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摘要：水作为生命资源，在人们日常生产与生活过程中都离不开水资源的支持。生活饮用水作为人体的必然需求，在接触人体之前必须要经过水质检验。其中，微生物检验分析就是最重要的环节之一。在国家及相关部门所颁发的饮用水卫生标准中已经对生活饮用水中微生物的含量进行了明确规定。本研究就是在此基础上，对生活饮用水中水质微生物检验分析的方法进行了简要阐述，以指出水质微生物检验分析的重要性。
关键词：生活饮用水；水质；微生物检验；意义
引言 近年来随着社会的不断发展，世界范围内的水资源都遭到了不同程度的污染及破坏，再加上由于不同地区检测技术水平上的差异，导致有些水资源未经检验合格就直接被作为饮用水被人们使用。而这种不合格的饮用水不可避免就会给人类的身体健康带来影响。微生物检验作为水质检测过程中的重要内容，其检测结果是水质是否合格的关键评价指标，因此对于水质检测具有重要意义。
1.生活饮用水微生物学标准
国家相关部门对于生活饮用水水质微生物有着严格规定，要求生活饮用水中美好生活细菌总数不得高于100CFU/ml，若每毫升生活饮用水中细菌总数超过500CFU，则不可用于饮用。在温血动物肠道中，大肠菌群属于正常菌群，为避免计算极少数肠道传染病病原体时出现困难，在对生活饮用水水质微生物进行检验分析时必须要采用科学的检测方法。因此，生活饮用水水质微生物检验标准为，细菌总数应不超过100100CFU/ml，且检测结果中不能含有耐热大肠菌群、总大肠菌群和致病菌。
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图1 饮用水微生物检验流程
2.生活饮用水水质微生物检验
2.1样品采集
在对水质微生物进行检验之前，首先应当进行样品采集。即选取具有代表性的水样进行采样，采样过程中应当尽量确保无菌操作，以避免外界环境对试验结果准确性产生影响。其次，对于所选用的采样容器，应当提前做好消杀灭菌处理，并保证在样品采集、运输以及贮存环节都不会受到污染。通常情况下，为便捷采样过程可直接选取自来水作为样品，但此时需要对采样处水龙头进行灭菌处理，如使用酒精灯在出口处直接加热。采样时应当先将水龙头打开使自来水流出5-10分钟之后，排尽水管内原有水样，避免获取到以被污染的水源。
2.2微生物检验
在对水样中菌落总数进行检验时，可采用平盘计数的方式。检验过程中应当确保周边的无菌环境，之后从样品中提取1ml水样，加入消毒液体后缓慢注入预先准备的已经过灭菌处理的平板碟内。之后，提取以融化冷却至45℃的营养琼脂，缓慢加入已注入检验水样的平板碟中，摇匀使水样与营养基充分混合。而在每次检验工作开展过程中都应当进行一次平行接种，同时使用另一只注入营养琼脂的平板碟作为对照。待检验试样全部冷却并发凝固后，将平板碟翻转，使其底面朝上放置于培养箱中，培养箱的温度应保持在36±1℃，培养时间控制在48小时，之后对试样中的菌落进行计数。得出的结果即为1ml水样中的菌落总数。
总大肠菌群也是微生物检验的重要环节。总大肠菌群中极具代表性的菌种主要为大肠杆菌，同时还有柠檬酸杆菌及产气肠杆菌等。在检验时主要可采取如下几种方式，即①采用多管发酵法：此时可提取10ml水样，并将其接种于同剂量的营养液中，营养液中主要为双料乳糖蛋白，混合摇匀后提取1ml水样，将其注入含有单料乳糖蛋白的10ml营养液中；之后再领取1ml原水样，将其注入9ml已经过灭菌处理的生理盐水中，混合摇匀后同样注入含有单料乳糖蛋白的10ml营养液中。每一稀释度都进行接种，共接种5管，将所有混合试样都摇晃均匀后同时放置于培养箱中作培养处理，培养箱温度需控制在37℃，培养时间为24h。培养结束后将试管取出，对试管内样品进行分析。此时若乳糖蛋白培养管中都未能产气产酸，则说明试样中总大肠菌群为阴性。而若试管中有产气产酸现象，则需要将产气产酸样品再次接种到含有伊红美蓝琼脂的平板碟内，继续进行培养，培养时间为24小时，培养结束后对培养基内试样中菌落的形态进行观察。如发现有可疑菌落，则可提取出来并进行革兰氏染色，经由镜检后进行证实。最后依据已证实总大肠菌群阳性的管数，对检验结果进行记录。②采用滤膜法，即首先使水样经由微孔滤膜做初步过滤，之后收集滤膜上截流出的微生物。选取品红亚硫酸钠制成培养基，培养基上同样粘贴上微孔滤膜，再接种微生物。之后将培养基放置于培养箱中进行培养，培养温度为37℃，培养时间为24h。培养结束后观测菌落形态，若发现菌落较为典型，并且存在金属光泽，则需要继续进行检验。③采用酶底物法。在使用这种方法是，首先需要培养一种可分解色原底物的菌落，这种菌落的特点在于其可以代谢合成一种酶，将色原底物进行分解。取水样，将其与此菌落共同培养24小时候观察，若菌落发生变色，并变为黄色时，则表明试样中存在总大肠菌群。
在对耐热大肠菌群进行检验时，主要需要检测埃希氏菌以及耐热克雷伯氏菌。检验方法如上总大肠菌群检验，同样可使用多管发酵法以及滤膜法。而若要对粪便以及自然环境中的大肠菌群进行区分时，则需要在检验过程中将培养温度进行提升，若提升至45℃左右时菌落仍可以生存，则表明菌群为耐热大肠菌群。
大肠埃希氏菌的检验过程同样可采用多管发酵法、滤膜法以及酶底物法。在使用多管发酵法时，对于已出现产酸或产气的样品则应可进一步检验大肠埃希氏菌。此时需要将已经过灭菌处理的金属接种环，或者使用无菌棉签将试样中的液体接种与EC-MUG管中，并进行培养，培养时可选择45℃培养箱，或者恒温水浴培养，培养时间为24小时左右。培养结束后，取试样于暗处使用紫外线灯进行照射，若发现试样有蓝色荧光反应则表明试样中存在大肠埃希氏菌。在使用滤膜进行检验时，首先需要在已加入NA-MUG的培养基中再加入荧光底物，并继续进行培养，此时若试样中存在荧光产物，则在紫外线灯校舍下就能发生荧光反应，表明试样中存在大肠埃希氏菌。最后是使用酶底物法，此时培养基宜选用EC-MUG，并加入荧光底物后进行培养，此时若菌落中产生了荧光物质，并经紫外灯照射后发出蓝色荧光，则证实存在大肠埃希氏菌。
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图2 微生物检验方法
3.微生物检验的意义
当前在饮用水安全问题中，微生物污染已成为威胁饮用水安全的重要因素。通过对水源中微生物进行检验，结合检验分析结果，就能及时了解到饮用水中微生物的含量。若是发现其含量已经超出国家所规定的合格标准，则应当及时联系相关部门进行处理，以确保人们的用水安全；而若发现饮用水中存在致病菌，则应当及时做好消毒杀菌，避免对人体健康造成伤害。
结束语
饮用水水质微生物检验对于人们饮水安全以及身体健康具有重要影响。而在检验过程中则需要科学选用检验方法，并严格检验过程，强化监督管理，及时发现饮用水中存在的安全问题，提前消除隐患。
参考文献
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