杨世龙
浙江晖石药业有限公司 浙江省绍兴市 312000
摘要：生物制药就是把生物工程技术应用到药物制造领域的过程,生物药物最主要应用的方法就是基因重组原理.生物药物分析是生物材料中的药物分析,应用于药物的体内与临床研究.生物样品中药物浓度的测定是否准确,不仅关系到临床用药的安全性和有效性,还涉及到新药的药代动力学和生物利用度等体内参数的准确性,所以必须对生物药物分析方法进行质量控制。
关键词：生物药物分析;质量控制
1.分析方法质量控制的必要性
生物制药过程中的药物分析可以理解为是检测制药原料以及制剂总药物及其有关杂质含量的专用手段，其主要作用是控制生物药物从生产制造再到临床应用的总体质量。生物药物分析作为生物药物研发与临床治疗应用的重要组成部分，必须保证生物药物检测的实施质量，国内当前的临床治疗用药相对缺乏安全性以及时效性，为保证我国临床治疗的综合质量，医学领域着力研讨临床用药的安全性及其时效性，生物药物分析在这种背景下应运而生，国内医学领域的专家学者将生物药物分析致力于控制临床用药的安全性及其时效性，因此生物药物分析法是国内生物制药领域中常见到的质量控制手段之一。目前，生物药物分析法正处于试运行状态，各项控制技术尚未成熟，自身的创新研发也存在着较大的进步空间。国内当前的临床用药需要安全性与时效性的支撑，而生物药物分析方法作为检测生物制药原料的基本手段，必须创新自身检测方式，拓宽研发思路，以此为基础，凸显自身对国内临床用药的必要性。
2.须考核的方法和内容
2.1须考核的方法
目前，国家卫生局具备明确规定，新药申报资料、动物及人体药代动力学、生物利用度所应用的分析方法都必须经过严格的考核。现阶段，在国内新药申报资料、动物及人体药代动力学、生物利用度三个方面上最常见到的就是仪器分析法和生物学分析法，其中，仪器分析法具体包括光谱法（比色法、UV发以及荧光法）、色谱法以及联用（HPLC、GC、GCMS），而生物学方法的具体应用有免疫分析法（RIA、ELA、FLA）以及微生物测定法。虽然以上分析方法都是国内较为常见且经常用到的，但是当这些分析方法出现创新改革、完善优化、部分修改以及移植文献时，必须重新获得考核资格并通过考核，才能够再次应用。
2.2须考核的内容
近年来，国际医学领域对生物药物分析方法的研究与讨论从未停止，国外医学专家曾提出将生物药物分析方法初始阶段与试用阶段的质量作出整理归纳，同时将根据整理归纳出的结论对两个阶段提出不同的要求标准。由于试用阶段较为重要，因此专家建议将试用阶段具体分为新药筛选期、临床前研究期以及临床研究期三个环节，并根据各环节针对对象的差异提出不同的要求标准。结合国内外专家学者的相关文献来看，当前对生物药物分析方法的考核内容可以分为三个方面。首先是书面详细报告测定方法，主要包括样品采集、处理与贮存、测定时样品预处理方法、测定操作、仪器及其参数、数据处理与结果计算等，以上多个方面足以体现出书面详细报告测定方法的综合性与全面性；其次需要考核的内容是提供方法思路时对方法质量全面考核结果与数据；最后一点需要考核的内容是分析方法的应用阶段的质控数据。
3.生物药物质量的检定内容及其分析方法控制方式
3．1生物药物的质量检定内容
3.1.1化学成分分析
主要包括蛋白质、糖链的构造,各种理化特性解析、确认、鉴定、均一性,纯度检定、定量等。蛋白质的构造、组成解析项目有:（1）氨基酸组成分析；（2）末端氨基酸及末端氨基酸序列分析；（3）巯基和二硫链数量和位置分析；（4）肽图分析；（5）全氨基酸序列分析；（6）高级结构分析和分子量测定等。
3.1.2生物活性鉴定
生物活性测定目前主要用于鉴别、效价测定和比活性测定三个方面,鉴别试验是应用参照品将制品与天然产品通过生物学试验比较,确定其与天然产品的一致性。效价测定是对产品进行定量,比活性测定是检查产品的纯度。
