徐妮芝，秦鑫，顾虎，丁杰，吴怡，胡喆
杭州市质量技术监督检测院，杭州市余杭区质量计量监测中心
摘要：结晶紫属于三苯甲烷类染料，具有致畸性、致癌性、致突变性以及遗传毒性，被认定为影响人类健康的主要有机污染物，对人体健康存在潜在威胁。近年来随着结晶紫相关毒性的研究，日用消费品中结晶紫检测研究也越来越受到大家关注。本文阐述了目前常用的日用消费品中结晶紫及对人体的危害，增强对结晶紫的认知，分析了结晶紫的提取以及检测方法，为建立日用消费品中结晶紫分析检测方法提供理论参考。
结晶紫具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变作用，进入机体后，通过生物转化在组织中残留，现在已被被欧美国家、日本列为不得检出的禁用药物。随着大家对结晶紫危害的不断认识，目前加强结晶紫检测技术研究尤为重要特别是和人们密切相关的日用消费品中结晶紫检测研究变得更加突出。建立简捷快速测定日用消费品中结晶紫染料的分析方法，并应用于实际，具有十分重要的现实意义。
1 日用消费品中结晶紫现状
结晶紫是一种合成的三苯基甲烷类工业染料，自1930年以来，许多国家就将其广泛用作水产养殖业中的杀虫剂和杀菌剂，用来杀灭体外寄生虫和鱼卵中的霉菌。现在结晶紫还用于纺织工业中做丝绸、羊毛、皮革和纸张的日用消费产品的染料。2018年4月26日，欧盟成员国同意修订REACH附件XVII中对包含结晶紫在内的33种在服装、纺织品和鞋类等日用消费品中使用CMR（致癌、致突变和生殖毒性）物质的限制。被REACH法规附件XVII列为CMR类限用物质，在未经授权许可下不得生产、销售或使用。该法律将在欧盟官方公报上发布的24个月后生效。
2 结晶紫检测技术研究
目前，结晶紫主要是利用高效液相色谱法和高效液相色谱-质谱法来进行分析、检测。也有使用普通分光光度法、薄层色谱法和竞争性酶联免疫法等进行检测的报道。
2.1 高效液相色谱法
Larry G. Rushing等采用乙腈萃取、中性铝层析柱预分离纯化后，通过PbO 2 柱前氧化，紫外检测器同时测定孔雀石绿、结晶紫、无色孔雀石绿和无色结晶紫，回收率分别为75.4±3.0%，61.3±4.1%，72.6±3.7% 和87.9±2.5%。
陈建伟等采用浊点萃取，建立了高效液相色谱（二极管阵列检测器）同时测定了虾肉球中孔雀石绿和结晶紫残留的方法。该方法添加回收率范围分别为75.5％～80.2％(孔雀石绿)和81.4％～89.6％(结晶紫)，相对标准偏差(RSD)分别为2.3％～3.1％(孔雀石绿)和1.5％～3.3％(结晶紫)。该方法的检测限分别为孔雀石绿2.0μg/kg、结晶紫1.0μg/kg。
2.2 液质联用法
刘桂华等采用同位素稀释高效液相色谱-质谱法测定鱼体内的孔雀石绿及其代谢物，方法的检出限为0.1μg/kg，在1.0、1.5、2.0μg/kg 3个浓度水平，加标回收率为94%～104%。
Kirsi Halme等采用高效液相色谱-电喷射质谱法检验虹鳟鱼体内孔雀石绿的残留，孔雀石绿和无色孔雀石绿的检出限分别为0.13μg/kg和0.16μg/kg，回收率分别为58%～65%和59%～68%。
2.3分光光度法
I. ?afa?ík等采用铜酞菁染料活化磁性载体，从水中吸附、分离孔雀石绿和结晶紫，在紫外可见分光光度计上进行检测。经固相萃取浓缩，孔雀石绿和结晶紫分光光度法测定的检出限均可达 0.5μg/L。
2.4竞争性酶联免疫法
龚朋飞通过无色孔雀石绿全抗原的合成和抗体的制备，建立了竞争性酶联免疫测定无色孔雀石绿的新方法。该方法可采用试剂盒的形式进行，检测时间为 4h，定量检测范围是 0.4～1000ng/mL，样品回收率为 83.2%～122.0%。
3 结论
随着现代分析仪器及计算机技术的飞速发展，高效液相色谱、气相色谱和质谱技术取得了举世瞩目的进展，各种先进的检测方法也已被有效地应用到结晶紫的分析检测中，其中最具有代表性的是二维色谱的应用。鉴于日用消费品中结晶紫关注程度的不断升级，建立日用消费品中结晶紫准确高效的检测方法势在必行。
参考文献
[1]Larry G. Rushing, Harold C. Thompson. Simultaneous determination ofmalachite green, gentian violet and their leuco metabolites in catfish or trouttissue by high performance liquid chromatography with visible detection[J].Journal of Chromatography B, 1997, 688: 325～330.
[2] 陈建伟，姚志云，毛健伟，等．浊点萃取一高效液相色谱法测定虾肉中孔雀石绿和结晶紫残留的研究[J]．南京农业大学学报，201033(1)：94～98
[3]刘桂华，姜杰，谢建滨等．同位素内标稀释高效液相色谱．质谱法测定鱼体中的孔雀石绿及其代谢物．现代预防医学，2006(33)：124—126.
[4] I. ?afa?ík, M. ?afa?íkov?. Detection of low concentrations of malachite green andcrystal violet in water[J]. Water Research, 2002, 36: 196～200.
[5] 龚朋飞. 孔雀石绿单克隆抗体的制备及其检测试剂盒的初步研制[硕士学位论文]. 长沙: 湖南农业大学, 2005.
基金项目：
浙江省市场监管系统科研项目（20190119）