周俊艳
内蒙古东银科技有限公司 010111
摘要：目的 为了评价阴道阻菌凝胶对L929哺乳动物成纤维细胞的生物学反应。方法：试验样品与生长旺盛的L929细胞培养（37℃ 5%CO2）48小时后，染色观察细胞形态，细胞裂解情况。与样品接触48h后，阴性对照：样品区和周围区为观察到反应区；阳性对照：反应区超出样品区10mm以上；试验样品：少量细胞变性；判定为1级。本次试验条件下，阴道阻菌凝胶对L929细胞无毒性作用，在用药护理治疗上的危险性较低，可以进行临床推广。
关键词： 阴道阻菌凝胶；细胞毒性；对照试验；L929细胞
正文：
1.概述：
妇科疾病是现今临床上一种常见病和多发病，目前，临床上主要以药物治疗为主，医生处方多采用联合用药，外用药物（栓剂、泡腾片、凝胶、泡沫）加口服药物；其中外用药占67%。现有药物中外用中药受制剂技术的限制，疗效欠缺，西药中单一药物只对某一类型的炎症有效，多种微生物的联合感染效果不确定。药物因其特性决定了对人体具有一定的损害风险性性或易产生耐药性，因此对其进行试验研究，探讨各种与人体亲密接触的产品的安全性是医药领域的重要内容[1]。
阴道阻菌凝胶是内蒙古东银科技有限公司创新研制的用于妇科炎症的二类医疗器械，通过在阴道壁形成一层保护性凝胶膜，将阴道壁与外界微生物物理隔离，从而阻止病原微生物定植[2-5]。但其长时间接触及凝胶成分与引导组织的反应性，都增加其给人体带来危害风险，因此需要进行试验研究，探讨其风险，以便于人们的健康管理。本研究就阴道阻菌凝胶的细胞毒性进行试验研究分析，以判定其临床使用的安全性[6]。
2.材料与方法：
2.1材料：内蒙古东银科有限草公司，阴道阻菌凝胶，批号：202013017；内蒙古东银科有限草公司，空白凝胶基质，批号：2020318765；阳性对照凝胶基质；
2.2方法：根据GB/T 16886-5:2017方法进行。
将L929细胞培养在含10％胎牛血清和抗生素(青霉素100/ml，链霉素100 ug/ml)的MEM培养液中，置37℃，5％CO2培养箱中培养。用0.5％胰(含EDTA)消化细胞制备成单细胞悬液，计数细胞，调节细胞浓度为1.0×105，取平皿3个，每皿加入上述细胞悬液2ml，37℃，5％CO2培养箱中培养24小时，弃去上清液；待细胞长成单层后，析出原来的培养液，加新鲜培养基至器皿中，然后将一个实验样本与细胞接触，应确保样品覆盖细胞层表面约十分之一。同法制备阴性对照和阳性对照。继续培养48h，取出平皿标出样品所在位置，然后弃样，去除上清液，在每皿中加入2ml中性红，孵育1h，吸弃中性红，加入2ml PBS，显微镜观察细胞形态变化。
3.结果
本次试验条件下，观察在35℃培养18h、24h和48h后的两组L929细胞，观察组与对照组细胞在形态上并无明显差异，观察组均只有1级轻微毒性反应，空白组无毒性反应，阳性对照组则均为4级中毒毒性反应。可以看出，观察组细胞的细胞反应都比较轻微，与阳性对照组存在明显差异，故可认为阴道阻菌凝胶对L929细胞无毒性作用。
4.讨论
细胞毒性的大小用反应分级来表示，分级标准：分级大于2判为有细胞毒性，详见表1[7].
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由表3可以看出，阴道阻菌凝胶对L929哺乳动物成纤维细胞的生物学反应分级为1级，根据分级标准：分级大于2判为有细胞毒性。反之，为无细胞毒性。
妇科凝胶是一种妇科药品，凝胶剂，用于各种妇科阴道炎、宫颈炎的治疗。具有消炎、杀菌、止痒作用。对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等病原体微生物的生长有明显抑制作用。私护凝胶比洗液接触面积大，停留时间长，因此对的温和度、刺激性、安全性要求较高。其使用方式一般为患者每晚睡前清洗外阴后，将给凝胶器前端的前盖取下，插入给凝胶器后端作为推杆；将装有凝胶的给凝胶器缓慢插入阴道深部用食指推动助推杆，利用助推杆将抗菌凝胶推入阴道深处。凝胶都是以中药成分为主，像苦参、蛇床子、红花、银耳等多种中药植物这些成分，不管主打什么功效，妇科凝胶都有一个共同作用，那就是抑菌抗菌，这就决定了，其应用目的是在满足自己需求的基础上，对私处进行健康护理。在本研究中，在35℃培养18h、24h和48h后的两组L929细胞，观察组与对照组细胞在形态上并无明显差异，观察组均只有1级轻微毒性反应，空白组无毒性反应，阳性对照组则均为4级中毒毒性反应。可以看出，观察组细胞的细胞反应都比较轻微，与阳性对照组存在明显差异，故可认为阴道阻菌凝胶对L929细胞无毒性作用。
参考文献：
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作者简介：周俊艳，1977年3月2日，女，内蒙古自治区兴安盟突泉县，汉，本科，执业药师 中级，内蒙古东银科技有限公司，研究方向:医药卫生。