高效液相色谱技术在食品检验中的应用探讨--中国期刊网

字体：大中小

首页> 原创作品> 正文

高效液相色谱技术在食品检验中的应用探讨

发表时间：2020/12/31 来源：《基层建设》2020年第24期作者：刘丽丽朱亚娟

[导读] 摘要：高效液相色谱技术是一项已发展成熟的技术，在经典液相色谱法的基础上，将气相色谱实验方法与理论相结合，通过在线检测、高压泵输送流动相和高效固定相等方法形成的。

        山东鲁美克环境工程有限公司山东济宁 272000
        摘要：高效液相色谱技术是一项已发展成熟的技术，在经典液相色谱法的基础上，将气相色谱实验方法与理论相结合，通过在线检测、高压泵输送流动相和高效固定相等方法形成的。高效液相色谱的主要组成是进样器、控制器、高压输液泵、处理系统、贮液器、数据获取、色谱柱和检测器等。
        关键词：高效液相色谱技术；食品检验；应用；
        社会的进步和经济的发展使人们的生活水平得到了极大的提高，人们对食品质量的要求也越来越高。高效液相色谱在食品检验方面具有敏感、流动相选择范围广、高速、高压和高效等优点，这些优点使高效液相色谱在食品安全检测中得到广泛应用，在保障食品安全方面起着重要作用。高效液相色谱技术灵敏度高、检测限制低使得它逐渐成为最为重要的食品检测技术。
        一、高效液相色谱技术概念
        高效液相色谱（也被称之为高压液相色谱，下文简称其为HPLC，是色谱法的一个重要分支，以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。HPLC不仅检测灵敏度较高，还具有分析速度快、分离效率高的特点，在食品检测领域的应用十分广泛。HPLC 技术的工作原理和特点HPLC 的工作原理是以液体作为流动相，导入到高压输入液系统中。再将不同比例的混合溶剂或单一溶剂用流动泵装入固定的色谱柱中，然后再通过试样中的分子发生互相作用从色谱柱流出来，从而实现分离混合试样中成分的目的。再根据液体溢出的时间、浓度等绘制色谱图，通过对色谱图的比照来分析出试样中溶剂的主要成分。利用HPLC 技术，分析一个混合溶液样品的时间为15 ～ 30 min，十分的快速、高效，比气相色谱法及其他检验方法的分离速度要快几十倍，再加上其检测的精确度可以达到0.01ng，所以在物质的检验尤其是对有机化合物的检验中的应用十分广泛。
        二、高效液相色谱技术在食品检验中的应用
        1.实验部分。仪器与试药仪器：液相色谱仪；电子天平；超声仪；离心机；紫外光度计。试药：番茄汁；杏汁；黑加仑汁；红枣汁；萝卜汁；石榴汁；香梨汁；稀氨水、甲醇：HPLC 级；0.02 mol ／ L乙酸铵溶液；安赛蜜（乙酰磺胺酸钾）标准储备液1.00 mg ／ mL；山梨酸标准储备液1.00 mg ／ mL；糖精钠标准储备液1.00 mg ／ mL；苯甲酸标准储备液1.00mg ／ mL；脱氢乙酸标准储备液。
        2.便携式高效液相色谱仪的评价。泵耐压检测方面，连接好仪器的各个部分，其中流动相环节使用100%的甲醇，流量设置为2 mL/min。仪器开始运行之后，维持压力稳定，使用滤纸检查不同管路的连接位置，确保这些位置未发生漏液问题。把色谱柱取下来之后堵住泵的出口位置，逐渐加大压力直到最大值的80%，在持续10 min 后，再次检查泵出口端有没有泄漏。高效液相色谱法优点显著，它的流动相种类多，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广，速度快，重复性高，分离效率高，选择性好，色谱柱可以反复使用，自动化操作，不受试样的挥发性和热稳定性限制，应用范围广，对于温度需求不高，室温下便可分析，分辨率以及精确度都比较理想。液相色谱法有着非常广泛的用途，在合成化学领域、环境监测领域、临床化学领域、药物研究领域、食品检验领域、石油化学领域以及生命科学领域等都有应用。比如在检测食品当中污染物的时候，可以分析多环芳烃、微量元素、大肠杆菌毒素以及黄杆菌毒素等。
        3.溶液制备。

