肖丽 范淑艳 程东京 徐冰洁
（滨州医学院 山东 滨州 256603）
摘要:目的 观察熟地黄玫瑰花颗粒对小鼠免疫功能的影响。方法 BALB/c 小鼠连续灌胃30天后检测碳廓清能力、迟发型变态反应、抗体生成细胞数、血清溶血素水平、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、NK 细胞活性及 ConA 诱导的脾淋巴细胞转化能力等免疫指标。结果 熟地黄玫瑰花颗粒对小鼠的脏/体比值、碳廓清能力无明显影响；对迟发型变态反应、抗体生成细胞数、HC50、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、ConA 诱导的小鼠淋巴细胞转化及 NK 细胞活性有显著作用。结论 熟地黄玫瑰花颗粒能增强小鼠免疫力。
关键词:玛咖粉；免疫功能；小鼠
机体的免疫力可分为特异性免疫与非特异性免疫两种。非特异性免疫与人体的组织结构和生理机能密切相关，是与生俱有的、能遗传给后代的一种免疫功能，比如中性粒细胞和单核巨噬细胞的吞噬功能［[[]康翼鹏,周颖,薛小燕,等.巨噬细胞吞噬中性粒细胞的协同抗炎作用[J].生理科学进展,2002,43（6）：455-458.]］。特异性免疫是机体后天受内外环境因素的刺激获得的免疫能力，主要包括抗原递呈、免疫细胞相互作用和免疫效应三个阶段［[[]张学光. 共刺激分子及其调节网络在特异性免疫应答中的作用及机制[J].中国免疫学杂志，2004，20（1）：26-32.]］。为探讨熟地黄玫瑰花颗粒对机体免疫系统的影响，我们从体液免疫、细胞免疫、NK 细胞活性及巨噬细胞吞噬能力等方面利用小鼠动物模型对其进行实验研究，以下为本研究结果报告。
1 材料与方法
1.1 样品 熟地黄玫瑰花颗粒（3.0g/袋，每日服用2袋。每袋含熟地黄1.2g、玫瑰花0.9g）
1.2 动物 选用 Balb/C小鼠，SPF级，北京维通利华实验动物有限公司提供，合格证号：11400700074604。实验动物使用许可证：SYXK（豫）2012-0005，屏障环境。四批小鼠，每批48只,体重18.00g～20.00g，每批分为四组，12只/组。
1.3 剂量选择 低、中、高剂量组分别为人体推荐量的5、10、30倍，即0.50 g/kg、1.00g/kg 和3.00 g/kg，分别加蒸馏水配制成相应浓度。经口给予，1次/日，灌胃量：20mL/kg，对照组灌胃等体积蒸馏水，各组30天后检测相应指标。
1.4 仪器与试剂 半自动生化分析仪；CASY快速细胞分析仪（德国Scharfe System公司）；多功能显微镜(日本Olympus 公司)；二氧化碳培养箱(美国 Revco 公司)；Multiskan 酶标仪(芬兰Labsystems 公司)；刀豆蛋白 A(ConA)、MTT(美国Sigma公司)；小牛血清(美国 Hyclone 公司)；RPMI 1640(美国 Gibco 公司)。
1.5 实验方法 脾脏/体重与胸腺/体重测定、迟发型变态反应(足跖增厚法）、碳廓清试验、血清溶血素（半数溶血值 HC50）的测定、抗体生成细胞检测（Jerne 改良载片法）、巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验（滴片法）、NK 细胞活性测定 (乳酸脱氢酶测定法)、ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验 (MTT 法)均按照《保健食品检验与评价技术规范)(2003 版)要求进行［[[]保健食品检验与评价技术规范.2003]］。
1.6 数据分析 用 SPSS 13.0统计软件录入数据进行单因素方差分析。检验水准 ɑ＝0.05，P＜0.05 有统计学意义。
2 结 果
2.1 对脏/体比值影响 各剂量组小鼠的脏/体比值与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05），提示本试验条件下熟地黄玫瑰花颗粒对小鼠脏/体比值未见明显作用, 见表 1。
.png)
2.2 碳廓清试验 各剂量组小鼠的吞噬指数 a 和对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05），表明本条件下熟地黄玫瑰花颗粒对小鼠碳廓清能力未见增强作用，该实验结果为阴性, 见表 2。
.png)
2.3 迟发型变态反应（DTH） 1.00g/kg 和3.00g/kg剂量组小鼠足跖肿胀度大于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），表明本条件下熟地黄玫瑰花颗粒对小鼠迟发型变态反应能力具有增强作用，本实验结果为阳性，见表 3。
.png)
2.4 对抗体生成细胞的影响 三个剂量组小鼠溶血空斑数均高于对照组，差异有统计学意义 （P<0.05，P<0.01）,表明本条件下熟地黄玫瑰花颗粒能促进小鼠抗体生成细胞的生成，本实验结果为阳性，见表 4。
.png)
2.5 对血清溶血素（半数溶血值 HC50）的影响 3.00g/kg剂量组小鼠 HC50 高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01），提示本试验条件下熟地黄玫瑰花颗粒对小鼠半数溶血值有增高作用，该项结果为阳性，见表 5。
.png)
2.6 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验 三个剂量组鸡红细胞吞噬率及吞噬指数和对照组比较，差异有统计学意义（P<0.01），表明本条件下熟地黄玫瑰花颗粒能够提升小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力，本次实验结果阳性，见表 6。
.png)
2.7 淋巴细胞转化实验 三个剂量组淋巴细胞增殖能力均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01），表明本条件下熟地黄玫瑰花颗粒能够增强 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力，本次实验结果阳性，见表 7。
.png)
2.8 NK细胞活性测定3.00g/kg剂量组小鼠 NK细胞活性高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），提示本试验条件下熟地黄玫瑰花颗粒对NK细胞活性有增强作用，该项实验结果为阳性，见表 8。
.png)
3 讨 论
试验结果本品对小鼠的脏/体比值、碳廓清能力无明显影响；对迟发型变态反应、抗体生成细胞数、HC50、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、ConA 诱导的小鼠淋巴细胞转化及 NK 细胞活性有显著作用。表明熟地黄玫瑰花颗粒能增强小鼠免疫力。
参考文献：
[1]康翼鹏,周颖,薛小燕,等.巨噬细胞吞噬中性粒细胞的协同抗炎作用[J].生理科学进展,2002,43（6）：455-458.
[2]张学光. 共刺激分子及其调节网络在特异性免疫应答中的作用及机制[J].中国免疫学杂志，2004，20（1）：26-32.
[3]保健食品检验与评价技术规范.2003