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肿瘤病理诊断中冰冻切片技术有何价值

发表时间：2021/4/2 来源：《医师在线》2020年11月22期作者：韩静

[导读] 肿瘤病理诊断中冰冻切片技术有何价值

韩静
（成都华银医学检验所有限公司；四川成都611730）
　　各种恶性肿瘤给当代社会的人们健康造成了巨大的威胁，人们也迫切希望推出各种更加先进有效的临床医学治疗方法来提高恶性肿瘤的治愈率，降低临床病死率。冰冻切片技术在针对肿瘤疾病的病理诊断当中，是一种比较常见的病理学诊断方法，它的主要操作原理是借助于低温将组织冰冻，然后再对病理组织进行切片、固定及染色等一系列具体操作，能够在较短的时间内借助于显微镜观察对于肿瘤组织的性质完成判定，进而判断肿瘤是否存在扩散或者是转移的情况，为后续患者的手术治疗方案和手术范围提供有效的参考信息。这种病理学诊断方法的显著优势即为诊断速度较快且操作较为便捷，因而被广泛推广于肿瘤类疾病的病理诊断过程中。
　　1关于快速冰冻切片技术的介绍
　　文章开头简要提及了冰冻切片技术，是一种在低温条件下快速冷冻组织样本，使组织达到一定硬度之后再进行切片操作技术，这种操作技术能够有效保留组织样本的酶活性和具体结构，更有利于后期的病理诊断。快速冰冻切片技术当中还分为低温恒冷箱冰冻切片、二氧化碳冰冻切片以及甲醇循环冷冻切片等，在这些技术当中目前应用最为广泛且应用效果最优的即是低温恒冷箱冰冻切片。在一系列检测操作完成之后，即可对于患者的病变部位是否存在肿瘤以及肿瘤的具体良恶性和肿瘤转移情况得出较为可靠的结论。借助于广泛的应用，快速冰冻切片技术的优势也得到了临床的重视，譬如保存效果良好、操作简便等等，但在实际制作快速冰冻切片的操作过程中，如若对于其中的相关操作因素未能够明确把握，遵循相关的标准完成操作，譬如快速冷冻时间、温度及放置时长等等，很容易导致病理组织形成冰晶或切片脱落褶皱，对于后续病理组织细胞形态的观察都会造成影响，并降低观察过程中的清晰度。所以切片制作人员一定要提高自身的操作技能，注意相关的不利影响因素，尽量制备清晰度较高且质量较高的切片样本，以便于得出可靠性较高的诊断依据。
　　2冰冻切片的制备方法
　　2.1快速冰冻切片的制备方法
　　制作人员首先会借助于手术操作摘取患者新鲜的活体组织，一般所取的活体组织大小为15mmX15mm、厚度在0.3~0.5厘米之间的长方体。在取活体组织的过程中，还需要注意将活体组织上的毛发和脂肪彻底去除，组织取材过程中避开坏死组织以及出血点。完成取材操作之后，需要将样本放置在冰冻的中间点，然后根据所选的组织样本耐寒程度来调节适宜的温度范围，譬如甲状腺组织的最佳温度范围在-19~-17摄氏度之间，而乳腺组织的最佳温度应在-29~-21摄氏度之间，除了甲状腺组织的存放时间为2.5分钟之外，其他大多数组织样本均存放三分钟。存放完成之后的组织样本需要贴于玻璃板上滴上适量的固定液，放置两分钟左右之后加入苏木精完成染色操作，染色持续时间同样为两分钟，在染色完成之后进行水洗，当冲洗下来的清水能够呈现蓝色，三分钟之后滴入水溶性伊红，然后将乙醇吹干，使用中性树脂对于样本组织进行封片操作，这一系列的操作完成之后即视为快速冰冻切片制备完成。

