王思睿 黄旭芳
达州中医药职业学院 635000
摘要：胃癌是我国发病率及死亡率均较高的疾病，多药耐药现象的出现为临床化疗带来了巨大挑战，本文选取近年热门研究领域microRNA作为切入点，探讨多药耐药的新治疗方法。研究发现在AZ-P7a细胞中，let-7以exosome为载体，在细胞内胞外大量表达；在MKN-1细胞中，转染miR-145对细胞生长的抑制作用强于转染miR-143，而联合转染两种miRNAs收到加强的效果。
关键词：胃癌；多药耐药；microRNA； 治疗
1、 miRNA结构与功能
微小RNA是一组长度为20个碱基左右，含量丰富的[]非编码小RNA[1],其通过与靶mRNA的3'-非翻译区互补配对,抑制蛋白合成, 或诱导mRNA 降解, 从而在转录后水平上对目的基因表达进行负性调控[2],调节细胞的代谢、增殖、分化和凋亡等生理过程。成熟m iRNA 由具有发夹结构约70nt的miRNA前体经酶加工而成[3]。研究表明，人体内含有大量的非编码RNA，它们虽然不编码蛋白质，但广泛参与基因的表达调控。1993年，Lee等[4]利用遗传分析的方法在线虫中发现了一个22nt的小分子非编码RNA:lin-4。2000年，Reinhart发现另一个类似的、具有转录后调节功能的小分子RNA：let-7，从而掀起了寻找miRNA的热潮，拟南芥、线虫、果蝇、小鼠、以及人类等各种生物及病毒中都相继有miRNA的报道且主要以模式生物为主。miRNA的加工成熟过程分为两步：pri-miRNA在核内被Drosha酶加工成具有发夹结构的前体，即pre-miRNA。
2、胃癌相关miRNA
胃癌及胃癌多药耐药现象发现多种miRNAs改变。一方面可以从检验的角度为临床寻找到更多更灵敏的指标；miR-885-5p在肝癌患者血清中表达显著上调，表明能够利用血清miR-885-5p作为生物标记检测原发性肝癌；Xie等研究了110例样本，发现miR-24联合miR-30d能够作为诊断的潜在生物分子。另一方面为本次课题所进行的临床干预提供了可能。抑癌作用miRNA。研究发现miR-9通过NF-kB1途径发挥抑制肿瘤的作用。在胃癌组织标本中miR-141表达较正常癌旁组织减少，同时在不同的细胞系中观察到了同样的现象，过表达miR-141出现了肿瘤抑制现象，但是具体调控的机制未阐明。 促癌作用miRNA。Cho等发现通过反义核酸抑制AGS细胞系miR-372，发现抑癌基因LATS2表达增加，从而证实该微RNA在该细胞系中的“癌基因”样作用。
3、外源miRNAs治疗里程碑
Zhang等研究发现人体血液内存在植物miRNA-168a，miR-168a广泛表达于亚洲人食用的大米中，通过消化道某种暂时不清楚的机制进入人体循环系统、并且影响LDLRAP 1表达，说明外源miRNA特别是植物miRNA能够影响人体的基因表达，为合成miRNA调控机体功能提供了更加广阔的思路。
4、胃癌多药耐药的miRNA研究
研究发现iR-497,miR-200bc/429,miR-181b，miR-15b，miR-16通过靶向bcl-2逆转胃癌细胞的多药耐药现。bcl-2即B细胞淋巴瘤-2基因，其表达的蛋白质家族分两类，而bcl-2的过度表达可增强观察细胞对大多数细胞毒素的抵抗性。这一类miRNA可能的作用机制是通过促进凋亡凋途径的恢复，减少多药耐药的表型。说明miR-200c通过E-cadherin间接调控凋亡的方式逆转肿瘤细胞耐药及抑制肿瘤细胞增殖。miR-19在乳腺癌多药耐药中高表达，可能通过抑制PTEN发挥作用，该miRNA在胃癌多药耐药中的作用暂时未见文献报道。
5、国内外研究现状及分析:
胃癌作为我国发病率及死亡率均较高的疾病，多年来科技工作者及医务工作者孜孜不倦做了很多研究，多药耐药作为化疗的必然衍生国内外也已经研究不少，目前miRNA仍属于生物、医学研究的热门领域，迄今为止，人体已经发现了1000种左右的miRNA，还有大量的预测序列，显然广大科技工作者在胃癌的miRNAs研究方面已经取得了不小的成绩，但是在肿瘤的治疗领域仍有很多亟待解决的问题；在高转移性胃癌细胞系AZ-P7a中，let-7以exosome为载体，在细胞内胞外大量表达。在大多数人类胃癌细胞中miR-143和miR-145表达下降，在MKN-1细胞系中，转染miR-145对细胞生长的抑制作用强于转染miR-143，联合转染两种miRNAs收到了加强的效果。基于前人辛勤工作获得的大量信息之上，我们提出了选取3-5种表达下调miRNAs进行组方治疗，根据肿瘤的特征，其选方原则可以概括为：增强机体免疫；促肿瘤细胞凋亡；促基因修复；抑制浸润、转移；促机体平衡稳定。这种探索性设计具有可观的前景，结合新兴的纳米载体技术，实现有效、方便、快捷的转化治疗，是值得研究探索的方向。
参考文献：
1. Bartel DP.microRNAs:genomics,biogenesis,mechanism,and function[J].Cell,2004,116(2):281-297
2. HeL, Hannon G J. MicroRNAs: small RNAs with a big roll in gene regulation[ J] . Nat Rev G enet, 2004, 5( 7 ): 522- 531.
3. Ambros V, B artel B, Bartel DP, et a.l A uniform system for microRNA annotation [ J]. RNA, 2003, 9 ( 3) : 277 - 279.
4. Lee RC,Feinbaum RL,Ambros V.The C.elegants heterochronic gene lin-4 encoded small RNAs with antisense complementarity to lin-14[J].Cell,1993,75(5):843-854