘤性质的鉴别诊断以及细胞来源的确定提供重要的参考依据，因此，值得进一步推广和应用。
参考文献：
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[7]张椽,陈志涛,邹远芹,等.胸腹水细胞块改良法在免疫组化中的应用[J].甘肃医药,2018,37(12):1059-1061.