任力，张大明，谈涛
湖北省松滋市人民医院 ，湖北省松滋市 434200
【摘要】目的 探讨铜绿假单胞菌高活性β内酰胺酶检测及其耐药性。方法 对2019年1月-2019年12月检出的133株铜绿假单胞菌株进行药敏试验和高活性β内酰胺酶检测，分析铜绿假单胞菌株药敏试验结果、高活性β内酰胺酶检测结果及β-内酰胺酶阳性与阴性菌株药敏试验结果。结果 133株铜绿假单胞菌株中,检出产生高活性β内酰胺酶的28株，阳性率为21.1%；铜绿假单胞菌对头孢哌酮、庆大霉素、氨曲南的耐药性均＞40.0%，对头孢曲松的耐药性＞70.0%；铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物的耐药性＜30.0%；β-内酰胺酶阳性与阴性菌株对亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢哌酮的耐药性相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 临床上应对耐药菌株进行高活性β内酰胺酶检测，以便为临床合理使用抗菌药物提供指导。
【关键词】铜绿假单胞菌；高活性β内酰胺酶；耐药性；分析
铜绿假单胞菌（PA）在健康人体呼吸道、皮肤、消化道、周围环境中广泛存在，是一种条件致病菌，在当前属于全球医院内感染的重要病菌，也是导致免疫力较低、慢性疾病、老年人群并发感染的重要病菌[1]。随着β-内酰胺类、碳青霉烯类抗菌药物的广泛使用与过度使用，使得PA产生了较高的耐药性、多种β-内酰胺酶，进而导致β-内酰胺类、碳青霉烯类抗菌药物耐药机制变得非常复杂[2]。此研究对铜绿假单胞菌高活性β内酰胺酶检测及其耐药性进行了分析，期望可以为临床合理使用抗菌药物提供指导价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取的133株铜绿假单胞菌株来源于本院2019年1月-2019年12月收治的门诊、住院患者的尿液、引流液、分泌物、脓液、痰液等标本分离。所有菌株均经PhoenixTM100全自动微生物分析仪(美国碧迪公司)鉴定。
1.2 方法
1.2.1 对收集的133株铜绿假单胞菌株进行体外药敏试验，对耐药性进行记录，然后进行高活性β内酰胺酶检测，分析阳性菌株与阴性菌株耐药性情况。
1.2.2 参照2015版美国临床实验室标准化委员会(clinical and laboratory standards institute，CLSI)标准，采用Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法对铜绿假单胞菌进行药敏试验，并对结果进行判读。
1.2.3 使用双纸片协同法进行高活性β内酰胺酶检测。使用乙二胺四乙酸络合、金属离子去除金属酶活性，根据其特性将待测菌株制备成菌液（0.5麦氏单位），将其均匀的涂布在琼脂平板（M-H）上，并将亚胺培南纸片（2张）贴在平皿上，纸片之间的距离保持2cm，其中1张亚胺培南纸片上加入EDTA（5μL）。结果显示：含有EDTA的亚胺培南纸片抑菌圈直径与亚胺培南纸片相比增加了6cm，说明该菌株可以产生金属酶[3]。
1.3 观察指标
铜绿假单胞菌株药敏试验结果、高活性β内酰胺酶检测结果、β-内酰胺酶阳性与阴性菌株药敏试验结果。
1.4 统计学方法
使用SPSS22.0软件，X2检验计数资料（%），T检验(士s)资料，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 药敏试验结果
铜绿假单胞菌对头孢哌酮、庆大霉素、氨曲南的耐药性均＞40.0%，对头孢曲松的耐药性＞70.0%，铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物的耐药性＜30.0%，详见表1。
.png)
2.2 高活性β内酰胺酶检测结果
133株铜绿假单胞菌株中,检出产生高活性β内酰胺酶的28株，阳性率为21.1%。
2.3 β-内酰胺酶阳性与阴性菌株药敏试验结果
β-内酰胺酶阳性与阴性菌株对亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢哌酮的耐药性差异有统计学意义（P＜0.05），β-内酰胺酶阳性与阴性菌株对左氧氟沙星、庆大霉素、氨曲南的耐药性差异无统计学意义（P＞0.05）。
3讨论
铜绿假单胞菌是临床常见的条件致病菌，有研究显示，致病菌可以诱发机体多部位、多脏器、多系统发生感染[4]。
研究结果显示，铜绿假单胞菌对头孢哌酮、庆大霉素、氨曲南的耐药性均＞40.0%，对头孢曲松的耐药性＞70.0%，铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物的耐药性＜30.0%。由此可见，铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物存在明显的耐药，主要机制为该菌可以产生金属β-内酰胺酶。因此，在临床诊疗中，加强对病原菌的检测、鉴定及进行药敏试验对临床合理用药是极为重要的。
综上所述，对耐药菌株进行高活性β内酰胺酶检测是必要的，其可以为临床合理使用抗菌药物提供指导。
【参考文献】
[1]余湛,王军,何飞,等.2015—2017年重症监护病房患者分离菌监测及耐药性分析[J].南京医科大学学报(自然科学版),2019,39(08):140-145.
[2]Zhanel G G , Golden A R , Zelenitsky S , et al. Cefiderocol: A Siderophore Cephalosporin with Activity Against Carbapenem-Resistant and Multidrug-Resistant Gram-Negative Bacilli[J]. Drugs, 2019, 79(12):271-289.
[3]周俊立、张文萃、王莹莹，等.肺部感染患者多重耐药铜绿假单胞菌的耐药谱与特征[J].中华疾病控制杂志,2020,24(09):60-64+76.
[4]梅清,耿士窠,房晓伟,等.头孢他啶-阿维巴坦联合多黏菌素E对广泛耐药铜绿假单胞菌的体外抗菌活性[J].中华危重病急救医学,2019,31(10):1212-1218.
任力，男，1968年生，副主任技师，主要从事临床检验和实验室管理工作。