生物技术细胞因子产品大多采用活细胞方法来判断其生物活性,这种方法设备要求较高,费时,有时实验变异度较大、有干扰现象。
3.2生物药物分析方法的质量控制
3.2.1准确度
准确度是指分析方法测得样品中的药物浓度与该样品中药物的真实浓度相接近的程度,它反映分析方法测量值的正确性。测定准确度可采取“回收实验”,即于空白生物基质中加入已知量的药物标准品,混匀后作为考核样品。也可采取“加样回收实验”,即取已准确测定含量的样品,再加入已知量药物标准品,混匀后作为考核样品。考核样品所含药物浓度应包括高、中、低3种,且分别接近样品最高药浓、平均药浓和最低药浓,每个浓度测定4～6个样品。测定时应注意疏水性药物易被玻璃器皿或聚乙烯管表面吸附而降低回收率的现象。
3.2.2精密度
精密度是指一种均匀样品经多次取样重复分析后,各次结果之间的符合程度,通常用标准偏差s或相对标准偏差RSD（即变异系数CV）表示。测定分析方法精密度时应自同一均匀样品多次取样,每份样品照分析方法从样品制备开始至得到分析结果独立完成,且取样份数（n）要足够统计学处理（一般应n≥4）。测定浓度在高、中、低范围各取1个,每个浓度取5个以上样品,并只作单次单样分析。一般要求日内精密度RSD≤10%,日间精密度RSD≤15%,较低浓度水平或复杂的方法可放宽到20%。
3.2.3专属性
专属性是指在样品中存在干扰成分情况下,分析方法能够准确和专一地测定待分析药物及其代谢物的能力。通常是同时分析有干扰成分存在(杂质、降解产物、有关物质或空白基质,如激素、蛋白质、碳水化合物、脂质、饮食成分等)和无干扰成分的两种样品中分析物含量,比较测定结果的偏离程度,并用结果差值表示专属性,用以表明分析复杂样品时分析方法受干扰的程度。关于杂质,要特别注意合用药物及药物代谢产物的干扰。药物的代谢物通常极性变大,一般不难与原药分离,通过在不同条件测定用药前后的生物样品,即可了解有无代谢物及其是否干扰原药的定量。
3.2.4检测限
（LOD）和定量限（LOQ）检测限是在规定的实验条件下,分析方法能够检测(但不需定量)的样品中分析物的最低浓度B定量限是在规定的实验条件和具有可接受的精密度和准确度前提下,分析方法能够测定样品中分析物的最低浓度。LOD是限度检验效能指标,只判断分析物含量是高于或低于某一水平B而LOQ是定量分析效能指标,须确定分析物具体含量。
3.2.5线性度和线性范围
线性度是指用分析方法测定样品得到的响应值与规定范围内浓度呈比例变化之程度,其测定方法是测定浓度在一定范围内的样品,将得到的响应值对浓度进行最小二乘法线性回归,则围绕回归斜率的变异即为线性度。线性度要求r≥0.9900,截距与最高浓度响应值之比应≤5.0%。线性范围是指在具有合适的精密度、准确度和线性度前提下,分析方法能够测定样品中高、低浓度间的范围,可通过测定加有不同浓度待测组分标准品的模拟生物样品来确定。
3.2.6稳定性
稳定性实验的目的是检出在整个样品收集、处理、贮存、制备及测定过程中分析物的降解情况。常用加药的空白样品进行稳定性实验,然后将实验结果外推至研究样品。
结语
生物药物分析方法对药物原料中的药物含量有着严格的要求标准，因此生物药物分析方法能够有效提高临床药物的治疗效果，并为国内临床用药提供安全性与时效性保障生物药物分析方法对我国临床用药具有重要意义，在实现创新发展的过程中，生物药物分析方法必然会成为未来的主流发展趋势之一。
参考文献
[1]权宇彤，杨艳，李帅，等.生命科学专业药物分析实验教学方法的改进[J].教育教学论坛，2018（08）：120-121.
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