姚鹏程 王宝庆
牡丹江市食品药品检验检测中心 157011
摘要：本文主要采用高效液相色谱法同时对市场上销售的白酒中的甜蜜素进行测定，通过加标实验结果表明白酒中甜蜜素的检出限能够达到GB 5009.97-2016第二法（高效液相色谱法）中检出限≥0.010g/kg的要求，3个浓度的回收率平均值分别为：白酒89.6%，96.7%，101.4%，由此得出结论：高效液相色谱法可以用于白酒和中的甜蜜素的检测，但其检出限明显高于高效液相--质谱联用法的检出限。
关键词：甜蜜素、白酒、高效液相、检测
1引言
甜蜜素，其化学名称为环己基氨基磺酸钠，是一种市场中常用的甜味剂，其甜度是蔗糖的30～40倍。因其具有适口感强、价格低廉、高甜度的特点[1]，广泛用于是日常食品生产过程中。而我国白酒有几千年的历史，在白酒中加入甜蜜素可以提高白酒的回味感和甜感，对于改善白酒的口感至关重要。而在我们国家标准《GB 2760-2014食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中明确要求白酒中不得使用甜蜜素，在配制酒中可以限量使用。消费者如果经常饮用经常食用甜蜜素含量超标的饮料或其他食品, 就会因摄入过量对人体的肝脏和神经系统造成危害,特别是对代谢排毒能力较弱的老人、孕妇、小孩危害更明显[2,3]。
国家标准《GB5009.97-2016》中注明：本标准液相色谱-质谱/质谱法适用于白酒、葡萄酒、黄酒、料酒中环己基氨基磺酸钠的测定。但是由于液相色谱 --质谱仪仪器昂贵，有少数地区不能全面推广使用。邵铁锋, 等[4]采用高效液相色谱法对黄酒中的甜蜜素进行了研究，笔者则通过高效液相色谱法对白酒中甜蜜素的进行了方法学研究，结果表明，此方法使用仪器普遍、方法简便、定量快速, 完全可用于白酒中甜蜜素快速检测要求。
2材料与方法
2.1 仪器与试剂
2.1.1仪器
U3000高效液相色谱仪（美国Thermo）--紫外检测器，Chromeleon 7工作站；AL204电子天平（瑞士Meteler）；DKZ-2B电热恒温水浴锅（上海一恒）
2.1.1试剂
乙腈（色谱纯）；正庚烷（色谱纯）；硫酸（优级纯）；甜蜜素（纯度≥99%上海安谱）其余试剂为分析纯。
2.2方法
2.2.1标准溶液的配制
准确称取适量甜蜜素标准品于容量瓶中，依次用水稀释浓度分别为10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL.临用现配。
2.2.2前处理
准确称取25.0g白酒试样于烧杯中，用氢氧化钠溶液调至pH7～8，60℃水浴加热30min以除去酒精，放至室温，用水定容至50mL，移取10mL上述溶液，加入2.0mL硫酸溶液（1+1）,5.0mL正庚烷和1.0mL次氯酸钠（有效氯含量≥50g/L）,震荡1min后静置分层，除去水层后在正庚烷层加入25mL碳酸氢钠溶液（50g/L）,震荡1min后静置分层，取上层有机相经0.45μm滤膜过滤后上机检测。
2.2.3仪器条件
色谱柱：Agilent C18柱（5μm,250mm×4.6mm）；流动相：乙腈+水（70+30）；流速：0.8mL/min；进样量：10mL；柱温：40℃；检测波长：314nm。
3结果与讨论
3.1检出限、系统适应性和线性范围
通过以信噪比S/N=3确定最低检出限，得出甜蜜素最低检出限为0.008g/kg；对甜蜜素浓度为20μg/mL的标准溶液连续5针的峰面积进行计算，得出RSD（%）=1.2；以甜蜜素标准溶液的浓度为横坐标,以环己基氨基磺酸钠衍生化产物 N , N -二氯环己胺峰面积为纵坐标,绘制标准曲线，结果如图1所示。甜蜜素在浓度10～200μg/mL范围内具有较好的线性关系。
图1甜蜜素标准曲线图
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3.2回收率与精密度
取3份白酒空白样品，向其中分别添加甜蜜素标准溶液，制成添加量浓度分别为10μg/mL、100μg/mL、200μg/mL三个水平浓度的样品溶液，每个水平进5针，取平均值后计算回收率和相对标准偏差（RSD），结果见表1.在重复性条件下获得的甜蜜素的平均回收率89.6%～101.4%，相对标准偏差为1.5%～3.7%，回收率和精密度符合实验方法学的要求。
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4结论
本研究采用高相液相色谱法对白酒中的甜蜜素进行了实验的方法学研究，结果表明，高相液相色谱法完全满足对白酒中的甜蜜素的测定，在没有更高灵敏度和准确性的液相色谱-质谱联用仪的前提下，可以采用该方法进行测定。但是其检出限过高是其需要解决的问题，有待于进一步研究解决。
参考文献
[1] 袁超，王玉军．浅析食品中甜蜜素的检测方法[J]中国调味品，2016，(2)：15l-154．
[2] 曹慧，孙喜凤. 甜蜜素在食品中的应用及检测[J]. 现代食品， 2018，(9):30-32.
[3] 牛丽丹. 食品中食品添加剂甜蜜素的使用情况及监管建议[J]. 山东化
工，2018，47(20): 100-101.
[4] 邵铁锋，等．高效液相色谱法测定黄酒中甜蜜素 [J]. 中国酿造，2004，(12) : 31- 32.