范丽君
河北长天药业有限公司 河北 保定071000
摘要： 本课题旨在分离提取十全大补丸中的桂皮醛成分，并建立高效液相色谱法对该成分的含量测定方法进行实验研究。结果表明此方法简便、准确、重复性好，可作为该品种的质量控制方法。
关键词：高效液相色谱法；桂皮醛；含量测定
前言 十全大补丸是《中国药典》一部收载品种。具有温补气血的功效。用于气血两虚，气短心悸，头晕自汗，体倦乏力。处方中的肉桂主要有效成分为挥发油，含油量在1-5.8%，油中主要成分为桂皮醛，含量占总油量的75-85%。这类成分，易挥发，因此控制其含量是至关重要的，《中国药典》尚未收载控制该成分的指标和方法，仅收载了白芍、当归、黄芪的薄层鉴别和芍药苷的含量测定方法。依据《中国药典》一部的肉桂和《国家中成药标准汇编》内科肾系分册收载的济生肾气片含量测定项下，均以桂皮醛为含量测定指标。为确保临床用药的安全有效，我们采用HPLC法对十全大补丸中桂皮醛含量测定方法进实
验研究。
1.实验部分
1.1实验仪器
Agilent1200高效液相色谱仪 岛津UV-2450紫外分光光度计
Mettler AE-240电子分析天平
1.2检测波长的选择
称取桂皮醛对照品适量，配制成10μg/ml的对照品溶液，在200nm～400nm波长下进行光谱扫描。紫外扫描结果表明，桂皮醛在290nm波长处有最大吸收（见图1）与《中国药典》一部肉桂[含量测定]项下桂皮醛含量测定的检测波长一致，故选择290nm作为检测波长。
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1.3色谱条件与系统适用性试验
本品采用流动相乙腈-0.5%磷酸溶液（25：75）；流速1.0 ml∕min；
色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温30℃；检测波长290nm；理论塔板数按桂皮醛峰计算应不低于3000。
1.4对照品溶液的制备
称取桂皮醛对照品0.01151g，置100ml量瓶中，加乙醇使溶解并稀释至刻度，精密量取10ml置100ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
1.5 供试品溶液的制备
取本品适量，剪碎，取1.6g，精密称定，置25ml量瓶中，精密加乙醇20ml，浸渍1小时，超声处理40分钟，冷却至室温，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
1.6专属性试验
按处方的十分之一量，称取除肉桂外的其他药味，制备阴性对照溶液。分别精密吸取上述对照品溶液10μl，供试品溶液、阴性对照溶液各20μl，注入高效液相色谱仪。结果表明，供试品溶液色谱中，在与对照品溶液保留时间一致处有相同色谱峰，而阴性对照溶液色谱中，在与对照品溶液色谱峰相同的保留时间处无峰出现，表明十全大补丸的其他药味组分对桂皮醛测定无干扰。
1.7线性试验
取浓度为0.01151mg／ml的桂皮醛对照品溶液，分别进样1μl，5μl，10μl，浓度为0.1151mg／ml的桂皮醛对照品溶液，分别进样5μl和10μl测定，记录色谱峰面积（Y1：124.935、Y2：636.224、Y3：1276.092、Y4：6381.926、Y5：12682.640），以对照品的峰面积Y为纵坐标，以对照品进样量X（μg）为横坐标，进行线性回归计算，得回归方程：Y=11024.936X+7.382，r=0.9999。结果表明，桂皮醛在0.01～1.15μg范围内呈良好线性关系。
1.8精密度试验
取上述桂皮醛对照品溶液（浓度为0.01151mg／ml），按正文含量测定，重复进样6次，每次进样10μl，记录所得色谱峰峰面积（A1：1238.359、A2：1238.278、A3：1242.647、A4：1241.191、A5：1242.550、A6：1237.192），计算
平均值1240.036，RSD=0.2%，结果表明，该方法精密度良好。
1.9稳定性试验
取本品1.6g，精密称定，按“供试品溶液的制备”项下操作，制成供试品溶液，室温下放置，在上述色谱条件下，分别于第0小时、2小时、4小时、6小时、8小时、12小时、24小时进样，每次进样20μl，记录峰面积（A1：1199.615、A2：1193.969、A3：1193.784、A4：1191.765、A5：1190.893、A6：1196.956、A7：1194.812），计算平均值为1194.542，RSD=0.3%，表明室温下，样品溶液至少在24小时内稳定。
1.10重复性试验
取同一批十全大补丸样品，分别取1.28g、1.60g、1.92g各三份，精密称定，按照“供试品溶液的制备”项下操作，在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液10μl及供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录峰面积，计算桂皮醛含量（C1：0.0875、C2：0.0870、C3：0.0858、C4：0.0847、C5：0.0847、C6：0.0849、C7：0.0850、C8：0.0849、C9：0.0849），平均值0.0855 mg/g，RSD=1.3%，结果表明，该方法重复性良好。
1.11准确度试验
采用加样回收率测定法，取上述重复性试验所用的样品9份，每份0.8g，精密称定，每三份为一组，每组按样品中桂皮醛含量的80%、100%、120%分别精密加入浓度为0.01151mg／ml的桂皮醛对照品溶液3.5ml、6.0ml、8.5ml，再加乙醇，按照“供试品溶液的制备”项下操作，按正文含量测定方法测定，计算回收率（①97.77②102.23③97.52④98.99⑤99.57⑥99.57⑦98.47⑧98.26⑨98.06），平均回收率为98.9% ，RSD=1.5%，结果表明，该方法准确度良好。
2.结论
从方法学验证实验可以看出该HPLC法有良好的线性、精密度、稳定性、准确度，证明该方法准确可靠，可用于十全大补丸桂皮醛的含量测定，有效地控制十全大补丸的质量，保障临床用药安全有效。
参考文献
[1] 苗明三，现代实用中药质量控制技术，人民卫生出版社，2000，420。
[2] 国家药典委员会，《中国药典》一部。
[3] 国家药品监督管理局，《国家中成药标准汇编》内科 肾系分册， WS-10390（ZD-0390）-2002。