莫霄云，赵胜玲2，张涨2，黄金琳2
1.广西中医药大学第一附属医院 ，广西 南宁，530001；
2. 广西中医药大学，广西，南宁，530001
摘要：目的：研究固护心阳法心肌缺血大鼠的保护作用及相关炎症因子的影响。方法：选取清洁级大鼠45只，随机选取10只为假手术组，其余造模；造模组采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血再灌注损伤大鼠模型。将造模成功的大鼠按随机数字表法分为3 组:模型组、培哚普利组、加味真武汤组，以术后第7天和第28 天为观察点。结果：（1）第 7、28 天，与假手术组相比，模型组、培哚普利组、加味真武汤组大鼠 LVEF 、LVFS显著降低( P＜0.01) ，第7天模型组、培哚普利组、加味真武汤组大鼠 LVESV显著升高( P＜0.01) ，第28天模型组、培哚普利组、加味真武汤组大鼠 LVESV 和 LVEDV 显著增大( P＜0.01)；与模型组相比，培哚普利组及加味真武汤组第28天LVEF、LVFS升高，LVEDV 和 LVESV 显著降低( P＜0.01)。结论：固护心阳法可通过抑制大鼠心肌缺血再灌注损伤引起的炎症性反应，对缺血性心肌具有保护作用，并可改善心功能。
关键词：固护心阳法；心肌缺血大鼠；炎性因子
心肌缺血再灌注损伤(Myocardial ischemia /reperfusion injury，MIRI) 是临床上治疗心肌缺血，恢复心肌血供不可避免的心肌损伤过程，其作用机制十分复杂。MIRI的发生严重降低了血流再通的临床获益,如何有效减轻再灌注损伤成为临床研究热点。固护心阳法对心肌缺血具有良好的临床疗效，本研究进一步通过动物实验探讨固护心阳法对心肌缺血大鼠心功能的影响，并揭示其对相关炎性因子的影响。
1. 材料与方法
1.1 实验动物
清洁级（SPF）大鼠45只，体重180-220g，湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，合格证号SCXK（湘）2019-0004。
1.2 药物与试剂
固护心阳法--加味真武汤由人参6g, 熟附子( 先煎)10g，干姜10g, 三七5g,白术12g，白芍15g，茯苓15g，黄芪30g, 当归10g, 生地15g, 甘草10g组成。煎煮2次, 每次2.5h, 将水煎液过滤、浓缩, 调整浓度为2g/mL, 放置4℃冰箱中备用。
培哚普利组选用培哚普利，商品名：雅施达，规格:4mg*10片，用前溶于去离子水,浓度为0.04 g/ml。
1.3 方法
选取清洁级（SPF）大鼠45只，大鼠适应性喂养2 d后随机选取10只为假手术组，其余造模；造模大鼠通过结扎冠状动脉左前降支建立心肌缺血再灌注损伤模型[1]。各组大鼠禁食、不禁水12 h后,腹腔注射10%水合氯醛(3 mL/kg)麻醉后仰卧固定,颈部、心前区备皮,碘伏消毒,切开颈部皮肤,分离气管,以盐酸利多卡因浸润后,行气管插管,连接动物呼吸机。
1.4 分组及给药
手术后共成模30只。将造模成功的大鼠按随机数字表法分为3组:模型组、培哚普利组、加味真武汤组，以术后第7天和第28 天为观察点。各组于造模成功后24 h内开始灌胃给药(10mL/kg) ，每天1次。假手术组和模型组均以与给药组等容量的无菌蒸馏水灌胃。
1.5 指标检测
1.5.1 超声检测心脏左室功能及血流动力学
每组取3个连续心动周期，计算平均值。分别检查心脏左室射血分数( LVEF) 、左室短轴率( LVFS) 、左室收缩末期容积( LVESV)、左室舒张末期容积( LVEDV)，各组数据前后对比差异。
1.5.2 血浆心肌酶测定
各组大鼠在造模成功后第7天及第28天于颈总动脉取血5mL,4 ℃条件下3 500r/min离心10min，取上清液备用，按照试剂盒说明书的方法测定血浆中AST、LDH、CK含量。
1.5.3 炎性因子测定
各组大鼠在造模成功后第7天及第28天于颈总动脉取血5mL,室温静置2h,4 ℃条件下3000 r/min离心5 min,分离血清,即刻按照试纸检测血清TNF-α、IL-6、CRP等炎性因子水平。
2.结果
2.1各组大鼠心脏左室超声结果比较
与模型组相比，培哚普利组及加味真武汤组第28天LVEF、LVFS升高，LVEDV 和 LVESV 显著降低( P＜0.01)。结果见表1、表2。
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与假手术组比较##P<0.01;与模型组比较**P<0.01。
2.2 各组大鼠血浆心肌酶的比较
治疗第28天，培哚普利组与加味真武汤组AST、LDH、CK下降均较模型组明显，且加味真武汤组下降更显著，差异有统计学意义（P＜0.05）。
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2.3 各组炎性因子的比较
治疗第28天，培哚普利组与加味真武汤组CRP、IL-6、TNF-α下降均较模型组明显，且加味真武汤组下降更显著，差异有统计学意义（P＜0.05）。
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讨论
近年来，中医药在改善心功能和调节心肌缺血方面取得了极大的进步，针对西医治疗的不足，中医药治疗的进步可以起到有效互补的作用。因心气虚, 无力推动血液在脉道中运行, 则血行瘀滞而导致瘀阻心脉, 致阴寒邪气, 如痰浊、水湿等上乘阳位, 痹阻心脉而致心肌缺血的发生[2]。本研究根据多年经验结合临床试验根据固护心阳法制备了加味真武汤，本方参附姜温阳补气以固护心阳为君药；三七活血化瘀为方中臣药；佐以芪归芍以养血补血，茯苓白术利水消肿，生地滋阴凉血以除瘀热，缓姜附之燥热；甘草调和诸药为使。主要达到:温补心肾，益气养阳，活血通脉，利水消肿的功效[3]。参附相伍能够有效提高血液中IL-10表达水平, 抑制炎性因子的表达，还能有效抑制IL-18和TNF-α的表达水平, 改善心功能水平[5-6]。心肌缺血会导致心肌组织坏死，使心肌酶从心肌细胞中释放出来，造成血清中心肌酶活性升高。肌酸激酶（CK）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH）作为心肌细胞坏死标志物，它们浓度大小可以说明心肌坏死的程度[7-8]。
炎症反应是心肌缺血再灌注引起心肌损伤的重要病理特点之一,当发生心肌缺血再灌注时会产生大量活性氧自由基，并会促发炎症反应，随着心肌组织损伤和组织坏死，发生病变的心肌会被中性粒细胞、单核细胞及巨噬菌细胞浸润，导致血清中炎症性细胞因子升高，而这些炎症性因子的变化情况与组织损伤的程度紧密相关[9]。
综上所述，固护心阳法对缺血性心肌具有保护作用，并可抑制大鼠心肌缺血再灌注损伤引起的炎症性反应，改善心功能。
参考文献：
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[ 基金项目：广西壮族自治区广西中医药大学自然科学研究项目（编号：2019MS017）
莫霄云，女，主任医师，硕士研究生导师，研究方向：老年病中医药治疗研究
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