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核酸检测实验室（PCR），你了解吗

发表时间：2020/12/23 来源：《中国医学人文》2020年9月9期作者：曾庆凌

[导读] 核酸检测实验室（PCR），你了解吗

曾庆凌
（眉山市人民医院；四川眉山620000）
【中图分类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】2095-9753（2020）09-0003-01
核酸检测实验室的建成是为疫情提供科学、有效、有力的数据支
撑，对打响抗疫，赢得抗疫具有重大的意义。
核酸检测实验室又叫做基因扩增实验室，PCR 的中文翻译为橘
核链式反应。事先准备好设计的引物、耐热的 DNA 聚合酶以及反应
原料，即可在体外进行 DNA 的复制过程。首先将需要扩增的 DNA
模版进行加热使其变性解链。之后待温度达到能使引物与待扩增的模
版序列发生结合时可完成退火结合；
核酸检测实验室一般需要包含以下四个独立区域即：核酸扩增区
以试剂配置区、产物分析区、样品处理区。核酸检测实验室可以有分
散形式的也可以有组合形式的。试剂选择、样品处理、核酸扩增以及
产物分析四个步骤通常是一组完整实验需要经历的必要过程。
分散形式的核酸检测实验室。分散形式的实验室就是指各个实验
过程的独立单位没有紧密相邻，成分布状态。对着这种分散形式的实
验室由于相互之间几乎不产生相互干扰，因此没有特殊条件的需要。
组合形式的核酸检测实验室。是指完成一组实验过程中每个实验
用房彼此相邻，形成一个实验区域。由于组合形式的核酸检测实验室
各用房之间相邻因此会造成彼此之间的干扰，对此对总体布局以及屏
障系统具有一定的要求。每个实验入口需要外设缓冲间，以减少室内
空气之间的交换。
核酸检测是什么？核酸检测是临床用于艾滋病的一种检测方式。
如果在感染艾滋病毒以后进行核酸检测可以了解身体内含有的艾滋
病毒素，对此可以在医生的指导下进行抗病毒药物的治疗。如果在治
疗后的 11 周经过核酸检测结果为阴性，则可以排除没有出现艾滋病
毒感染的结果，但是需要定期复查。
核酸检测的原理是什么？病毒的结构虽然有所不同但是一样具
有遗传物质。以这次的新冠病毒为例，它的遗传物质为单链的 RNA，
这是它最明确、最核心的物质。如果说我们能够检测到新冠病毒的核
酸，也就能说明是存在新冠病毒的，这也是新冠病毒感染人体被确诊
的标准因素。核酸检测的原理是病毒存在一个特殊的基因序列，然后
将这段特殊的基因序列监测靶标，通过核酸检验实验室扩增，使这段
我们靶标好的 DNA 序列指数级扩增，每一个扩增出来的 DNA 序列均
可以与我们事先加入的荧光标记探头相结合，结合后会产生荧光信
号，扩增出来的 DNA 序列靶标越多，与荧光结合的就越多产生的荧
光信号也就越强。因此核酸检测就是通过荧光信号来判断监测标本中
是否存在检测病毒的核酸。
如何进行核酸检测？核酸检测共有五步：选取样品、留样、保存
样品、核酸提取以及上机监测。第一步采样，使用专门的医疗棉签在
监测者的咽喉或鼻咽出沾取一部分分泌物体。第二步，医务人员进行
留样，将沾有分泌粘液的一头浸入事先准备好的细胞保存液中，然后
折断尾部立即旋紧瓶盖。第三步，将取好的样品放置在密封箱中保护
好样品并送往检验。

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第四步，将送往实验室的样品经过处理进行核酸
的提取。第五步，进行荧光核算实验室检测，将提取到的样本进行荧
光核算实验室检测扩增。
核酸检测阳性代表确诊吗？有相关医学研究人员表示，当核酸检
测呈阳性，可以表明该患者感染了这种病毒。如果该患者在呈阳性的
条件下出现了相应的症状如新冠病毒感染出现发热、咳嗽等结合流行
病史可以诊断为确诊病例；或者经过 CT 等监测发下来影像学的变化
也可以诊断为确诊病例。对于那些没有 CT 影像学等改变只出现单纯
的核酸实验阳性患者，被称为无症状感染者。无症状感染者和确诊病
例之间是存在区别的。
核酸检测呈阴性可以说明什么？如果核酸结果呈阴性也不能表
明就一定没有感染。因为任何的实验都存在误差或漏洞。
核酸检测实验室的设计核心问题是什么？核酸检测实验室的平
面布局、气流掌控、空调安置、系统设计等等都需要围绕同一个和信
赖建设就是避免污染。无论什么级别的医疗结构在进行核酸检测实验
室设计时都需要综合考虑各个方面的因素以保证标本的全部环节有
质量保证以及实验室具有的严格生物安全。（1）建设要求：每一个
核酸检测实验室都需要设立四个分区即试剂准备区、标本制备区、
PCR 扩增检测区和扩增产物检测区。进行组合方式布局的实验室需
要在每一个独立实验用房前设置一个缓冲区，缓冲区通过气压的调节
可以避免整个实验过程中试剂、标本免于受到气溶胶的污染同时也可
以降低扩增物对人体和周围环境的污染。（2）人员要求，进入核酸
检测实验室的人员需要经过从基础理论、实验原理、操作规范、质量
保证等规范化的培训，取得核酸检测实验室上岗证。（3）检测风险，
在样品的开盖、震荡等过程中都可能参入气溶胶造成样品污染的风
险。（4）防护要求。必须按照生物安全三级实验室的个人防护要求
进入。
核酸检测实验室的污染来源都有哪些？（1）样本之间的交叉污
染：存放样本的容器在使用前没有消毒造成污染，使用时没有盖紧容
器，空气进入导致污染；对不同样品进行提取时没有更换枪尖；实验
室内的器具没有定期消毒；不同样本同时开盖、震荡，不断吹吸导致
气溶胶形成扩散。（2）实验试剂污染：主要是在 PCR 组分试剂加
样过程中，由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳
性对照污染。（3）扩增产物污染：密封不严导致扩赠出的产物外漏
或者由于反应管盖不严、等各种因素导致反应管开盖，。此种原因是
核酸检测过程中常见的污染原因
怎样防止实验室污染？（1）实验室人员必须正确佩戴手套，如
手套过大导致五指没有与手套紧密贴合导致在开盖操作中出现交叉
污染。（2）正确使用生物安全柜：保持安全柜的清洁、保持安全柜
通风良好；废液缸内必须保留一定量的含氯消毒液，操作结束后及时
清理废液缸.（3）核酸提取仪去污染：每一次核酸检测后都需要对使
用的仪器进行消毒，一般选用医用酒精。（4）重视通风：不定期多
实验室进行通风，通风时长至少 30min。（5）核酸实验检测扩增区
污染：核酸实验室检测反应管必须盖紧。（6）实验室随手可及的消毒剂。