王豫川
绵阳市人民医院 四川绵阳 621000
大家都知道，微生物具有分布广泛、生长繁殖能力强、种类繁多、易培养、易变异及代谢能力、适应能力强等特点，在临床疾病监测中也有着广泛的应用：
一、常见的检测方法
1、重量检测法
重量检测法也就是通过称重的方式来进行，利用离心或过滤法测定。一般情况下，干重是湿重的百分之十五左右，这种方式比较繁琐。若是微生物为菌体，大部分都会采取这种方式，如活性干酵母这种，以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
2、体积测量法
体积测量法也就是平时所说的测菌丝浓度法，这种检测方法是通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况，这种 类型的检测方式比较简单、快捷、粗放，由于离心沉淀物中会夹杂各种固体营养物，在检测之前需要设定一致的处理条件，不然会导致结果有很大的偏差，该检测方式目前已成为大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。
二、临床应用
1、重视显微镜检查
对于留取标本进行革兰染色，一方面可以掌握标本质量以确定进行培养或重新留取标本;另一方面通过镜检对某些细菌可以作出初步分类。
对于脓性分泌物或穿刺液进行革兰染色镜检亦可作出大致分类或初步诊断。对泌尿系男性尿道和女性分泌物涂片革兰染色镜检，查到白细胞内或外有革兰阴性双球菌，是诊断淋病的重要依据。脑脊液墨汁染色检查新型隐球菌，对于临床诊断隐球菌性脑膜炎有重要价值。痰、胸水涂片抗酸染色查抗酸杆菌，对于诊断肺结核有重要意义。 粪便球杆菌比例检查，对于肠道菌群失调的诊断有重要帮助。粪便暗视野检测弧菌的运动情况，对于霍乱的诊断有意义。
2、用显色培养基对微生物快速鉴定
在分离培养基中加入检测某些细菌特异性酶的底物（由产色基团和微 生物代谢物如糖苷类，氨基酸或肽类两部分组成，通常为无色），在特异性酶作用下游离出产色基团并产生荧光或显示一定颜色，用紫外灯观察菌落产生的荧光或直接观察菌落颜色即可对细菌做出鉴定。
如CHRO真菌培养基:白色念珠菌（绿色），热带念珠菌（蓝色），克柔念珠菌（粉红色）。FGM培养基:大肠埃希菌（蓝色）。SSMAC培养基:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的菌落为黄色。
3、免疫学检查技术
全自动酶免疫荧光法:如VIDAS全自动酶免疫荧光系统检测HAV，HBV，HIV，沙眼衣原体等。
胶体金标记酶免疫法:检测HAV，HBV，HIV，CMV，弓形虫等。
胶乳凝集法:用于检测肺炎链球菌，脑膜炎奈瑟菌A、B、C组，流感嗜血杆菌，隐球菌等。
明胶颗粒凝集法:用于检测肺炎支原体。
4、核酸探针
将一段已知顺序的单链核酸（DNA或RNA）加以标记（α32pdNTP，HdNTP，SdNTP）就成为核酸探针，可用来探测标本中与它具有互补的核酸碱基顺序。
应用PCR技术检测:结核分支杆菌，幽门螺杆菌，军团菌，支原体，衣原体，HBV，HCV，HIV，CMV等。
5、基因芯片技术利用
基因芯片技术检测标本中病原微生物已获得较大成功，如检测HIV基因，结核分支杆菌基因以及其它细菌基因分型，菌种鉴定，细菌耐药基因的检测等。
6、全自动微生物分析仪和全自动血培养仪
全自动微生物分析仪解决了微生物鉴定的繁琐问题，缩短了报告发出时间，全自动血培养仪的应用，为无菌体液（脑脊液，胸腹水，胆汁，关节液）的细菌分离提供了捷径，阳性率大大提高。
三、痰液的检查
痰中的微生物种类较多，在部分的是咳痰量混入的上呼吸道正常菌群。当支气管与肺部有感染时，可于痰中出现相应在的病原菌，如金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、结核分杆菌等。可取痰作涂片染色检查，最常用的是革兰氏当。还可进行培养，当有致病生长时需作药物敏感试验，对选择敏感的抗菌药物有帮助。
当怀疑结核感染时可采用：
（1）抗酸染色；
（2）金胺O染色；金胺O为荧光染料，可使结核分支杆菌着色，较经曲的抗酸染色阳性率高；
（3）结核分支杆菌富集试验，是采用沉淀或漂浮法，使痰中结核分枝杆菌富集后粉笔片染色检查，阳性率较直接涂片法高。
如怀疑为支原体肺炎时，可于痰粉笔片进行直接或间接荧光抗体染色检查，有助于早期诊断。
四、注意事项
近些年，随着微生物事件的频繁发生，使微生物检测行业的发展引起高度关注，那么，在进行微生物检测时，一定要注意检查过程的无菌操作，要在洁净台和操作器皿上的消毒，还要注意人员卫生和环境的卫生，接下来，就带大家一起去了解一下，微生物检测的注意事项具体有哪些？
在进行微生物检测服务的实验开始之前，一定要制定好实验计划和操作程序，将有关数据的计算提前做好，并准备好所需器材和物品，清点无误后将其放置操作场所内，如培养室、超净台等，然后开始消毒，切记要避免开始实验后，由于所需物品准备不全而往返拿取，进一步增加污染机会。
微生物检测过程中，原则上是和进行外科手术的要求一致，由于平时只需要做观察，不必进行复杂的培养操作，因此，可以穿细胞培养室内紫外线照射30min的清洁工作服来进行，除此之外，在利用超净台进行操作时，需要整只手臂深入箱内，因此，必须穿着长袖的清洁工作服，并且在开始操作之前，必须要用含量为75%的酒精对手进行一定的消毒。
若是在微生物检测的时候将手不小心触及或者是可能沾染到一定量的污染品，一定要用消毒酒精或者消毒液进行洗手，再进行微生物检测的时候，需要多次出入培养室，这种情况也是需要使用消毒酒精或者消毒液洗手的，出入过程中，除了洗手消毒以外，还要戴好口罩，穿戴好消毒衣帽。