袁绍莉 徐宁宁
徐州生物工程职业技术学院 江苏 徐州 221006
摘要:目的:建立消癓合剂的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法对芍药苷进行含量测定。结果：芍药苷进样量在0.501～5.008μg之间，进样量与峰面积呈良好的线性关系（R2=0.9998），平均回收率达98.62%。结论：所建方法可行，专属性、重复性好，可用于消癓合剂的质量控制。
关键词：消癓合剂；芍药苷；含量测定；高效液相色谱法
消癓合剂由赤芍、紫草、丹参、桃仁、 三棱、莪术、蜈蚣、山楂等组成，具有凉血化瘀，散结止痛，消癥杀胚的功效。可作为甲氨蝶呤或米非司酮的辅助用药，用于未破损型消癓证属瘀热郁滞者，症见B超包块在3cm以下，血液检查 β-HCG 在2000U以下，停经腹痛，阴道流血者，无药物治疗的禁忌证的患者。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪（Agilent1260）、安捷伦 ZORBAXSB-C18(5μm，4.6×250mm)色谱柱，甲醇、磷酸为色谱纯，水为重蒸馏水；芍药苷（供含量测定用）购自中国药品生物制品检定所，消癓合剂和不含赤芍的阴性对照品由徐州生物工程职业技术学院实训室提供。
2 含量测定
2.1色谱条件的选择
（1）色谱柱的选择[1]：
选择使用 C18-ODS反相柱，填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；检测波长为230nm。
（2）流动相的选择
甲醇-0.1%磷酸溶液（30:70）,芍药苷峰出峰时间约在8分钟。理论塔板数以芍药苷峰计不低于3000，积分定量准确。因本品中杂质成分的洗脱较慢，一针供试品需一个小时左右才能分离完成，为提高试验效率，故将本品的流动相比例设置为：
.png)
（3）供试品溶液的制备
精密量取本品20ml，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，离心，精密量取上清液20ml，蒸干，残渣加50%甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加50%甲醇至刻度,摇匀,即得。
（4）对照品溶液的制备
取芍药苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml约含0.25mg的溶液，即得。
（5）阴性溶液的制备
取消癓合剂阴性样品（按本制剂处方比例及制备工艺，不加赤芍，制得不含赤芍的空白样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性溶液。
2.2方法学考察
2.2.1专属性试验
分别精密移取芍药苷对照溶液、样品溶液和空白溶液各10μl，分别测定，可见芍药苷峰在8.2分钟，对照溶液和供试溶液在相同位置有相同的吸收峰，空白溶液在相应位置无吸收，不影响芍药苷含量测定。
.png)
2.2.2 标准曲线的制备
取芍药苷对照品约13mg，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含0.2505mg的对照
溶液。分别精密移取上述对照溶液 2、6、10、14、20μl，注入液相色谱仪，按相同色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，芍药苷进样量为横坐标，绘制标准曲线。如下图：
.png)
并计算回归方程为 Y=1365.1 X -86.861，相关系数 R2=0.9998。表明芍药苷进样量在0.501～5.008μg 之间两者线性关系良好。数据见表1
.png)
2.2.3精密度试验
精密移取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，连续进样6次，分别测定其峰面积。峰面积见表2
.png)
结果表明系统精密度良好，符合规定。
2.2.4重复性考察
精密量取消癓合剂（批号：200201）6份，每份20ml，照含量测定项下供试液制备方法进行处理，测定结果见下表 3
.png)
以上 6 组数据表明该方法重复性良好。
2.2.5稳定性试验
精密吸取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪。分别于供试品放置 0、4、8、12、16、20、24 小时后测定一次。结果见表4
.png)
2.2.6加样回收率试验
取 已 知 芍 药 苷 含 量 的 样 品 ( 批号：200201 ，含量0.4939mg/ml)，精密量取 10ml，分别加入取样量中芍药苷含量的 50%、100%、150%的对照品溶液，并平行制备3份样品，按供试品溶液制备方法同法制得供试品溶液，测定，计算其回收率。结果见下表5
.png)
结果表明试验方法的回收率符合含量测定要求。
2.3.样品含量测定
依上述建立的定量分析方法，对三批样品进行含量测定，结果统计见下表6
.png)
3 分析与总结
（1）经过文献[2-7]查找及反复摸索，并进行了专属性、线性、精密度、重复性、稳定性试验考察，建立了芍药苷的含量测定方法。
（2）方法学考察结果表明：本品确定的芍药苷含量分析方法，重现性好，回收率高，方法准确可靠，可用于芍药苷含量测定。通过三批消癓合剂定量分析，芍药苷含量均高于 0.22mg/ml以上，据此确定了本制剂的含量标准。
参考文献
[1]《中华人民共和国药典》2015 版一部[S]北京：中国医药科技出版社.2015. [2]国家药品监督管理局标准（试行）WS-10227（ZD-0227）2002 丹莪妇康煎膏.
[3]胡敏敏，张敏娟.生津润燥合剂质量标准研究[J].安徽医药，2013,17（3）：391-393.
[4]国家药品监督管理局标准（试行）WS-11036（ZD-1036）-2002 三香跌打损伤酒.
[5]国家药品监督管理局标准（试行）WS-10983（ZD-0983）-2002 益康补元颗粒.
[6]冯筠,毛春芹. 三棱颗粒的质量标准研究[J]. 中成药,2007,29（5）：707-710.
[7]陈惠红,杨晓敏.健儿乐口服液质量标准的研究[J]. 海峡药学,2007,19（5）:50-51.