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病原微生物检验中分子生物学技术的应用效果分析

发表时间：2021/7/22 来源：《医师在线》2021年2月4期作者：王成儒夏永祥刘景

[导读] 研究分析分子生物学技术手段运用在病原微生物临床检验的有效性。

王成儒夏永祥^通讯作者刘景
　　（南京市雨花医院(南京市第一医院雨花分院）检验科；江苏南京210000）
【摘要】目的：研究分析分子生物学技术手段运用在病原微生物临床检验的有效性。方法：此次研究选取72例接受我院病原学微生物检验的患者，选取时间为2020年7月—2021年1月，将其平均划分为参照组（36例，常规反转录RT-PCR方法）与实验组（36例，实时荧光RT-PCR方法），分析两组患者的病原微生物检验结果和满意度情况。结果：参照组病原微生物阳性检出率达到30.55%（11/36），相较于实验组61.11%（22/36）明显偏低，两组比较呈现为P＜0.05的差异性；参照组病原微生物检验满意度达到75.00%，相较于实验组97.22%明显较低，两组比较呈现为P＜0.05的差异性。结论：在病原微生物临床检验期间，借助分子生物学技术手段，可取得比较理想的效果，特别是实时荧光RT-PCR方法的运用，能进一步提升病原微生物阳性的检出效率。
【关键词】病原微生物；临床检验；分子生物学

　　病原微生物临床检验主要是将人体中的血液、排泄物、尿液等进行样本提取，通过化验、分离、培养等环节[1]，对其病原微生物展开临床检验的一种手段。此次临床研究，为了说明在病原微生物检验中，分子生物学技术应用具有可行性，将选取72例患者作为研究主体，对比不同检验方式的病原微生物阳性检出概率，现将研究结果展开如下汇报。
1.临床资料与方法
1.1临床资料
此次研究选取72例接受我院病原学微生物检验的患者，选取时间为2020年7月—2021年1月，将其平均划分为参照组（36例，常规反转录RT-PCR方法）与实验组（36例，实时荧光RT-PCR方法）。其中，参照组：19例为男性，17例为女性，年龄均在26岁-60岁之间，平均年龄（43.23±3.22）岁；实验组：18例为男性，18例为女性，年龄均在26岁-61岁之间，平均年龄（43.63±3.34）岁。两组研究主体的临床资料对比，如性别对比、年龄对比等经统计学检验P＞0.05，不存在统计学意义，分组形式可比。
1.2检验方法
　　参照组运用常规反转录RT-PCR方法，实验组运用实时荧光RT-PCR方法。具体检验方法如下：第一，提取样本肝素抗凝，展开核细胞分离处理，便于RNA制备，用TRIzoI1一步方法提取总RNA；运用纯化技术、克隆技术等先进手段，在形成的abl基因置于PUCm-媒介之中[2]；第二，基于定量分析的方式，在重组质粒转变环节、含菌株筛选环节、扩增处理、提取处理等方式，结合分子量与阿伏伽德罗常数转变成分子拷贝数，根据109拷贝/μl10倍稀释的标准，形成阳性模板，将其放在冰箱内保存，冰箱温度控制在-20℃；应用TaqMan探针在QR-PCR设备中，同时检验基因与其基因表达。
1.3观察标准
　　对比参照组与实验组应用不同检验方法的病原微生物阳性检出概率与检验满意度情况。其中，检验满意度对比运用我院自制的满意度调查量表，统计两组患者的评分情况，评分以100分为满意，评分超过90分以上说明十分满意，评分低于89分且高于80分说明一般满意，评分低于79分以下说明不满意。
1.4统计学处理
两组患者临床资料均运用版本为SPSS 21.0统计学处理软件，展开数据处理，计数资料用（百分比，病原微生物阳性检出率、检验满意度）表示，展开X2检验；计量资料用（均数±标准差）表示，展开t检验，差异对比存在统计学意义，则P＜0.05。
2.结果
2.1参照组与实验组病原微生物阳性检出情况
　　　在病原微生物阳性检出概率对比中，参照组为30.55%（11/36），相较于实验组61.11%（22/36）明显偏低，两组比较呈现为P＜0.05的统计学差异，见表一。

3.讨论
　　　此次临床研究结果表明，参照组病原微生物阳性检出率达到30.55%（11/36），相较于实验组61.11%（22/36）明显偏低；参照组病原微生物检验满意度达到75.00%，相较于实验组97.22%明显较低，两组比较呈现为P＜0.05的差异性。可见，在临床病原微生物检验期间，利用实时荧光RT-PCR方法的阳性检出率比较高，可以体现分子生物学技术手段的应用可行性。该临床研究结果和曹利华等[3]研究的基本结论大致相同，都说明实时荧光RT-PCR方法的应用，在病原微生物阳性检验中可获得较高的检出效率。除此之外，刘元江等[4]在临床实验中强调，PCR方法作为分子生物学技术的重要组成部分，是一种常用的体外酶促合成DNA片段形式，由退火环节、变形环节、伸展环节共同形成，以此实现指数级快速扩增DNA的目的，加之实时荧光RT-PCR方法具有有效性高、检验快速的优势作用，能够在病原微生物检验中起到良好的作用效果。
总而言之，在病原微生物检验中，应用分子生物学技术手段应用效果十分明显，尤其是实时荧光RT-PCR方法可使病原微生物阳性检出概率进一步提升，临床应用价值明显，值得推广应用。
参考文献：
[1] 李玲,杨丽玮.病原微生物检验中分子生物学技术的应用效果分析[J].临床检验杂志(电子版),2019,8(03):179.
[2] 王丽琴.病原微生物检验中分子生物学技术的应用[J].健康必读,2019,002(007):53-54.
[3] 曹利华.病原微生物检验中分子生物学技术的应用研究[J].国际感染病学(电子版),2019,8(03):12-13.
[4] 刘元江.分子生物学技术在病原微生物检验中的应用探讨[J].临床检验杂志(电子版),2020,009(003):372-373.