王路长
成都市第二人民医院 四川成都 610017
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，亦称为免疫金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团发生牢固的结合，这种结合是属于静电结合，因此对蛋白质的生物特性不产生影响。免疫胶体金快速诊断技术是80年代继荧光素、放射性同位素和酶等三大标记技术后发展起来的一种固相标记免疫测定技术。它就是以胶体金作为示踪物，以磷酸纤维膜为固相载体，通过渗滤或层析作用，利用抗原抗体特异性反应原理，实现对待测抗原或者抗体的一种快速检测。随着科技的发展，这种技术的应用越来越广泛，人们对于这个技术的掌握也越发的娴熟。如今，这门技术已经被应用到电子显微镜下的研究、光显微细胞学研究等方面。目前已广泛应用于临床诊断中，如病毒细菌病、寄生虫、乙肝、早孕等的检测。根据临床应用大致可以分为两类：:快速斑点免疫金渗透法和胶体金免疫层析法。而这两者在作用的机理上有一定的相似处，它们都要以微孔滤膜为载体，此外，这两者都是在标本与其进行融合之后发生了毛细血管的渗滤作用，最后，我们通过对标记物进行观察，看到明确的实验现象。接下来，让我们分开研究一下它们。
一、斑点免疫金渗滤法：
这种技术的核心是以微孔滤膜为载体。作为一种免疫检测技术，它的原理与其他的一些免疫检测技术没有太多差异，毕竟免疫检测技术都是借助抗原抗体的特异性。针对这门技术而言，也是不例外的。在进行斑点免疫金渗滤法时，我们可以将抗原先滴加于醋酸纤维膜上，紧接着，我们对其进行封闭处理，进而避免外界环境的干扰，完成密闭处理这一流程后，我们要加入待测物质并进行适当地检验，当然，在这之后，我们还要进行适当地清洗，当以上的几个过程完成，我们便可以对此进行细致的观察。在小孔醋酸纤维膜上出现红色反应时为阳性反应，阴性反应不着色。
作为一种从上世纪80 年代就开始应用的方法，很多科学工作者印证了它的可行性。例如Moeremans 等人借助了斑点免疫金渗滤法来进行临床实践研究，并且，他们通过反复实验进行了一定的对比，他们分别用斑点免疫金渗滤法与间接过氧化物酶法进行同一个实验，经过反复的对比和研究，他们发现斑点免疫金渗滤法能够产生更加敏感的实验效果，从这个角度来看，斑点免疫金渗滤法这个方法的临床使用价值是更高的。当然，仅仅依靠Moeremans等人的实验，这个方法还不足以被完全认可。在这之后，肖乐义等人进行了胶体免疫渗滤法快速检测实验，则进一步证实了它的可行，高达97.8％的符合率有力的印证了它的价值。正是因为它的高符合率以及高级权威性，这个方法越发的被人接受，与此同时，人们不忘对其进行修正，经过反复的改进，这个方法也愈发的有效，它也逐渐成当下临床主要检测方式的一种。
二、胶体金免疫层析法：
和斑点免疫金渗滤法相比，胶体金免疫层析法出现的会晚一些，它属于20世纪90年代所诞生的一种新技术。这种技术的发明者是Heggs等科学家，他们在对人绒毛膜促性腺激素的测定实验中首次应用了这个技术。此外，他们通过反复的实验发现：在应用胶体金免疫层析法进行实验测定时，它所产生的应用效果极优。这也为胶体金免疫层析法被广泛的应用于各种实验中奠定了基础。同时，它的出现与广泛应用也大大促进了近代医疗事业发展和免疫检测技术的进步。
既然它的出现带来了如此大的改变，那么它的作用机理又是什么呢？接下来，让我们简单了解一下。胶体金免疫层析法主要是将特异性的抗原或抗体以条带状固定在醋酸纤维膜上，而胶体金标记试剂则吸附在结合垫上，当待测样品加入到试纸条一端的样品垫上后，通过毛细管作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后发生相互反应，再移动至固定抗原或抗体的区域时，待测物和金标试剂的复合物又与相应抗体或抗原发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，通过可目测的胶体金标记物得到直观的显色结果，而游离标记物则越过检测带，以此达到与结合标记物自动分离的目的。
胶体金免疫层析法具有它的特色与优势。首先，这种方法十分的便捷，它需要的实验试剂很少，这样不仅可以节约实验材料，也可以在一定程度上减少实验的容错率，毕竟越是复杂和繁琐，我们越容易因为心境的变化而出现失误。其二，这种实验方法更为快捷，减少了不必要的实验步骤，它可以在极短的时间内为我们提供实验数据，为我们可以省下更多的时间进行下一步的研究。那为什么在现代的众多检测技术中，人们会给予它很高的评价呢，其最突出的是能在保证成本、时间等因素的同时，有着较好的检出率和实验效果。如：周继文等建立了用胶体金标记乙肝表面抗体制成免疫层析试纸条检测血液中的乙肝表面抗原，其灵敏度可达1ng/ml，同时与酶免疫法进行比较，两种方法的符合率高达 99%；吴英松等利用胶体金标记抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶单抗制成诊断恶性疟原虫的免疫层析条，检测重组恶性疟原虫乳酸脱氢酶最低检测灵敏度也达到1ng；另外，李志梁等利用胶体金标记抗人心肌肌钙蛋白T检测cTnT的试纸条，灵敏度同样达到0.5ng/ml，在与国外同类产品比较，其符合率也达到了92%。因此，它被广泛的应用于多种实验，并且人们在反复应用它的同时，也在不断地优化它。
总之，斑点免疫金渗滤法和胶体金免疫层析法的出现以及优化让免疫金快速诊断技术在临床应用方面更为普遍。它们的出现大大的提升的检验的速率以及质量，这为医生能够迅速掌握患者的病情提供了保障，为患者可以尽早的完成相关治疗提供了技术保证，由此可见，我们应该积极地推广免疫金快速诊断技术在临床方面的使用。当然，在应用的同时，我们也要注重创新与发展，我们当根据自己的经验和知识储备对其进行改进与优化，在对不同疾病进行检测的时候，我们可以根据自己的理解寻找更为合适的方法，而不是一味的照搬。
最后，希望大家通过阅读这篇文章能够初步了解免疫金快速诊断技术。通过对本文的一个涉猎，我们在面对免疫金快速诊断技术最起码不会感到陌生。这样一来，患者在面临需要快速诊疗时，对于检验方法多一分选择，当能及时拿到检验结果，可以有助于消除他们心中的恐慌与不安，这对于患者来讲，他们的负面情绪消失，更有利于治疗的进行；而对于医生来讲，患者的理解和配合会让治疗的过程更加轻松，所以，简单地涉猎还是有很大的好处的。