白莹
古浪县疾病预防控制中心 甘肃古浪 733100
摘要：艾滋病（AIDS）是一种免疫缺陷性疾病，感染HIV后，病人的免疫系统遭到破坏，对病人的健康危害极大。目前，针对该病没有特效药物，因此，该病的临床检测是防治AIDS的一个重要环节，通过HIV的临床检测，可作为治疗方案和用药的依据，再加上HIV通过血液、唾液传染，对临床检测的要求非常高，不容许出现任何差错，以免对检测对象造成不良的影响。
关键词：艾滋病；临床检测；艾滋病检测
在HIV临床检测中，可对发病不同时期的病人，进行其血清中HIV的检测，将检测的结果作为判断AIDS患者的依据。但是在实际的检测中，需要面对两个问题，一个是HIV抗体结果的不确定性，另一个是AIDS的“窗口期”，在检测过程中，需要使用辅助诊断的对策，例如，抗原检测和核酸检测，以保证检测结果的准确性。
1.HIV临床检测中存在的问题和解决对策
1.1试剂盒
试剂盒是检测的用品之一，其质量与检测结果有着直接的关系，需要在AIDS临床检测中，保证试剂盒的绝对质量，以防止检测结果出现偏差。第一，试剂盒在选择时，应选择通过国家药监局审核后的试剂盒，或者是通过国家艾滋病预防与控制中心验证后的试剂盒；第二，有效日期，在使用试剂盒时，要再三确定试剂盒的使用期限；第三，确定有效期后，需核对试剂盒的批号，不同批次的试剂，严禁混合使用。
1.2准备阶段
在临床检测中，应提前从冰箱中取出酶标板、稀释液，等到两者的温度与室温接近时，才可用于HIV临床检测。还需要注意一点，在检测之前，要细致观察和检查酶标板，确定其盖膜上是否有裂缝，如果发现异常，需立即更换新的酶标板，以避免酶标小球体积和颜色发生改变，影响到检测结果的准确度。
1.3加样阶段
全自动酶标仪是进行酶联免疫吸附试验的主要设备，其具有自动加样的功能，因此，酶标仪的运行状态对HIV检测有着一定的影响，需要做好酶标仪的日常养护工作，以保证加样系统运行的稳定性，在酶标仪使用后，应做好清洗工作，使加样针运行无阻碍，以保证样量加入的精确度。此外，在检测中，需认真核对编号，以保证样本管与酶标仪上编号位置的一致性，并查看加样是否到位。如果没有使用全自动酶标仪，采用手工加样的情况下，需要注意吸样量的准确控制，以及加样后，样品是否在酶标板的正确位置，加样阶段需要注意加样是否到位准确，以防止加样失误引起检测结果的不准确。
1.4温育条件
温育是指在加样后，使用水浴酶标板的方法进行AIDS的检测，在温育时，酶标板要单独放置，不可叠放，水面要低于酶标板，以便加热的均匀性。水温要提前进行调整，以确保温育的时间。另外，封板时使用的盖膜，严禁重复性使用。
1.5洗板
酶标板温育后，进入洗板阶段，应遵循说明书中的要求，进行洗板次数、浸泡时间等设定。使用的洗板机要做好日常清洁工作，尤其是吸液孔，在洗板之前需要查看，或者是疏通，防止吸液孔被堵塞，从而避免洗板不彻底问题，造成检测结果的不准确。
1.6质量控制
AIDS临床检测质量控制环节分为内部和外部两个方面的控制，内部质量控制，主要针对的是试剂盒，包括了试剂盒的生产日期、有效期，以及不同批号不可混用；外部控制，主要是指血清控制，要保证血清与患者一一对应，不可出现任何疏漏。每进行一次AIDS检测，都要进行质量控制，确定检测质量是否在可允许的范围内，如果出现偏差，则要重新进行一次检测，以保证检测结果的准确性。
在临床检测中，经常会遇到一些意外情况，也就是检测对象没有感染AIDS，但自身患有免疫性疾病、怀孕，或者是患有特定的疾病等，身体中会形成一些抗体，其形成的过程与HIVp24核心蛋白抗体的反应大部分相同，在临床检测中会出现较低的吸光度值，当检测中遇到这种情况时，应及时告知接诊医生，了解检测对象的情况，判断是否需要进行确证检测，这种情况下，检测结果一般都为阴性，但也不可掉以轻心，需对检测结果负责，不可随意出具检测阴性报告，防止出现漏检问题。
2.核酸检测
目前，在AIDS临床检测中，使用较多的是第四代HIV抗体试剂，该试剂的检测结果准确度较高，并可用于HIV感染早期的检测，也就是AIDS感染者还未出现任何症状，通过HIV抗体检测，就可准确的进行确诊，对于早期的AIDS患者检测有着非常大的意义，以实现早发现、早控制。核酸检测的过程非常复杂，对检测人员技术水平要求较高，以及对检测条件、检测设备、操作规范等，都有着极为严格的要求，需要检测人员在实际的检测工作中，注重于细节上的控制，以提升检测结果的精准度。
2.1标本采集
第一，使用的是EDTA抗凝采血管，其采集后，标本会得到良好的保存，质量损失较小，获取的RNA水平良好；第二，采血后，要确保在6h内，完成血浆分离，确保分离效果，以及在分离后，需立即冻存；第三，根据相关统计数据表明，分离后的血浆样本，冻存在零下20℃中，样本中的HIV RNA含量，在保存12周后，与冻存在零下80℃的血浆样本相比，会有略微的下降，而冻存20周后，会大幅度的降低，最高可达到80%，因此，在标本采集后，要在短时间内完成HIV检测，否则需要冻存在零下80℃的环境中；第四，为了避免出现多次解冻检测的情况，应在血浆分离后，可分别装入多个血管中。
3.CD4+T淋巴细胞检测
现阶段主要使用的检测手段是流式细胞术，CD4+T细胞的数值变化较大，会对检测结果造成一定的影响，在检测时，应注意以下几点，第一，需使用EDTA抗凝采血管，采集血清，保证采集到标本的质量，在采血过程中，要进行适当的摇晃，防止血清出现凝块；第二，建议采集后，在2h内完成检测，如果未能在2h内完成检测，在室温的条件下，不可放置超过48h，必须在48h内完成检测；第三，在加入抗体环节，要注意枪头不可接触到微球，避免微球被枪头带出，进而减少管中微球的含量，增加CD4+T的计数，影响到检测的结果；第四，加样量要控制精准，建议使用反向加样法，另外，加样枪需计量准确，在日常工作中，应定期校正；第五，检测中使用的流式细胞仪，需保证操作的规范化，按照说明书操作，在完成检测后，使用次氯酸钠清洗，必要情况下，可使用含有去蛋白的洗液加洗一次。
结语：在HIV临床检测中，对检测人员的专业性和业务能力有着非常高的要求，需要检测人员严格执行国家AIDS检测标准和要求，并对各个环节进行严格的质量控制，像试剂盒，需要确保试剂盒有药监局的批准，加样阶段，要注意加样量和加样位置的准确性，以及质量控制阶段，需注重内部质量和外部质量的共同控制，保证在任何一个阶段，都不会出现任何遗漏和操作失误，以确保检测结果绝对的准确性，进而为检测结果和检测对象负责。
参考文献：
[1]朱召芹.新版《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》中临床实验室检测部分更新内容解读[J].上海医药,2020,552(11):21-24.
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