徐俊峰
沙县总医院 检验科 福建三明 365000
摘要:目的:通过分析乙肝病毒荧光定量PCR检验结果,为乙肝诊治提供依据。方法:研究时间:2020年5月1日-31日,研究对象为100例乙型肝炎患者,患者均实施荧光定量PCR检验以及实验室血清学检查,分析检验结果。结果:乙型肝炎病毒血清学标志物(HBV-M)表达模式中大三阳阳性率最高,同时对应乙型肝炎病毒含量水平最高,较其它模式相比均有统计学意义(P<0.05)。结论:荧光定量PCR检验乙肝病毒可作为乙肝诊断的重要依据,为乙肝的治疗提供数据支持。
关键词:乙肝;乙肝病毒;荧光定量PCR;酶联免疫吸附测定方法
乙肝是由乙肝型肝炎病毒感染所引起的一种常见传染性疾病,确诊患者应积极规范治疗,抑制乙肝病毒的复制,减少乙肝病毒对肝脏造成的损伤,降低乙肝并发肝硬化、肝癌等发病风险[1]。血清学检验是进行乙肝患者检查的常用方法,但是操作期间影响因素多,检验人员容易出现职业暴露问题,只能够定性分析,无法做出定量分析[2]。近年来,荧光定量PCR技术能够实现对不同病毒水平的定量分析,便于了解不同患者体内相关病毒复制水平,为病毒性疾病的治疗效果评价提供依据,本文对100例乙肝患者乙肝病毒荧光定量PCR检验结果予以分析,详细如下。
1、资料与方法
1.1一般资料
研究时间:2020年5月1日-31日,研究对象为100例乙型肝炎患者,男性54例,女性46例,年龄:23-76岁,平均年龄(42.60±4.25)岁,患者均明确诊断为乙肝,且检验前3个月内未实施抗病毒治疗,不同患者同意研究,且各项检查资料均有记录。
1.2方法
患者均通过酶联免疫吸附测定(ELISA)进行血清学检查与PCR病毒定量分析,主要仪器试剂有ELISA试剂(上海科华公司),HBV-DNA检测试剂(深圳凯杰生物工程有限公司),Roche Light Cycler 480基因扩增分析仪。
血清学检查:HBV免疫学检测按照HBV-M模式,主要指标有乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb),空腹抽取5ml静脉血液,离心处理,具体操作严格按照试剂盒操作说明书完成。
乙肝病毒含量水平测定:荧光定量PCR方法,选择200μL血清,然后将其与450μLDNA提取液混合,预热处理,100℃下预热10min,离心处理,1200r/min,离心5min,选择20μL上层清液,通过PCR仪器完成分析。
所有操作均由经验丰富人员完成,且满足质控要求。
1.3观察指标
ELISA与PCR检测结果对比及其病毒含量水平。
1.4评价标准[3]
HBsAg、HBeAg、HBcAb三者都是阳性为大三阳。HBsAg、HBeAb以及HBcAb三者都为阳性为小三阳,乙肝病毒阳性标准:HBV-DNA>103copies/ml。
1.5统计学方法
采用统计学软件SPSS22.0分析数据,计量资料±s,检验;计数资料(n,%),2检验。差异存在统计学意义:P<0.05。
2、结果
乙型肝炎病毒血清学标志物(HBV-M)表达模式中大三阳阳性率最高,同时对应乙型肝炎病毒含量水平最高,较其它模式相比均有统计学意义(P<0.05),相关数据见表1。
3、讨论
临床对乙肝主要采取抗病毒治疗措施,通过抗病毒药物的使用帮助患者抑制体内乙肝病毒水平,进而保证患者病情稳定,预防病毒水平较高引起的肝脏进一步损害。
实际在乙肝治疗过程中,因为涉及到多种模型,常规血清学检验只能够定性分析,影响到个性化治疗方案的实施。乙肝病毒水平能够体现出不同患者体内乙肝病毒复制情况以及不同患者所体现出的感染能力,因此,通过明确乙肝病毒的具体含量水平,则可更具有针对性的为乙肝诊断、病情评估与治疗提供依据。
荧光定量PCR是新型检查技术方法,其在不同病毒检测方面具有灵敏度高、特异性强等优势,而且能够直接得到不同患者具体乙肝病毒含量水平,体现出定量分析的乙肝诊治方面的优势。
从本次研究结果方面分析,荧光定量PCR检验结果与ELISA血清实验室检验结果具有一致性,其中大三阳患者阳性检出率达到97.14%,同时对应的乙肝病毒含量水平最高,8例患者为HbsAb(+)、HbeAb(+)、HbcAb(+),提示为急性HBV感后康复,患者体内存在乙肝抗体,其对应的阳性率为0,且病毒含量水平是最低的。同陈艳等[4]研究结论一致。
综上所述,荧光定量PCR检验乙肝病毒可作为乙肝诊断的重要依据,为乙肝的治疗提供数据支持。
参考文献
[1]张赛丽,童林.乙肝病毒DNA与乙肝两对半血清学检测结果分析探讨[J].心理月刊,2020,15(13):157.
[2]胥国强,康清秀,赵琪林.两种荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA的比较与评价[J].医学信息,2019,32(06):174-176.
[3]张艳奇.实时荧光定量PCR法在乙肝病毒DNA及血清标志物检测中的应用价值[J].黑龙江医药,2019,32(01):204-205.
[4]陈艳.实时荧光PCR检验用于乙肝病毒DNA检测的临床价值[J].临床研究,2018,26(10):146-148.