期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆

对照品制备分别取对照品降糖药5 mg、甲苯磺丁脲10 mg，0.45 μm 的微孔滤膜，将甲苯磺丁脲过滤，对照品贮备液便是过滤剩下的滤液，细粉置于50 mL的量瓶中，再加入适量的甲醇，经超声溶解，冷却至室温后再定容、摇匀。供试品溶液取服用量作为供试品，研细之后放入100 mL 容量瓶当中，然后添加40 mL 甲醇，通过30 min 的超声处理使其溶解，冷却至室温，定容、摇匀，使用0.3μm 微孔滤膜进行过滤，得到的溶液就是续滤液。
        4.结果。输液系统评价液相色谱仪最为关键的组成部分之一就是输液系统，输液系统是把贮液器中的流动相送入液路系统。然后液相色谱分析直径的大小以及色谱柱的直径，这就加大了填充剂的阻力，而检测泵耐压有高柱前压和高速液流；分辨率的稳定性、峰面积的重现性、定量精度、保留时间、流动相都直接影响到流速是否平稳，这就需要检测泵的流量稳定性误差（SR）比较小以及汞流量误差（SS）小。根据“输液系统的评价”的方法检测泵耐压，仪器平稳后高效液相色谱法优点显著，它的流动相种类多，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广，速度快，重复性高，分离效率高，选择性好，不受热稳定性限制，应用范围广，对于温度需求不高，室温下便可分析，分辨率高、精确度高等。仪器运行之后，需要维持压力平衡，并且使用滤纸检查各个管路连接的位置，确保没有渗漏问题。这就证明了泵耐压符合要求。泵流量设定值误差（SS）和流量稳定性误差（SR）均符合要求。整机性能的评价液相色谱仪主要部件包括色谱柱、进样器、输液系统和检测器等，其性能在峰面积、保留时间方面都会受到一定程度的影响，为了判断仪器整机运行性能，应用用相关方法来对液相色谱仪加以检测，如果峰面积的相对标准偏差不大于3.0%，色谱峰持续的时间同标准偏差对比不大于2.0%，就符合行业相关标准的规定。系统适用性为了分析液相色谱法能否用来检查实际样品，需要对系统进行适用性的试验，将制备得到的对照品液以及根据比例制作得到的混合液检测，将结果与安捷伦HP1100 液相色谱相比，样品在安捷伦HP1100 液相色谱仪、便携式高效液相色谱仪上的峰形、出峰顺序大体相同，相邻峰的分离度、各色谱峰超过了1.5，格列本脲、格列喹酮、罗格列酮、格列吡嗪和格列美脲的理论板数均超过了2 000，系统适用性试验符合要求。线性关系线性关系可以说是液相色谱在定量分析过程当中的关键，为了分析便携式高效液相色谱仪的色谱，对降糖药加以测定，在此过程当中持续记录色谱图。结果显示对照品的浓度（μg/mL）与峰面积存在明显的线性关系。色素添加剂可以使食品具有更加吸引人的外观，色素添加剂也分为天然和人工合成两大类。其中，天然的色素添加剂为从自然的动植物中提取，具有无害的特点；而人工合成的食品添加剂会对使用者的身体构成损害，过量使用合成的色素添加剂，会使食用者产生中毒现象。具体检测步骤如下：对肉类制品进行脱脂处理，按照特定比例将乙醇和氨水进行混合，利用超声波过滤技术对        上述样品进行提取处理，再用安捷伦1100 系统按照20 kmmol/L 乙酸铵与甲醇梯度进行洗脱，最后利用二极管整列检测，以得到最终检测结果。在糖精的检测中，我国多家检测机构采用HPLC 方法结合荧光以及紫外线检测的方法，与传统的检测方法相比，该种方法具有检测迅速、灵敏度高、准确率高的特点，检测初期可以很好地避免因为检测成分多而引起的样品分离效果不理想。
        结束语：总而言之，随着人们生活水平的提高，食品的多样性也会越来越复杂，导致食品可能出现的安全问题也越来越多，将HPLC 技术应用到食品检测中，可以高效快速的检测出食品中化学药品等物质的具体含量，分析出食品中存在的问题，从而通过这种手段为人们提供食品安全数据参考，为人民的身体健康保驾护航。
        参考文献：
        [1]刘晓红，段常浩.高效液相色谱技术在食品检验中的应用[J].化工设计通讯，2019，45（4）：96.
        ［2］费贤明，张红梅.应用HPLC FLD 法测定食品中的糖精钠［J］.中国卫生检验杂志，2017，17（08）.
        ［3］黎其万，刘宏程.高效液相色谱法测定油浸酱菜中的苯甲酸、山梨酸和糖精钠［J］.食品与发酵工业，2018，3（10）.