卢春凤 、李真、 史方
中华人民共和国安阳海关 河南省安阳市 455000
摘 要： 目的 通过多种压力蒸汽灭菌器监测方法，验证压力蒸汽灭菌器灭菌效果。方法 采用生物指示剂、化学指示胶带、化学指示卡和留点温度计结果比较法。结果 在灭菌程序固定的前提下，四种监测方式均可指示灭菌过程，亦可较准确地指示灭菌终点。化学指示胶带和化学指示卡快速简便；生物监测法为最终结果判断，但所需时间较长，不能在灭菌处理后立即判断灭菌结果；留点温度计能够验证压力蒸汽灭菌器温度是否分布均匀，且达到所需温度，或者温度过高。结论 四种监测方法各有利弊，但鉴于本实验室实际情况，采用每批使用化学监测法监测，定期使用生物监测法和留点温度计进行监测。
关键词: 压力蒸汽灭菌生物指示剂；化学指示胶带；化学指示卡；留点温度计
微生物实验室除少数培养基只需加热溶解，不需高压灭菌外，大部分培养基均需121℃高压灭菌15分钟或者115℃高压灭菌15分钟，尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底，直接关系到试验结果。?本实验室使用下排式压力蒸气灭菌器，由于影响灭菌效果的因素较多，因此必须认真对压力蒸气灭菌器灭菌效果进行质量监测，以确保灭菌效果。
1．试验材料
(1)试验用嗜热脂肪芽胞杆菌：压力蒸汽灭菌生物指示剂
(2)试验用化学指示卡：为同一生产批次化学指示卡。
(3)试验用化学指示胶带：为同一生产批次压力蒸气灭菌指示胶带。
(4)高压蒸气灭菌器：致薇GI80TW
(5)电热恒温培养箱：DNP-9052型。
(6)留点温度计
2．方法与结果判断
2.1方法 将压力蒸汽灭菌生物指示剂放于压力蒸气灭菌专用标准测试包中，将留点温度计的水银柱甩至40℃以下和化学指示卡放入敞口试管中，化学指示胶带分别贴于测试包内外侧和试管壁上。以上验证材料每次各准备5份，分别放置在压力蒸气灭菌器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。压力蒸汽灭菌必须使蒸气顺利进入灭菌器内，与灭菌物品接触，并将原有的冷空气排出方可达到灭菌的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2/3)。待压力蒸汽灭菌器灭菌工作完成后，将灭菌后的压力蒸汽灭菌生物指示剂内含的安瓿瓶挤破，与一支同批号未处理的阳性对照管一起置56℃恒温培养48小时后，观察培养液颜色变化。
由于实验室常用压力蒸汽灭菌方式为121℃高压灭菌15分钟和115℃高压灭菌15分钟，故每次验证各重复三次，共做六次。
2.2结果判断 a、压力蒸汽灭菌生物培养指示剂如培养基颜色变为黄色，说明菌片中的嗜热脂肪芽胞杆菌尚未完全灭活，细菌仍可在培养基中生长，分解葡萄糖产酸变为黄色，即灭菌不合格。如培养基颜色仍为紫色，则说明芽胞已灭活。同批号阳性对照管培养液颜色由紫色变为黄色，对照有效即灭菌合格。若阳性对照管培养液颜色仍为紫色，可能培养条件不符合要求，或生物指示剂有问题，故此次灭菌效果监测无效。本次监测试验证明5个点六次试验均达到灭菌要求，且生物指示剂在效期内有效。b、标化合格的留点温度计用于验证试验，每次监测后留点温度计的温差应存1℃之间，则说明灭菌器内的温度分布是均匀的。本次验证121℃高压灭菌15分钟留点温度分别是121.2℃、121.3℃和121.6℃，115℃高压灭菌15分钟留点温度分别是114.9、115.1℃和115.3℃℃。c、化学指示卡上的指示色块，在高压蒸气灭菌时，由淡黄色变为黑色，随着颜色变化的深浅，并与对照色相比，可判断灭菌效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存，遇潮会变色，影响灭菌效果的观测。本次监测试验证明5个点六次试验均达到灭菌要求。化学指示卡变黑程度与对照色一致，说明高压蒸气灭菌效果合格。d、化学指示胶带经压力蒸气处理后，测试包内外侧和试管壁上的化学指示胶带斜条色带，由浅黄色变成棕褐色或黑色为化学指示胶带完全变色，指示结果为合格。
3 讨 论
压力蒸汽灭菌器属于强检仪器，但强检只是对仪器物理参数的考核，所以做过强检的灭菌器还必须进行灭菌效果的验证。一些实验室常常忽略了这个重要的问题，国内市售的一下压力蒸汽灭菌器，往往仪器指针达到所需的温度，但灭菌物品的实际温度却未达到要求，导致灭菌物品不彻底，影响实验结果。另外培养基除了灭菌不彻底，影响培养基的使用及结果判断外，还有一些含糖的培养基（如三糖铁培养基）需在115℃灭菌，如果灭菌温度过高就会影响培养基的使用效果和结果判断。
生物指示菌的灭活情况可直接指示灭菌效果。因此，生物指示监测法通常用于压力蒸气灭菌监测的最终结果判断。但由于检测所需时间较长，不能在灭菌处理后立即判断灭菌结果。因此，用于对灭菌后立即使用的物品进行灭菌效果评价意义不大。
鉴于不同压力蒸汽灭菌器监测方式的利弊，本实验室采用每批次灭菌必须使用化学监测法（化学指示胶带或化学指示卡）来做灭菌效果监测，其次定期采用生物培养指示剂和标化合格的留点温度计对压力蒸汽灭菌器进行灭菌效果监测。
参考文献：
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