何芳
（广西玉林市妇幼保健院检验科；广西玉林537000 ）
摘要：目的 探讨NIPT技术对筛查胎儿染色体异常的应用价值。方法 回顾性分析2019年1月-12月在玉林市妇幼保健院优生遗传科就诊的74例NIPT高风险孕妇行羊膜腔穿刺羊水染色体核型及CMA检测数据分析。 结果：在74例无创高风险中，检出染色体异常31例，检出率41.89%。其中无创21三体的阳性预测值为84.21%，18三体的阳性预测值为66.67%，13三体的阳性预测值为33.33%，性染色体异常的阳性预测值为37.04%，其他染色体的微缺失或微重复的阳性预测值为9.09%，结论：NIPT 可应用于胎儿染色体非整倍体异常及胎儿CNVs，以达到早发现、早诊断，减少出生缺陷。
关键词：产前诊断；羊水穿刺； 染色体核型分析
中图分类号：R714.53? 文献标识码：A
无创产前检测(non-invasive prenatal testing， NIPT)是指通过扩增孕妇外周血中的胎儿细胞特别是游离胎儿DNA片段，采用高通量测序技术对其进行测序，判断胎儿是否存在染色体异常的方法。NIPT具有简便、无创、特异性高，检测快速等优点，是一种接近诊断的高级筛查方法。本文对74例NIPT高风险孕妇的羊水产前诊断结果分析，探讨NIPT技术对筛查胎儿染色体异常的应用价值。
1 资料与方法
1.1临床资料
2019年1月-12月在玉林市妇幼保健院优生遗传科就诊的74例NIPT高风险孕妇行羊水染色体核型及CMA检测，孕妇年龄21-38岁，孕周18-24周。所有研究对象均签署知情同意书并获得医院医学伦理委员会批准。
1.2方法
1.2.1 G带核型分析
在无菌条件下，经B超引导定位抽取羊水24ml，分3支15ml无菌离心管盛装（2支用于细胞培养，另一支用于DNA检测）送检。羊水经培养、处理、收获、制片、G显带。显微镜下计数 20 个分裂相，分析5个核型，发现嵌合体则加倍计数分析。
1.2.2 CMA检测方法
采用CGX芯片（8x60k，PerkinElmer）对羊水DNA进行全基因组拷贝数变异（copy number variant，CNV）检测，杂交24小时后采用SureScan扫描，图像数据由安捷伦Cytogenomic软件处理，将处理数据导入Genoglyphix在线软件进一步分析，选择大于100kb或大于3个以上连续可信探针的CNVs区域，依据ACMG指南对数据的临床意义解读分为五类：致病性、可能致病性、临床意义不明、可能良性以及良性变异；所参考的数据库包括ClinVar、DECIPHER、OMIM、GeneReview、Orphanet、正常人群数据库DGV，并通过PubMed等文献搜索对检出的CNVs进行分析。对临床意义不明或者可能致病性的CNVs，抽取父母外周血样本进行染色体芯片分析验证遗传或新发变异，以便于临床意义分类。
2 结果
在74例无创高风险中，检出染色体异常31例，检出率41.89%。其中无创21三体的阳性预测值为84.21%，18三体的阳性预测值为66.67%，13三体的阳性预测值为33.33%，性染色体异常的阳性预测值为37.04%，其他染色体的微缺失或微重复的阳性预测值为9.09%，见表1。
.png)
3 讨论
本研究74例NIPT高风险孕妇的羊水产前诊断结果显示，无创21三体的阳性预测值为84.21%，18三体的阳性预测值为66.67%，13三体的阳性预测值为33.33%，性染色体异常的阳性预测值为37.04%，根据黄景等[1]报道，对21、18、13-三体和性染色体异常的阳性预测值分别为95.8%、85.7%、62.5%和53.8%。卢建等[2]报道，对21、18、13-三体和性染色体异常的阳性预测值分别为92.7%、74.7%、48.9%和48.1%。本研究的病例少，有待进一步研究。但基本上21-三体的阳性预测值最高约 81.12%～97.60%，性染色体阳性预测值为 35.29%～71.40%[3]。说明NIPT技术对无创21三体，18三体有较高的检测率。
本研究中，无创提示染色体可能存在重复或缺失22例，检出率为9.09%，其中有1例无创提示3号染色体微重复，CMA结果为3p26.1约940kb的重复，1例无创提示5号染色体微缺失，CMA结果为5p13.3约765kb的缺失。根据黎冬梅等[4]报道，无创产前检测胎儿染色体拷贝数变异25例，其中14例确诊，检出率为56%（14/25）。刘海燕等[5]报道，对CNVs高风险的PPV分别为34.29%。由于染色体核型分析无法检测出小于5Mb的缺失和重复，而CMA能检测100kb 以上的 CNVs（拷贝数变异）。因此，NIPT高风险孕妇行产前诊断应合理选择核型结合CMA进行检测，提高染色体异常检出率。
综上所述，NIPT 可应用于胎儿染色体非整倍体异常及胎儿CNVs，以达到早发现、早诊断，减少出生缺陷。
参考文献：
[1]黄景涛,张艳,吕志华,等.湖北地区无创产前基因检测结果分析*[J].国际检验医学杂志,2019,40(18):2234-2237,2241.
[2]卢建,侯亚萍,黄伟伟,等.471例NIPT阳性孕妇产前诊断结果分析[J].中国产前诊断杂志(电子版),2017,9(4)：14-17.
[3]潘璐,刘艳秋,王欣荣,等.NIPT高风险胎儿的染色体核型分析及染色体微阵列的结果分析[J].江西医药,2020,55(05):600-603.
?[4]黎冬梅,张红云,唐新华,等.无创产前检测胎儿染色体拷贝数变异的临床价值初探[J].中国实用妇科与产科杂志,2019,35(5):554-559.
[5]刘海燕,张胜利,陶华娟,等.无创产前检测筛查胎儿三体及拷贝数变异阳性预测值[J].社区医学杂志,2019,17(14):827-830.
作者简介：何芳、女、本科学历、检验主管技师，主要从事细胞遗传学研究.