徐勇存1，邬亮1，张平1，陈涛2，金鑫雷2
（1.浙江天丰生物科学有限公司检测中心，2.浙江天丰生物科学研究院，浙江 金华 321025）
摘要：[方法]采用正相高效液相色谱法，以正己烷-异丙醇溶液为流动相，使用Chiralcel OD-H手性柱和二极管阵列检测器，在240nm波长下对噁唑酰草胺及其S-对映体进行手性分离和检测。[结果]经检测噁唑酰草胺质量分数为95.1%。在此分析方法下具有良好的线性关系，线性方程为y = 14676x - 53.158，相关系数R2=0.9997。[结论] 该方法具有操作简便、线性关系好、精密度高、回收率高、分离效果好的特点，适用于噁唑酰草胺R-/S-对映体的分离和定量分析。
关键词：噁唑酰草胺；正相；手性分离
噁唑酰草胺（metamifop）是由韩国化工技术研究院开发的芳氧苯氧丙酸酯类除草剂， 化学名称为?(R)-2-[4-[(6-氯-2-苯并)氧]苯氧基]-N-(2-氟苯基-N-甲基丙酰胺)，其具有光学活性。噁唑酰草胺对水稻安全，对稗草、马唐、千金子、牛筋草等一年生禾本科杂草防效极好，具有高效、低毒、低残留等特点。目前国内噁唑酰草胺R-/S-对映体的分离和测定方法未见报道。本文采用正相高效液相色谱法完成了噁唑酰草胺R-/S-对映体在Chiralcel OD-H色谱柱上的手性分离。该方法操作快速、准确、简便，分离效果好，准确度和精密度均能达到定量分析的要求，适用于噁唑酰草胺R-/S-对映体的分离和定量检测。
1实验部分
1.1试剂
正己烷：色谱纯；异丙醇：色谱纯；噁唑酰草胺标样采购自沈阳化工研究院其质量分数为98.8；噁唑酰草胺原药由浙江天丰生物科学研究院合成；噁唑酰草胺（R,S）：噁唑酰草胺总酯（R-+S-对映体）质量分数98.1%，R-对映体：S-对映体≈1:1，浙江省化工研究院提供。
1.2 仪器设备
高效液相色谱仪LC1260配有二极管阵列（DAD）检测器、4元梯度系统、自动进样器和脱气机。250mm×4.6mm（i.d.）不锈钢柱，Chiralcel OD-H，5μm，Daicel chemical industries Ltd。
1.3 高效液相色谱条件
流动相：Ψ（正己烷+异丙醇）=95+5（V/V）。流量：1.0mL/min。柱温：38℃。检测器波长：254nm。进样体积：5μL。保留时间(min)：噁唑酰草胺S-对映体约16.5 噁唑酰草胺约18.6 。(见图1、图2)。
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图1—原药高效液相色谱图 图2 — 噁唑酰草胺（R,S）高效液相色谱图
1.4测定步骤
1.4.1 标样溶液的配制
称取噁唑酰草胺标样0.025g (精确至0.00002g)， 置于50mL容量瓶中，加入流动相溶解，置此容量瓶于超声波浴槽中脱气10min，取出降至室温后，用流动相定容，摇匀，过滤器过滤，此为标样溶液。
1.4.2 试样溶液的配制
称取含噁唑酰草胺0.025g 的试样(精确至0.00002g)，置于50mL容量瓶中，加入流动相溶解，置此容量瓶于超声波浴槽中脱气10min，取出降至室温后，用流动相定容，摇匀，过滤器过滤，此为试样溶液。
1.4.3 测定
在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相连两针的峰面积变化小于1.2%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。
1.4.4 计算
将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中噁唑酰草胺的峰面积分别进行平均。噁唑酰草胺的质量分数X1(%)，按下式计算：
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式中：r1 —标样溶液中噁唑酰草胺峰面积的平均值；r2 —试样溶液中噁唑酰草胺峰面积的平均值；m1— 标样溶液中噁唑酰草胺标样的质量，g；m2— 试样的质量，g；p— 噁唑酰草胺标样的质量分数，%。
2、结果和讨论
2.1 色谱条件的选择
2.1.1检测波长的确定：配制噁唑酰草胺溶液，用二极管阵列（DAD）检测器进行光谱扫描，在240nm波长处有较大吸收，选择此波长为检测波长。
2.1.2色谱柱及流动相的选择：选用Nucleosil Chiral-2、Ultimate Amy-S、Chiralcel OD-H 3种色谱柱对噁唑酰草胺R-/S-体进行分离试验，流动相选择正己烷-异丙醇、正己烷-四氢呋喃、石油醚-异丙醇等不同配比浓度，发现当流动相选用 Ψ（正己烷+异丙醇）=95+5（V/V）时，Chiralcel OD-H 色谱柱能将噁唑酰草胺R-/S-体及杂质得到很好的分离，峰形对称。
2.2 方法线性相关试验
配置标准曲线见表1。结果表明，在此分析条件下，噁唑酰草胺质量浓度在0.167-0.835mg/mL，与相应的噁唑酰草胺峰面积具有良好的线性关系。其线性回归方程为y = 14676x - 53.158，相关系数为：R2 = 0.9997。
表1 噁唑酰草胺线性方程的测定
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2.3 方法精密度的测定
按上述方法平行检测5次，测得噁唑酰草胺标准偏差为0.161，变异系数为0.169%，见表2。
表2 噁唑酰草胺精密度的测定
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2.4方法准确度的测定
在已知质量分数的噁唑酰草胺样品中，添加一定量的标准品，按上述条件进行分析，测得噁唑酰草胺的平均回收率为99.86%，见表3。
表3 噁唑酰草胺准确度的测定
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3、结论
试验结果表明，本方法具有线性关系好、精密度和准确度高、分离效果好的特点，适用于噁唑酰草胺R-/S-对映体的分离和定量分析。
参考文献:
[1]陈铁春,李国平,赵永辉,等.农药分析手册[M].北京:化学工业出版社,2013.
[2]沈建,陈杰.氰氟草酯原药的手性分离和测定[J].现代农药,2010,9(06):32-34.
[3]罗婧,彭文涛,金雅慧,王鸣华.噁唑酰草胺的高效液相色谱分析[J].农药,2009,48(03):191-192.
作者简介：徐勇存（1979-），男，浙江金华人，本科，工程师，研究方向为农药分析。
通讯作者：陈涛（1984-），男，浙江金华人，硕士，副院长，研究方向为农药剂型研发。