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　　2.2常规快速石蜡切片制作方法
　　制备人员的组织取材操作与上述相同，在完成活体组织的取材之后，将其放入10%的福尔马林和二甲苯当中煮沸，煮沸之后进行吸水处理，彻底吸水之后将其放入丙酮溶液之后再次煮沸，然后再次吸水，最后将切片放入70摄氏度的石蜡溶液当中，半小时之后即能完成切片制备。
　　3冰冻切片制备过程中的注意事项
　　冰冻切片治疗技术需要在很短的时间内实现对于活体组织的病情正确诊断和判别，所以尽可能快速的制备冰冻切片也是在实际临床工作中提高工作效率和保证诊断结果正确性的关键所在。通过相关文献内容和医学报道，我们发现在临床工作当中，冰冻切片一定要随时处于备用状态，并且切片制备过程中所使用到的冷冻箱也需要定期进行除霜操作，定期清洗放置标本的冷冻托，为了能够及时承接组织冰冻切片操作，各种使用到的设备及仪器都要完全处于备用状态，确保临床诊断工作能够随时顺利开展。
　　有相关研究证实，索取的组织质量与检测结果具有一定关联性，所以在取材操作过程中，工作人员一定要严格按照取材的相关标准和程序完成操作，特别需要注意的是活体组织样本厚度一定要保持在0.2~0.5厘米之间，过薄过厚都是不太恰当的。如果组织的样本过厚，那么冷冻时间也会相应延长，不仅如此，组织样本在冷冻过程中表层会相应变硬变脆，不利于后续切片工作的展开。如果在实际分析过程中遇到了组织过厚的问题，可以将冷冻托取出放置在冰箱外，持续半分钟左右，升温之后开始进行切片操作。如果所取的组织样本厚度较小，在0.2厘米以下，切片过程中很容易触碰到组织的托头，切片刀被破坏，导致切片效果下降。
　　为了确保快速冰冻切片技术的顺利展开，要求病理科相关人员对于整个冰冻技术有系统的了解和准确的掌握。人体组织冻结温度在0摄氏度以下，人体内存在的水分并不是纯净水，而是各种混合物体溶液，含有大量的有机大分子及盐类，所以需要特定的冷冻环境。如果冻结的速度下降，那么冰晶颗粒也会相应增多，从而对于组织造成一定的破坏，所以在冰冻活体组织的过程中，最好能够在最短的时间内完成，能够提高临床诊断结果的正确率和有效率。
4冰冻切片技术在肿瘤病理诊断中的应用价值
　　医学技术在不断提升的同时，病理技术给临床疾病治疗带来了便捷，也使其成为现阶段临床上疾病鉴别和诊断的重要手段之一，其中的冰冻切片技术具有较为广泛的临床应用范围，且具有极高的应用价值。快速冰冻切片技术在完成冷冻操作之后，借助于切片处理则可以得到所需的病理学诊断结果，对比于常规的石蜡切片技术操作方面更加简便和快捷，因此，在临床上得到了重视，并逐步推广。从临床检测时间来看，借助于快速冰冻切片技术，接收到手术标本的病理科人员可以在15分钟之内完成，对患者疾病明确诊断，并在15分钟之后及时将病理诊断结果告知手术医生，以便于手术医生制定明确的治疗方案。比如患者如若需要进行乳腺癌手术，那么根据切片诊断结果，判定患者的病灶为良性纤维瘤，则可以直接宣告手术结束，但如果诊断结果显示患者的肿瘤为恶性乳腺癌，则需要及时告知手术医生扩大手术操作范围，并及时征求患者及其家属的意见是否需要进行乳房切除等其他的治疗方案。从此方面也可见快速冰冻切片技术能够在手术操作过程中为患者的手术治疗方案提供较为可靠的指导性意见，将其作为手术进一步治疗的重要参考依据。
　　还有研究对比了常规石蜡切片与快速冰冻切片技术之间的诊断符合率，样本包括甲状腺、乳腺、淋巴结等，两组之间存在明显的差异性。因此，在今后肿瘤病理诊断过程中，认为应用快速冰冻切片技术能够收获更加快速的诊断，并精准判断肿瘤性质，为此后的手术和治疗提供强有力的理论支持，这一技术的临床应用价值极高，值得推广应用。