杨政
云南省医疗器械检验研究院 云南 昆明 650106
摘要：我们国家医疗器械有很多种类，其制造厂家的资质也参差不齐，因医疗器械质量问题引发的医疗事故屡见不鲜，对于医疗器械的质量与安全性必须予以足够的重视，对于医疗器械制造厂家的监管面也需要进一步加强。本文围绕医疗器械关于微生物检测方面的质控要求进行了系统性的分析，就其环境方面、实验室条件、仪器设备、操作人员、培养基要求，以及菌种、样品，还有记录等多方面的质量控制标准展开探讨，以使医疗器械在继续微生物检测时，能够得到一个准确可靠的结果，确保临床所用医疗器械的安全性。
关键词：医疗器械；微生物检测；质量控制
1微生物的概念
微生物指的是那些无法用人的肉眼进行分别的微小生物。微生物的数目十分庞大，具有结构简单、活性强的特点。在上世纪的中后期出现了一门独立学科，那就是微生物学检验，除需要应用显微技术，还要用到培养技术，其基本设备有显微镜跟培养皿等。
2.利用微生物学对医疗器械进行检验
2.1显微镜检查
显微镜通常用于观察那些无法用人眼分辨的、特别微小的对象。它包括两个组成部分：其一是用来观察一般结构、形态的光学显微镜；其二是用来观察新内部结构的电子显微镜。光学显微镜也有很多种类，除了一般的光学显微镜之外，还有荧光显微镜，采用微分干涉原理制成的差显微镜，还有暗视野显微镜等；电子显微镜也有透射显微镜跟扫描显微镜之分。
2.2染色标本的微生物学检查
对染色标本进行微生物学检查时可选用以下几种方法为：
2.2.1单染色法
用某种染料把细菌连同周围其它物体一起染上这种颜色。染色后，就能够观察细菌的大小、形态，还有排列形式，及其具体结构，不过不同细菌染色性之间的差异却显示不出来。
2.2.2复染色法
用不止一种染料对细菌进行染色。常用的复染色法有革兰跟抗酸两种染色法。在细菌学中，革兰染色法使用频率最高，一般标本在进行分离培养前（极少数的粪便、血液标本除外），都要做一次革兰染色与镜检。通过革兰染色能对细菌进行初步识别，可缩小进一步鉴定的范围。抗酸染色把需要细菌分成抗酸和非抗酸性两类。
2.2.3荧光染色
荧光染色法非常实用，不但敏感性强，结果也易于观察，效率非常高。除以此外，还有几种染色法，如鞭毛染色，还有异染颗粒染色等。
2.3不染色检查
在不染色前提下直接对细菌标本进行镜检，可观察细菌在生活状态下的形态跟运动状态，不染色的检查方法中悬滴法跟压滴法很常用。悬滴法需要用凹型载玻片，在其凹窝边缘适当涂些凡士林，并用接种环在洁净的盖玻片中间沾一点点无菌水，再往里面点上少许已经培养好的细菌。要是液体培养物就把那个培养液直接往盖玻片上滴一小滴即可。接着把盖玻片翻过来，好让液滴呈现出下悬状态，让液滴恰好容纳到载玻片的凹窝里面，再轻按一下，让它给凡士林贴紧。压滴法则需要用接种环往洁净载玻片中央位置上挑取两环细菌生理盐水悬液或者是细菌培养液，再用盖玻片覆盖其上。要注意菌液的挑取要适量，不允许外溢，也不要带气泡。
2.4基因探针技术
基因探针技术就是，在一定条件下，同源序列的核酸链形成的DNA、DNA链条或互补DNA、RNA都十分稳定，因此用这种基因探针也具有高度特异性，这样一来就能识别出细菌之间的不同。基因探针不会因基因片段长度具有多态性而增加分析条带数，就像法国生物——梅里埃公司的PROBE基因探针检测跟GEN基因探针检测系统，仅需半小时就能够分离特定菌落并予以确证。其缺点在于非目标细菌则不予检测。
2.5直接计数法
这种方法的基本原理是以激光为发光源，在调整光束正确聚焦后，以垂直角度对样品流予以照射，让经过荧光染色的细胞发出散色光，或者是激发荧光。其散射信号足以体现细胞大小，信号强度反映的是细胞膜表面抗原的状态还有核内物质的浓度，荧光信号跟散射光信号就足以据此对细菌大小、数量、形状做出预估。
这种方法相对比较灵敏，且可一次性把细菌的数量、性质全部鉴定出来。现阶段这项技术能检测细菌总数、致病性沙门菌，还有大肠埃希氏菌等，并通过统计特定细胞，对不同细胞予以更精确的检测。样品经过滤后，用留存的微生物作为荧光标记，就能通过激光扫描仪展开鉴别。该方法可以对长得慢的微生物予以快速检测，跟以往的平板计数法相比要快出很多，不过成本有点高，故而难以推广。而且，除了以上几种检验方法外，还有其它既省时、省力又不费钱，而且还准确的检验方法。
