苏杰 盛皓 孙富喜 毕福立
天津和治友德制药有限公司 天津 301800
摘要：人类皮肤按时间顺序衰老的特征是皮肤厚度减少、皮肤弹性丧失、胶原纤维变性、干燥和皱纹形成，而阳光照射引起的外在老化会导致皮肤深度皱纹、色素沉着和小血管扩张。很多人选择了化妆品进行美容，但化妆品中较多的重金属离子会对人体健康造成损害。越来越多的女性认识到仅仅通过化妆品无法真正保护和美化肌肤，只有内部调理，才能面色红润光泽，肌肤细腻。因此，服用美容饮品达到由内及外的美，已经成为了大多数女性的共识。目前市场上产品大多是单一胶原蛋白产品，功效不明显，因此开发双蛋白辅以植物草本精华的制剂意义重大，既能弘扬中医理论，又能精准补充营养素，达到美容养颜的目的。
关键词：胶原蛋白、弹性蛋白、黑果腺肋花楸、提高水分、延缓衰老、阻垢屏障
胶原蛋白和弹性蛋白是皮肤真皮层里位于表皮下方的两种蛋白质，在光线等因素引起的皮肤生理老化过程中，具有防老化和促再生的作用。胶原蛋白是一种高分子功能性蛋白质，它是皮肤的主要组成部分，占皮肤真皮层80％的比重，它在皮肤中构成了一张细密的弹力网，牢固锁住水分，支撑着皮肤。它由3条肽链拧成螺旋纤维状蛋白质，也是人体内含量最丰富的蛋白质，是人体肌肤细胞外基质重要组成部分。弹性蛋白是一种构成弹性纤维的蛋白质，保持组织结构的稳定性和弹性有所帮助。弹性蛋白在肌肤中扮演橡皮筋的角色，让肌肤有伸展和褶合的能力，其功用就如床垫中的弹簧，负责维持与支撑肌肤的弹性。因此，弹性蛋白决定着皮肤的弹性和柔软性。
黑果腺肋花楸果实富含花青素、黄酮、β胡萝卜素、维生素等多种营养成份及生物活性物质。具有很强的抗氧化性，能够有效清除人体内的自由基，保护生物酶系统免遭破坏，保持人体正常生理机能。此外还具有抗心血管病、抗肿瘤、降血糖、抗老化和抗辐射等作用。
维生素C有组织修补功能，保持血管的完整，促进非血红素铁吸收等所必需，有抗氧化，抗自由基，从而达到美白，淡斑的功效。
合理比例的胶原蛋白和弹性蛋白，辅以黑果腺肋花楸、血橙汁、苹果汁、维生素C等诸多植物草本精华成分，能显著提高受损皮肤中胶原蛋白和弹性蛋白的含量，保持水分、滋润肌肤、保湿，使皮肤光滑，防止皱纹的出现。本文研究的目的是评估含该组合物对皮肤生理学和老化相关的皮肤参数的潜在益处。
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1.细胞外基质蛋白的合成的刺激
分别用0.5mg/ml胶原蛋白或双蛋白组合物温育细胞24小时，然后通过实时PCR确定细胞里面的胶原蛋白-RNA、双糖链蛋白聚糖-RNA和多能蛋白聚糖-RNA的表达，并进行半定量评估。
如上图，细胞外基质蛋白中三种基质蛋白的合成均受两种胶原蛋白水解物刺激，其中相比于胶原蛋白水解物，双蛋白组合物的积极效果分别更为突出，对于除了弹性蛋白之外对皮肤的张力和弹性主要负责的胶原蛋白以及对于对皮肤的水分平衡起重要作用的多能蛋白聚糖，双蛋白组合物水解物的增强效果特别显著。
2.皮肤的水分含量的提高
以无毛小鼠模型研究胶原蛋白水解物对皮肤水分的影响，并由此获得的知识原则上可以转用于人类皮肤。在三周的时间段内每日用150μg/kg蛋白水解物饲喂动物，相反，对照组接收BSA同时，所有动物每周接收18mJ/cm2皮肤表面积的UV射剂量，由此使皮肤水分受损。测量皮肤的水分含量，测量原理在此基于由皮肤表层结合的水的介电常数引起的测量电容的容量变化，所述介电常数显著不同于大多数其他材料的介电常数。
如上图，相比于胶原蛋白水解物，由双蛋白组合物水解物在一周和三周之后引起的皮肤水分的升高分别更强，这是根据本发明使用的水解物在改进皮肤健康方面的特别效力 的进一步证明。
3.CE-蛋白的合成刺激
即所谓的“角质化包膜”蛋白，对皮肤针对病原菌和有毒物质入侵的屏障功能起重要作用，无毛小鼠上确定CE蛋白外皮蛋白、兜甲蛋白和丝聚蛋白的合成。在这之前将所述无毛小鼠每日用150ug/kg蛋白水解物体重饲喂五周，从皮肤提取蛋白之后，通过SS聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹用特异性抗体进行相对于对照组(用BSA饲喂)的蛋白定量。如上图，所研究的所有三种CE蛋白的合成均受经口摄入的胶原蛋白水解物的刺激，在外皮蛋白的情况下甚至超过三倍。
4.胶原蛋白水解物的抗氧化作用
在无细胞体系中通过丙二醛试验确定低分子量胶原蛋白水解物的抗氧化作用。活性氧物质的形成由于胶原蛋白水解物而平均减少约7%，由此可以减少皮肤区域内DNA损伤的频率，从而可以抵抗老化症状。
通过实验证明：本组合物可以刺激皮肤细胞生物合成细胞外基质蛋白，抵抗老化以及由于环境影响（紫外线辐射或有毒物质等），显著改进皮肤健康，提高皮肤的张力和减少皱纹形成；提高皮肤的水分含量，减轻水分损失伴有的皮肤柔韧性降低，皲裂和过度角质化；增强CE-蛋白的屏障功能，改进了皮肤的水分损失的减少、屏障功能以及针对病原菌和有毒物质的天然保护；改善皮肤组织形态，增加胶原纤维、弹性纤维含量；提高皮肤区域内的抗氧化作用，降低紫外线辐射或突变物质造成的DNA损伤(突变)的频率，减轻皮肤老化症状。
参考文献
1.梁秋芳，胶原蛋白抗氧化与延缓皮肤衰老作用研究，江苏大学，2014
2.王晨，牛骨胶原多肽的制备与清除自由基活性研究，华南理工大学，2019
3.雷学军．抗自由基的天然药物，日用化学工业，2017
4.徐熙明，一种抗皱保湿、改善皮肤弹性的弹性蛋白肽复合固体饮料，2018
5.斯特凡·豪斯曼斯，用于改进人类皮肤、毛发或指甲健康的胶原蛋白水解物，202016