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食品卫生微生物检验中培养基的质量控制对策

发表时间：2021/5/19 来源：《基层建设》2020年第35期作者：柴小高

[导读] 摘要：在对微生物进行检验时，经常会用到培养基，培养基质量与微生物检验工作的成败有着直接的关系。

        浙江红衢源生物科技有限公司
        摘要：在对微生物进行检验时，经常会用到培养基，培养基质量与微生物检验工作的成败有着直接的关系。因此，在进行食品卫生微生物检验时，要提高培养基的保存水平，以提升培养基配置使用的正确性。本文就食品卫生微生物检验中培养基的质量控制进行研究，以期能够提高食品卫生微生物检验的水平。
        关键词：微生物检验；培养基；控制措施
        近年来，我国的食品安全事故出现的概率正在逐渐增长，这一情况给我国人们生活带来的影响非常大。因此，为了提高食品的安全性，必须要对食品进行微生物检验，检查食品中是否存在微生物残留，以提高食品生产的清洁性和安全性，减少微生物对食品造成的污染。
        一、培养基的制备及水化
        1培养基制备
        在进行培养基制备时，要严格按照处方的要求进行制备，并且还要做好培养基制备记录，以保障培养基的质量。培养基制备处方中的大部分成分都是生物制品，统一厂家不同批次或不同厂家的生物制品存在一定差异。因此，在进行培养基制备时，要严格控制培养基中各种原材料的质量，并且还要根据培养基制作的实际情况添加生物制品，严格按照规定的程序进行培养基制备，以保障培养基质量能达到相关规定的要求。另外，在培养基制作时，还要对制作过程中使用的方法，以及生物制品的特征进行详细记录，在对培养基进行分装灭菌处理之前，要保证培养基内部生物制品分布的均匀性，或者处于互溶状态。
        2培养基水化的容器
        在对培养基进行水化处理时，要明确培养基水化使用的容器，不能使用铁锅或者铜锅，以避免离子进入培养基的内部，降低培养基质量。并且铜锅和铁锅加热之后，还会释放出碱性物质，这些物质对培养基内部环境造成的影响非常大，会在一定程度上改变培养基内部的PH值。在进行培养基水化时，还要明确培养基的大小，要保证培养基容器的大小整体大于复水后培养基的体积，保证培养基有足够的空间，避免培养基在水化过程中出现溢出的问题。
        3培养基水化的用水
        在培养基水化的过程中，操作人员要注意培养基水化使用的水，必须是同质水或者是蒸馏水，这一措施主要是为了避免其他类型水抑制培养基内部微生物生长。比如：如果操作人员使用的是自来水，那么培养基中的微生物的生长就会受到氯等物质的抑制。培养基水化时逐渐加入适量的水，可先将1／3水量置入容器中，震摇后，再加入剩余的2／3水量，并顺势将附着于容器壁的培养基粉冲下。
        4培养基的称量上要使用专用的角匙
        在进行称量时一定要注重操作的规范性，不要让培养基吸入粉末或者有交叉感染的情况。培养基比较容易发生吸潮的情况，一旦发生潮化问题，就会导致培养基的pH值发生变化，影响培养基的质量。所以在培养基称取时应该要选择低湿度环境，按生产商提供的有关说明进行配制。
        二、培养基的溶解及灭菌
        1分装灭菌前准备工作
        在培养基的分装灭菌之前，应该要进行水溶加热溶解的工序，在使用电炉等相关工具进行对培养基的煮沸时，要用小火来进行避免培养基出现焦化或者爆沸溢出，而且还要用搅拌棒进行搅拌，让受热均匀。如果出现焦化或者溢出的情况，应该对该培养基弃用，重新使用新的培养基。
        2培养基的灭菌
        一般培养基采用的灭菌方法是湿热灭菌，就是运用高压蒸汽对细菌进行灭杀。已配制好的培养基必须立即灭菌，配制培养基的用水、容器和干粉中均含有大量的微生物，溶解均匀后，要避免微生物生长繁殖而消耗养分，改变培养基的酸碱度，产生有毒或未知物质。
        另外要注意严格控制灭菌的温度，因为过于高温会破坏掉培养基中的营养成分，例如氨基酸和维生素等重要的营养成分。高温还可以让某几种物质在高温情况下发生化学反应，让本来物质的化学性质发生变化，影响到培养基的质量，还可能会产生出有毒的物质，所以在灭菌过程中，温度控制是非常关键的因素。