3检测质量控制
3.1.环境方面
为让实验能够顺利完成，实验室必须合理布局，让试验能够操作顺利，并便于监控调试过程。选址时，必须保证对危险源（包括化学方面与生物方面）的防护水平可接受、可控，不会对大楼内、外产生严重影响。对于实验室布局，要求其通风状况、每小时换气次数，还有温湿度、洁净度、平均照度、噪声等各项环境参数全都要满足相关要求，并定期予以检测。对产生的废弃物必须分类收纳、排放的废液、废气必须达到标准要求。走廊需要设置实验室布局示意标志，实验室入口处还有洁净间需要设置警示和限入标志。实验室里面的安全防护措施一定要到位，让实验人员、环境不会受到侵染”。
3.2.实验室方面
实验室内需要设置多个洁净度不同的区域，需要对洁净级不同的区域间压差进行定期监测，阳性菌室要求对临近区域保持负压，洁净区则要求对普区保持正压。从功能来看需要注意不同物品的摆放位置，污染物不允许放在非污染区，只有经过灭菌处理的，绝对洁净的物品可放置在清洁区，杜绝交叉污染。实验室里面不允许进食、不允许吸烟、不允许放置任何跟实验无关的物品。洁净区必须限入，要求净手、换鞋、带口罩、换洁净服等。在使用前后，都要对洁净区做消毒、灭菌处理，洁净区还要定期检查温湿度、换气频率、沉降菌等等，好让洁净区域能够与相应级别相符。
3.3.仪器设备控制
要确保检测结果的准确性，必须对仪器设备采取规范化的管理，因此需要定期进行保养维护，按要求计量、校准并予以记录，在使用仪器设备时必须如实填写记录。操作高压蒸汽灭菌器的实验人员要求具备特种设备操作证，而且在使用时，需要放化学指示卡，观察指示卡的性状、颜色对灭菌效果实施监测，并保留相应记录。
3.4.人员方面
检验员必须掌握专业的检验知识，经考核合格才能发放上岗证。还要求其熟悉与生物检测的基础操作与相关安全知识，还要了解无菌知识、消毒知识，操作时必须遵循相应使用规程。
3.5.培养基方面
微生物检验实验室所用的培养基在采购时一定要选择正规供应商，并从选购环节起，将收货检验、存放还有使用环节的记录做好，要求供应商提供相应资质证明，还有培养基名称、材质成分、效期、产品批号还有储藏条件等信息。新购入的培养基需按批次实施技术性验收，确认合格后方可接收，使用时应符合使用说明。
3.6.菌种方面
菌种必须购置标准菌种，且要求可以溯源，同样要从购置环节开始，对包括收货检验、存放以及使用等各个环节的记录，要求供应商提供相应资质证明，而且其传代、保存还有使用都一定要如实记录。要求标准菌种管理必须做到双人双锁，除管理者外不允许任何人非法使用。
3.7.样品方面
待检验的样品在整个运输、贮存环节中的环境温度，都应符合规定，对于要求冷藏或要求冷冻的待检样品必须对温度实施全程监测，杜绝二次污染。如果样品包装出现破损或样品被污染应，必须将其单独存放，从待检开始，所有检测中以及检测完的样品都需要做有效标识，并且分架、分柜存放。
3.8.记录方面
整个检测过程均应如实、准确、及时记录，并按要求归档，保证其可朔源性。需要归档保存的记录包括：①对于标准菌种，要留存从购买到销毁各环节的记录；②对于培养基，要留存从选购到使用的各环节记录；③对于洁净区，除了要求留存其环境监测记录跟每次的使用记录之外，还要有出入该区的外来人员记录；④对于仪器设备，要求留存其使用记录、维护保养记录，还有期间核查记录等等；⑤对于检测实验，要求留存原始检测记录，还有出具报告的相关记录。
4.结论
关于医疗器械产生、使用的质控体系在不断发展，相关的检测技术也在逐渐进步，检验人员需要积极强化自身素养，遵循规章制度、坚决按规程操作，严守质控要求，以保证对医疗器械所做的微生物学检测能够得到一个准确的结果，确保临床中所用医疗器械的安全性。
参考文献
[1]总局发布医疗器械优先审批程序[J].中国医疗设备.2017(01)
[2]刘学铭,方少钦,唐道帮,等.我国熟肉制品微生物安全现状与控制技术[J].现代食品科技,2012,28(1):99-104.