李会端
河北长天药业有限公司，河北保定 071000
【摘要】目的：建立生产设备清洁时果糖二磷酸钙的残留量的检测方法。方法：采用总有机碳（TOC）法测定，以外标法计算含量。结果：果糖二磷酸钠质量浓度在0.4～10㎎/L范围内线性关系良好，平均回收率为99.1%，RSD为0.7%。结论：总有机碳法操作简便、快速，结果准确，适用于制药设备清洁时果糖二磷酸钙的残留量的检测。
【关键词】总有机碳；果糖二磷酸钙；残留量
果糖二磷酸钙是化学药物，用于心肌缺血的辅助治疗。根据《药品生产质量管理规范》要求，药品生产的每道工序完成后，应对设备进行清洗，以防止药品污染和交叉污染。总有机碳法能够快速分析样品，作为一种非专属方法，TOC法能同时检测多种目标化合物，相比传统分析方法HPLC法显现出更多的优越性，确保生产及产品一致性、安全性。
一、化学分析测定方法
采用总有机碳测定法，取果糖二磷酸钠对照品配成对应浓度，用总有机碳分析仪测定，同法对待测样品进行测定，样品的TOC值不得大于对照品溶液的TOC值。
二、 检验方法验证
1 仪器与试剂
1.1仪器
总有机碳分析仪 BT125D电子天平
1.2 标准品、试剂
蔗糖对照品；1,4-对苯醌对照品；果糖二磷酸钠对照品；超纯水
2 方法与结果
2.1 系统适应性试验
精密称取蔗糖和1,4-对苯醌对照品适量，分别用超纯水配制每升含碳约0.500mg的溶液，作为系统适用性溶液，分别测定其响应值，计算响应效率。其结果为101.6% ，（应为85%～115%）符合规定，可见该仪器性能良好 ，满足测定要求。
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2.2 线性考察
精密称取果糖二磷酸钠对照品约10mg，置于100ml量瓶，加水溶解并定容至刻度，作为贮备液。精密量取上述贮备液1ml置于250ml容量瓶，分别再量取贮备液1，2,5,8，10ml各置于100ml容量瓶，加水定容至刻度，得到果糖二磷酸钠浓度分别为0.4，1,2,5,8，10mg/L一系列标准溶液。测定各样品溶液的TOC值，以溶液浓度X（mg/L）为横坐标，TOC检测值Y（ppm）为纵坐标绘制标准曲线，并计算线性回归方程及相关系数，线性回归方程为Y=0.101 X+0.077，r=0.9995，结果表明，在0.4-10mg/L浓度范围内线性关系良好。
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2.3 精密度
取10mg/L果糖二磷酸钠溶液重复测定6次，结果精密度的RSD为3.2%。（RSD值不得大于5.0%）。
2.4 检测限和定量限
对空白超纯水溶液进行6次检测，计算6次结果的标准偏差，检测限=3.3σ/k，定量限=6σ/k，k=线性方程的斜率。结果：空白超纯水样品标准偏差为0.000621，线性方程的斜率为0.101，检测限为0.02mg/L，定量限为0.036mg/L。
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2.5擦拭法回收率试验
精密量取浓度为100 mg/L果糖二磷酸钠贮备液5ml，分别点布于6块10cm×10cm的不锈钢板上，将点好样的不锈钢板置60℃烘箱中，干燥后用湿润棉签擦拭不锈钢板表面，将擦拭后的棉签置于烧杯，分次洗涤转移至100ml容量瓶中，加水至刻度，充分摇匀，分别作为样品溶液1-6。另精密量取浓度为100mg/L果糖二磷酸钠贮备液5ml,同法转移至100mL容量瓶中，摇匀，定容，作为对照溶液。依法测定TOC值，计算回收率，回收率（%）=TOC样品/TOC对照×100%。平均回收率为99.1%，RSD为0.7%。
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2.6生产设备清洁验证
对果糖二磷酸钙连续3批生产用到的设备和管路的清洁效果进行验证，结果数据表明，TOC测定值的稳定性和各批次之间的重现性均比较理想，果糖二磷酸钙残留浓度低于对照溶液，达到清洁目的。
3.结论
方法学研究显示TOC法的检测限度低，可得良好的线性关系、精密度，其擦拭回收率项证明了该取样方法对果糖二磷酸钙具有较好的回收率，证实了该方法可以作为果糖二磷酸钙的清洁验证方法。TOC法能够快速分析样品，作为一种非专属方法，TOC法能同时检测多种目标化合物，相比传统分析方法HPLC法显现出更多的优越性，TOC法应用于清洁验证中切实可行。
参考文献
［1］国家药典委员会，中国药典，中国医药科技出版社2020
［2］国家食品药品监督管理局药品生产质量管理规范2010