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        3影响灭菌效果的因素
        高温灭菌锅的使用尽量避免锅内有过多物质造成灭菌工作的死角，让有害物质不能有效地清除。还需要对压力表定期进行检查，以半年作为一个检查周期。还要对灭菌的效果进行跟踪和检验，一般常用的方法有生物指示和化学变色纸片等。
        三、平板设备
        1培养基的pH值
        培养基的pH值，这是一项非常关键的因素，只有在合适的pH值中培养基内的物质才可以正常地生长和繁殖。而具体的pH值是指在培养基灭菌之后，投入使用前的pH值，并且要对pH值进行紧密的测量，测量工具主要是精密酸度计和胶体表面测量电极。
        2培养基的保温工作
        在灭菌工作完成之后应该马上对培养基进行冷却，不要让培养基长期放在灭菌锅中，造成了灭菌工作的过度。在水浴锅中保温时，水温要稳定在45至55摄氏度。在平板倾注时使用较低温度，这样可以尽量减低样品中微生物的损害。
        3添加补充物质的工作
        在添加物质过程中避免加入有害物质，要采取适当的措施严格按照产品说明进行添加工作。热敏剂补充一般都是在培养基47摄氏度时进行。添加补充物质时室温应为40摄氏度左右，在加入培养基之后尽快地进行分装和倾注。
        抗生素溶液也可以在合适的包装下进行冻存。但是进行解冻后要再次进行冻存，就可能会影响到抗生素的活性，所以在进行物质添加的过程中尽量使用活性物质。
        4培养基倾注的角度
        平板中培养基的厚度应该为2毫米。90毫米的平板应该要倾注15毫升的培养基，而平板的防止应该要放在温度低而且平整的地方让琼脂更好地凝固。
        四、培养基的接种和培养
        平板在接种使用时，表面上一定要杜绝出现潮湿水珠，不然会容易出现菌落的扩散，难以进行计算工作。而且要注重培养基的温度控制，要把平板平放到25摄氏度到50摄氏度的烤箱内进行烘干，让培养基表面的水珠完全烘干，但是不要温度过高，发生过度加热的情况。对于培养基的使用要等到回复室温之后才可以进行使用，而且在使用前一定要进行全面的检查工作，看是否有菌落的形成、培养基颜色是否发生改变、固态培养基表面有无干裂现象、有无脱水现象等，一旦出现异常，该培养基应作废弃处理。
        五、要做好培养基的贮存工作
        培养基贮存的地方应该要放在阴凉干燥的地方，要避免阳光的直接照射，不要让培养基发生吸潮、颜色改变等情况，一旦发生了要马上弃用。而在对于培养基使用应该要在平板倾注后马上进行使用。贮存的环境应该要避光和在4摄氏度到12摄氏度冰箱密闭保存，减少培养基中有效成分的挥发，保证检出率。
        六、总结
        综上所述，在对食品中的微生物进行检测时，经常会受到各种因素的影响，这些因素不仅会降低微生物检验工作的质量，严重的甚至会导致微生物检验结果出现错误、偏差，使得食品安全无法得到有效保障。因此，在对食品卫生微生物进行检验时，必须要采取有效措施控制培养基的质量，以提高人们的生活质量。
        参考文献：
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        [2]许承胜.探析食品卫生微生物检验中培养基的质量控制[J].世界最新医学信息文摘,2018,18(66):193.
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        [4]赵永群.食品卫生微生物检验中培养基的质量控制[J].当代医学,2012,18(32):155.
        [5]刘春梅,蔡芷荷,吴清平.食品卫生微生物检验中培养基的质量控制[J].中国卫生检验杂志,2007(04):700-701.